腰椎術(shù)后反應(yīng)性疼痛與引流液中炎癥因子的相關(guān)性分析

王華磊，湯立新，程省，葉向陽(yáng)

（南陽(yáng)市中心醫(yī)院骨科，河南 南陽(yáng) 473000）

腰椎間盤突出癥是臨床上較為常見(jiàn)的腰椎疾病，對(duì)于常規(guī)治療無(wú)效或病情嚴(yán)重者則需要進(jìn)行外科手術(shù)治療[1]。陳煥亮等[2]研究發(fā)現(xiàn)，部分對(duì)炎癥反應(yīng)敏感者，因術(shù)后纖維環(huán)破壞，髓核內(nèi)炎癥因子水平升高，神經(jīng)根受到直接刺激引起腰部、下肢疼痛，嚴(yán)重者造成神經(jīng)功能障礙。本研究進(jìn)行腰椎手術(shù)后反應(yīng)性疼痛與引流液中炎癥因子的相關(guān)性分析，為術(shù)后反應(yīng)性疼痛的干預(yù)治療提供理論依據(jù)，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究對(duì)象為2016-01-2017-01于我院治療的25例腰椎間盤突出患者，其中采用椎間盤切除6例、椎間植骨融合內(nèi)固定術(shù)5例、椎間盤切除6例、后路椎板減壓8例；術(shù)后出現(xiàn)下肢或腰臀部疼痛。男11例，女 14例；年齡 41-58歲，平均（53.22±3.42）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者經(jīng)腰椎X線、MRI檢查確診為腰椎間盤突出癥，并采用手術(shù)治療者；無(wú)深、淺部傷口感染；術(shù)后明顯下肢或腰臀部疼痛；均為單節(jié)段患病；手術(shù)成功均繼續(xù)住院治療；排除標(biāo)準(zhǔn)：由手術(shù)切口造成的腰部疼痛；合并糖尿病、嚴(yán)重外傷、腰椎結(jié)核、惡性腫瘤、感染等影響炎癥因子水平的疾病。

1.2 方法

所有患者的椎間盤切除、椎間植骨融合內(nèi)固定術(shù)、椎間盤切除、后路椎板減壓手術(shù)均由我院3名資深骨科醫(yī)師完成。確保所有患者術(shù)中無(wú)腦脊液漏或硬脊膜破裂。手術(shù)切口留置負(fù)壓引流管，保持3 d，傷口流出血性引流液。在拔出引流管時(shí)記錄傷口總引流量。術(shù)中止血徹底，防止影響炎癥因子濃度，術(shù)后不使用激素，傷口疼痛劇烈可適當(dāng)給予止痛藥，術(shù)后3 d內(nèi)不使用非甾體抗炎藥物。引流1 h后開(kāi)始采用引流袋收集引流液，共計(jì)10 ml,第2、3天同時(shí)間均收集10 ml引流液。引流液采用差速法離心（首次1500 r/min，第二次 3000 r/min，半徑 11.5 cm，均離心15 min），與EP管內(nèi)收集1 ml上清液，與﹣80℃恒溫冰箱保存待檢。

TNF-α、IL1β、IL 6 均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)，ELISA檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)R&D公司，操作步驟按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。取出EP管，常溫下化凍。試劑盒包括樣本孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔以及空白孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔按照持續(xù)滴加濃度不同的標(biāo)準(zhǔn)品50 μL；樣本孔先加待測(cè)樣本10 μL，再加樣本稀釋液40 μL，空白孔不加 ；除空白孔外，首先于標(biāo)準(zhǔn)品孔及樣本孔中滴加經(jīng)辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記過(guò)的100 μL檢測(cè)抗體，封板膜密封反應(yīng)孔，恒溫箱溫育（37℃，60 min）；棄去液體后用吸水紙吸干，每孔洗滌液加滿，靜置1 min后甩去洗滌液，用吸水紙吸干，進(jìn)行5次重復(fù)，洗滌液為洗滌緩沖液與蒸餾水按1∶19 比例配制；每孔加入 A、B 底物各 50 μL，37℃環(huán)境下避光孵育15 min。每孔添加50μL終止液后15 min內(nèi)于450 nm波長(zhǎng)處進(jìn)行各孔的光密度值的測(cè)定，根據(jù)試劑盒說(shuō)明書得出濃度。抽取各時(shí)間段空腹軸靜脈血，CRP參照上文ELISA檢測(cè)方法，紅細(xì)胞沉降率（ESR）通過(guò)ESR檢測(cè)儀（德國(guó)，R&S）測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 17.00軟件，計(jì)數(shù)資料以百分比“%”形式表示，計(jì)量資料以均數(shù)“”形式表示，兩兩比較采用t檢驗(yàn)，三組比較采用F檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析法，P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 VAS評(píng)分、ESR及血清CRP水平比較

術(shù)后2、3 d VAS評(píng)分顯著高于術(shù)后1 d（P＜0.05），術(shù)后 2、3 d 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；術(shù)后2、3 d ESR評(píng)分顯著高于術(shù)后1 d，術(shù)后2 d顯著高于術(shù)后 3 d（P＜0.05）；術(shù)后 2、3 d CRP 水平顯著高于術(shù)后 1 d，術(shù)后 3 d 顯著高于術(shù)后 2 d（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)VAS評(píng)分、ESR及血清CRP水平比較（±s）

