4種禽流感病毒M2e多肽的串聯表達和小鼠口服免疫效果

羅斌，錢凱，徐萬祥，唐海平，季朝能，謝毅，顧少華

1. 復旦大學生命科學學院遺傳學研究所，上海 200438； 2. 上海市計劃生育科學研究所國家人口和計劃生育委員會重點實驗室，上海 200032； 3. 上海市工業菌株工程技術研究中心，上海 200438

根據甲型流感病毒(influenza A virus，IAV)兩個主要膜蛋白血凝素(hemagglutinin，HA)和神經氨酸酶(neuraminidase，NA)的不同，分為18個HA亞型和11個NA亞型[1-2]。甲型流感病毒通過HA與宿主細胞表面的唾液酸受體結合進入候鳥、家禽、豬和人等宿主。由于不同種屬唾液酸受體的結構不同，甲型流感病毒存在種屬特異性，難以跨種屬傳播，有禽流感病毒、豬流感病毒和人流感病毒之分[3-4]。甲型流感病毒的最初宿主為禽類[5]，其HA發生突變后就可能跨種屬傳播，因此禽流感病毒為甲型流感的元兇。

目前研制禽流感疫苗的策略是：每年根據流行病學監測進行預測，大約提前6個月決定疫苗所用的禽流感病毒株；針對所用病毒株的HA和NA編碼基因制備新的禽流感疫苗，以匹配可能流行的禽流感病毒[6]。由于HA和NA編碼基因極易發生突變，或因不同亞型病毒株之間基因重配，目前尚難以對將要流行或暴發的禽流感病毒株進行準確預測，所以研制對不同禽流感病毒具有廣譜作用的疫苗極其重要。

基質蛋白2(matrix protein 2，M2)是禽流感病毒的第3個膜蛋白[7]，其N端1～24位殘基為M2胞外區(M2 ectodomain，M2e)。M2e在不同亞型禽流感病毒之間高度保守[8]，是研制廣譜性禽流感疫苗的靶標之一，但其免疫原性較弱[9]。霍亂弧菌腸毒素亞單位A1(Vibriocholeraeenterotoxin subunit A1，CTA1)和來自金黃色葡萄球菌蛋白A的兩個Ig結合域(two Ig-binding domains，DD)串聯組成的CTA1-DD能起黏膜免疫佐劑作用[10-11]。……