IL-10基因多態性與復發性流產相關性的Meta分析*

袁恩武，閆廣偉，代延朋，邢金芳

(鄭州大學第三附屬醫院：1.檢驗科;2.病理科， 鄭州 450052)

復發性流產(RSA)是指一對夫婦連續發生兩次或兩次以上的自然流產[1]。RSA是妊娠常見并發癥且病因學復雜[2-3]。白細胞介素(IL)-10主要由外周血輔助T細胞(Th)2細胞產生，其可以下調Th1細胞產生IL-12和干擾素(INF)-α等細胞因子來調節Th2細胞的免疫反應[4]。研究表明， IL-10 基因多態性直接影響體內 IL-10的表達水平，從而和疾病的易感、嚴重性及疾病的發展進程密切相關[5]。IL-10基因位于染色體1q31-32上，由5個外顯子和 4個內含子組成[6]，IL-10在啟動子區域存在3個單核苷酸多態性(SNP)：1082G>A(rs：1800896)、819C>T(rs：1800871)和592C>A(rs：1800872)。 雖然有研究顯示IL-10基因多態性和RSA的發生有關，但不同的研究得出的結果并不一致，現有相關Meta分析文章也存在分歧。因此本研究通過檢索國內外已發表的IL-10基因多態性與RSA相關文章，采用Meta分析方法進行綜合評價，探索兩者的相關性，為RSA的臨床診斷和相關機制的研究提供依據。

1 材料與方法

1.1文獻檢索 檢索PubMed、Embase、Web of Science、中國知網、萬方知識服務平臺和維普數據庫，文獻檢索時間為建庫至2016年10月1日。英文檢索詞：RSA,recurrent spontaneous abortion,recurrent miscarriage,recurrent pregnancy loss,IL-10,interleukin-10,gene,polymorphism,SNP；中文檢索詞為復發性流產、基因多態性、IL-10、白細胞介素-10。采用主題詞結合自由詞檢索的方式，并人工檢索納入研究的參考文獻。

1.2納入和排除標準

1.2.1納入標準 (1)入選文獻必須是IL-10基因多態性與RSA相關研究且RSA定義明確(即兩次或兩次以上的流產)；(2)研究方案為病例對照研究，并且文獻中明確給出病例組和對照組不同基因型的具體人數；(3)病例組為患有RSA的婦女，對照組為至少1次成功妊娠且無自然流產史的健康婦女，研究中病例組和健康對照來源于年齡、民族等一般信息均衡可比的統一人群。

1.2.2排除標準 (1)未給出RSA的明確定義；(2)數據不完整或不能計算出不同基因型的基因頻數；(3)重復或有重疊數據文章。

1.3文獻質量評價和資料提取 由兩名評價員獨立按照納入和排除標準進行文獻篩選，如遇分歧進行商討或由第3名評價員裁決。對篩選出的文獻提取主要內容，包括作者、發表時間、國家地區、病例組和對照組3種基因型的例數等。同時由兩位評價員根據紐爾卡斯-渥太華(NOS)評分量表對納入文獻的質量進行評價，滿分為9分，若總分大于或等于6分為高質量研究。評價標準包括病例組與對照組的選擇(4分)，病例組與對照組的可比性(2分)，病例組與對照組暴露因素測量(3分)。

1.4統計學處理 采用RevMan 5.3軟件進行Meta分析，選擇等位基因模型、顯性基因模型、隱性基因模型、純合子模型4種遺傳模型進行Meta分析。通過Q檢驗對納入研究進行異質性檢驗，若各研究結果I2≤50%表明無明顯異質性，采用固定效應模型進行分析，否則采用隨機效應模型進行分析，并根據國家和地區進行亞組分析。以OR和95%CI作為統計指標，以P<0.05為差異有統計學意義。用χ2檢驗來分析對照組的Hardy-Weinberg平衡，通過繪制漏斗圖評估發表偏倚。