表1 術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)VAS評(píng)分、ESR及血清CRP水平比較（±s）

注：與 1 d 比較 *P＜0.05，與 2 d 比較 #P＜0.05。

時(shí)間 n VAS 評(píng)分 ESR（mm/h） CRP（mmol/L）1 d 25 3.13±0.65 31.43±5.54 17.43±3.45 2 d 25 4.34±0.69* 43.67±6.87* 24.56±4.23*3 d 25 4.51±0.70* 38.56±6.14*#33.55±5.21*#F// 29.86 24.73 84.80 P 0.000 0.000 0.000

2.2 術(shù)后不同時(shí)間引流液中炎癥因子水平比較

術(shù)后 2 d、3 d IL1β、IL 6、TNF-α 水平均顯著高于術(shù)后1 d，術(shù)后3 d顯著高于術(shù)后2 d，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 術(shù)后不同時(shí)間引流液中炎癥因子水平比較（±s）

表2 術(shù)后不同時(shí)間引流液中炎癥因子水平比較（±s）

注：與 1 d比較 *P＜0.05，與 2 d 比較 #P＜0.05。

時(shí)間 n IL1β（ρg/L） IL 6（ρg/L） TNF-α（ρg/L）1 d 25 10.21±1.54 12.34±1.67 13.11±1.45 2 d 25 12.86±1.68* 14.89±1.82* 15.87±1.56*3 d 25 14.87±1.77*# 18.15±1.97*# 19.03±1.67*#F / 49.21 63.72 89.85 P / 0.000 0.000 0.000

2.3 IL1β、IL 6、TNF-α 水平 VAS 評(píng)分、CRP、ESR相關(guān)性分析

引流液 IL1β、IL 6、TNF-α 水平與術(shù)后 VAS 評(píng)分呈正相關(guān)（P＜0.05），與CRP、ESR無(wú)顯著相關(guān)性（P＞0.05），見(jiàn)表3。

表3 IL1β、IL 6、TNF-α 水平 VAS評(píng)分、CRP、ESR相關(guān)性分析

3 討論

近年有研究認(rèn)為，腰椎間盤突出癥者椎間盤突出程度以及神經(jīng)根疼痛情況與臨床癥狀并非完全一致，在行外科手術(shù)過(guò)程中還有神經(jīng)根水腫出現(xiàn)，這種現(xiàn)象與神經(jīng)根炎性反應(yīng)具有諸多類似之處[3]。因此，眾多學(xué)者均逐漸關(guān)注炎性因子水平與腰椎間盤突出癥相關(guān)癥狀的聯(lián)系。對(duì)于常見(jiàn)炎性因子TNF-α，TNF-α濃度較高時(shí)其對(duì)單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞具有一定的趨化作用，新生血管也促進(jìn)了了炎癥因子的刺激作用；患者椎間盤微環(huán)境破壞，加速炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，刺激炎癥因子分泌量上升[4]。TNF-α還能直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，通過(guò)其誘導(dǎo)作用促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生其他炎癥介質(zhì)，與IL-1β、IL-6共同作用促進(jìn)局部的炎癥反應(yīng)而引發(fā)疼痛[5]。TNF-α、IL-1β、IL-6術(shù)后顯著上升，IL-1β和IL-6能夠?qū)ν怀鲎甸g盤組織產(chǎn)生刺激作用促進(jìn)前列腺素E2（PGE2）的釋放，PGE2作用于神經(jīng)根發(fā)揮致痛作用，以對(duì)脊神經(jīng)的痛性刺激為主[6]。本探究結(jié)果顯示，術(shù)后2 d、3 d患者腰部、腿部反應(yīng)性疼痛逐漸增加，劉世偉等[7]認(rèn)為手術(shù)損傷、椎間盤病變導(dǎo)致椎間盤封閉的纖維環(huán)破裂，內(nèi)部釋放大量炎癥因子而導(dǎo)致疼痛癥狀，這與本結(jié)果基本保持一致。術(shù)后引流液炎癥因子水平檢測(cè)則能證明的炎癥因子是因破壞了椎間盤纖維環(huán)完整封閉作用而引發(fā)的炎癥因子釋出，排除了手術(shù)切口的感染[8]。

相關(guān)性分析結(jié)果顯示引流液IL1β、IL 6、TNF-α水平與術(shù)后VAS評(píng)分呈正相關(guān)（P＜0.05），證實(shí)了引流液中炎癥因子水平升高與術(shù)后肢或腰臀部疼痛的密切聯(lián)系。本探究對(duì)較敏感的全身炎癥活動(dòng)性指標(biāo)ESR與CRP進(jìn)行了檢測(cè)，其與引流液IL1β、IL 6、TNF-α水平無(wú)明顯相關(guān)性，進(jìn)一步證實(shí)了腰椎椎間盤術(shù)后引流液IL1β、IL 6、TNF-α等炎癥因子升高不屬于手術(shù)所致全身炎性反應(yīng)的一部分，而是椎間盤局部炎癥因子濃度上升引起。而本探究未檢測(cè)外周血IL1β、IL 6、TNF-α水平，未判斷局部炎癥反應(yīng)與全身炎癥反應(yīng)的強(qiáng)弱，待條件成熟繼續(xù)深入研究。