2 結 果

2.1文獻檢索結果 初步篩選得到551篇相關文獻，按照納入和排除標準進一步閱覽標題和摘要剩余49篇，詳細查看全篇，排除缺失數據和綜述類等不滿足納入標準的文獻，最后納入文獻18篇[7-24],NOS評分均大于或等于6分，累計病例2 688例，對照2 522例，12篇文獻研究-592A/C位點，8篇文獻研究-819C/T位點，14篇文獻研究-1082G/C位點。文獻篩選流程見圖1，納入各項研究的相關信息見表1～3。

圖1 文獻篩選流程及結果

納入文獻年份國家地區病例組基因(n)AAACCC對照組基因(n)AAACCCNOS評分(分)HWEP值楊秋紅等[7]2010年中國亞洲53642534853770.260ZAMMITI等[8]2006年突尼斯非洲5193206254113480.000

續表1 關于IL-10-592A/C位點的納入文獻的基本特征

HWE：Hard-Weinberg平衡，P<0.05表示對照組人群的基因型頻率分布不符合HWE平衡

表2 關于IL-10-819C/T位點的納入文獻的基本特征

表3 關于IL-10-1082G/A位點的納入文獻的基本特征

2.2Meta分析結果

2.2.1IL-10-592A/C基因多態性和RSA相關性的Meta分析 共有12篇文獻研究了IL-10-592A/C基因多態性和RSA發生風險的關系。異質性檢驗顯示均有明顯性，采用隨機效應模型進行分析。在總人群中，結果顯示IL-10-592A/C多態性與RSA無明顯相關性(Avs.C:OR=1.02，95%CI=0.81～1.28，P=0.87；CC+CAvs.AA:OR=0.94，95%CI=0.67～1.32，P=0.74)。對不同地區人群亞組分析未見其相關性，見表4。

2.2.2IL-10-819C/T基因多態性和RSA相關性的Meta分析 共有8篇文獻研究了IL-10-819C/T基因多態性和RSA發生風險的關系。異質性檢驗顯示等位基因(Cvs.T)和顯性基因模型(TT+TCvs.CC)存在較大異質性，采用隨機效應模型進行分析；隱性基因模型(TTvs.TC+CC)和等位基因(TTvs.CC)無明顯異質性，采用固定效應模型進行分析。在總體人群中，各項研究間等位基因Cvs.T 和TT+TCvs.CC基因差異無統計學意義(Tvs.C:OR=1.30，95%CI=0.99～1.70，P=0.06；TT+TCvs.CC:OR=1.40，95%CI=0.93～2.11，P=0.11)，但在隱性基因模型和純合子模型下發現IL-10-819C/T基因多態性與RSA具有明顯相關性(TTvs.TC+CC:OR=1.40，95%CI=1.10～1.78，P<0.01；TTvs.CC:OR=1.57，95%CI=1.21～2.04，P<0.05)。對不同地區人群亞組分析顯示在亞洲人群中，在純合子模型(TTvs.CC)下發現IL-10-819C/T基因多態性與RSA發生具有關(OR=1.61，95%CI=1.01～2.57，P=0.05)，其他結果均無統計學意義，見表5。

2.2.3IL-10-1082G/A基因多態性和RSA相關性的Meta分析 共有14篇文獻研究了IL-10-1082G/A基因多態性和RSA發生風險的關系。異質性檢驗顯示除隱性基因模型(GGvs.GA+AA)和亞洲亞組具有較大異質性，其余研究均無明顯異質性，分別采用隨機效應模型和固定效應模型進行分析。在總體人群中，等位基因G與RSA發生具有相關性，攜帶等位基因G較攜帶等位基因A的發病風險可能升高(OR=1.13，95%CI=1.03～1.24，P=0.01)，同時在純合子模型下也顯示出和RSA的相關性(OR=1.39，95%CI=1.14～1.71，P<0.05)。各項研究間GG+GAvs.CC基因和GGvs.GA+AA基因差異無統計學意義(P>0.05)。對不同地區人群亞組分析發現在歐洲人群中IL-10-1082G/A基因多態性和RSA發生具有相關性(Gvs.A:OR=1.31，95%CI=1.02～1.68，P=0.03；GGvs.AA:OR=1.77，95%CI=1.08～2.88，P=0.02)，見表6、圖2。

表4 IL-10-592A/C基因多態性與RSA相關性

表5 IL-10-819C/T基因多態性與RSA相關性

表6 IL-10-1082G/A基因多態性與RSA相關性

圖2 IL-10-1082G/A等位基因模型亞組分析結果

2.3敏感性和發表偏倚分析 HWE是保證SNP位點有效性的基本遺傳定律，去掉不符合HWE的文獻后分析結果基本沒有發生變化，表明此分析結果相對穩定可靠。由于納入文獻過少不適合繪制漏斗圖，因此僅對總體人群不同基因模型進行漏斗圖分析，IL-10-819C/T在隱性模型下漏斗圖不對稱，可能是由于納入了低質量小樣本研究，刪除3篇樣本量小于100的文獻，漏斗圖顯示對稱，其余漏斗圖散點分布均勻，基本對稱，發表偏倚較小。

3 討 論

隨著中國“二胎”政策的實施，許多大齡女性(≥35歲)選擇再生育，高齡孕婦也隨之增多，而隨著年齡增加，女性妊娠不良結局和并發癥也會增加。高齡產婦發生流產的危險性較高,這是因為染色體異常胎兒的發生率增加,從而使流產發生率增加[25-26]。RSA是自然流產中常見的，也是目前人們研究較多的，本文采用Meta分析方法，分別采用等位基因模型，顯性基因模型，隱性基因模型和純合子模型對IL-10基因多態性和RSA相關性進行評價。

本研究結果顯示，IL-10-592A/C基因多態性和RSA無直接相關性，亞組分析也未發現其相關性，但國內相關研究均顯示IL-10-592A/C基因多態性可能與RSA發病有關，詹福壽等[24]研究發現IL-10-592A/C多態性位點可能是寧夏地區漢族女性復發性自然流產的易感SNP，但這可能和不同民族遺傳差異有關,并且納入的相關文獻之間均存在較大異質性。對IL-10-819C/T位點的研究發現，基因型為CC者女性RSA發病風險高于基因型TT者。由于納入文獻亞洲地區占多數，筆者按地區進行亞組分析，亞洲人群分析結果和總體人群結果一致，而歐洲人群未發現這種相關性。IL-10-1082G/A與RSA相關性分析表明，等位基因G和GG基因型均與RSA發生相關，DAHER等[18]研究發現GG基因型在RSA病例組分布頻率明顯高于健康對照組；PENG等[27]對IL-10-1082G/A多態性位點與RSA相關性進行Meta分析發現，IL-1082G等位基因和GG基因型會增加RSA的發生風險，與本次研究結果一致。IL-10-819C/T和IL-10-1082G/A兩個多態性位點與RSA之間的關系目前國內未見相關報道，還需進一步設計嚴謹、大樣本量的試驗對IL-10基因多位點檢測進行確認。

盡管漏斗圖顯示發表偏倚較小，但本次Meta分析也存在一些局限性。(1)IL-10-592A/C多態性分析中納入研究之間存在較大異質性，經過亞組分析異質性仍然存在，異質性可能和地區、樣本量、檢測方法等因素有關，較大的異質性在一定程度上影響IL-10-592A/C位點結果可靠性；(2)在文獻搜索過程中不免遺漏個別相關文獻，而且有的文獻無法獲得各個基因型相關數據被排除[5,22,23];(3)本次納入文獻大多數來源于亞洲地區，具有一定地區局限性。

綜上所述，本研究結果顯示，IL-10-819C/T、IL-10-1082G/A基因多態性和RSA的發病相關，IL-10-592A/C基因多態性和RSA無明顯相關性，對今后研究基因與RSA發生的易感性提供理論基礎，但本研究存在一定局限性，還需更多大樣本同質性的研究證明。