網織血小板及其相關參數在兒童免疫性血小板減少癥及膿毒癥中的應用

宋 輝，孔飛飛， 劉 旋， 石翠明， 常 敏， 完顏新蕊

（1.濟寧醫學院附屬醫院檢驗科，山東 濟寧 272000；2.濟寧醫學院生物科學學院，山東 濟寧 272029）

1969年，Ingram和Coopersmith在大量失血患者的外周血中第1次發現一種新生血小板（platelet，PLT）。這種新生PLT與成熟的PLT相比，體積更大，胞質顆粒更加粗糙，可被美藍染液染色，說明其胞質中存在RNA殘留成分，并且具有更強的活性，因此將其稱為網織血小板（reticulated platelet，RP）或未成熟血小板（immature platelet fraction，IPF）。RP是骨髓巨核細胞釋放到外周血中的幼稚PLT，反映人體PLT的更新速度及骨髓中PLT的生成能力[1]。PLT參數——平均血小板體積（mean platelet volume，MPV）及血小板分布寬度（platelet distribution width，PDW）反映了PLT體積的大小及PLT容積的變異程度。RP及PLT相關參數在兒童免疫性血小板減少癥（immunological thrombocytopenia，ITP）和兒童膿毒癥導致的PLT降低患者的鑒別診斷、療效觀察、預后等方面具有重要的臨床意義。本研究擬探討網織血小板比率（reticulated platelet ratio，RP%）、RP絕對值、MPV和PDW在兒童ITP及兒童膿毒癥導致的PLT降低疾病鑒別診斷中的價值。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2015年6月—2016年6月濟寧醫學院附屬醫院門診及住院，初次確診為兒童ITP患者（ITP組）及兒童膿毒癥（膿毒癥組）所致的PLT降低患兒各30例。ITP組中男18例，女12例，年齡4個月~12歲；膿毒癥組中男17例，女13例，年齡6個月~14歲。以同期濟寧醫學院附屬醫院初次確診的再生障礙性貧血（aplastic anemia，AA）患兒（AA組）20例作為疾病對照組，其中男8例、女12例，年齡4個月~13歲。以同期濟寧醫學院附屬醫院體檢健康兒童30名作為正常對照組，其中男15名、女15名，年齡3個月~14歲，PLT總數正常，臨床查體各項指標均正常。

1.2 方法

采集所有對象的血液標本。采用XN-9000全自動血液分析儀（日本希森美康公司）及配套試劑檢測RP%、RP絕對值、MPV和PDW。用配套校準品校準儀器，每日測試前儀器都進行本底檢測和室內質控，質控通過后再進行標本的檢測。

1.3 統計學方法

采用SPSS 17.0軟件進行統計分析。呈正態分布的計量資料采用±s表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用q檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

ITP組和膿毒癥組RP%、MPV、PDW均明顯高于正常對照組及AA組（P＜0.05），且ITP組高于膿毒癥組（P＜0.05）。ITP組和膿毒癥組RP絕對值低于正常對照組（P＜0.05）。AA組與正常對照組之間RP%、MPV、PDW差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

3 討論

表1 ITP、膿毒癥組、AA組及正常對照組RP%、RP絕對值、MPV和PDW的比較 （±s）

表1 ITP、膿毒癥組、AA組及正常對照組RP%、RP絕對值、MPV和PDW的比較 （±s）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05；與AA組比較，#P＜0.05；與ITP組比較，△P＜0.05

組別 例數 RP%（%） RP絕對值（×109/L） MPV（fL） PDW（fL）正常對照組 30 2.90±1.07 5.80±3.54 10.40±1.90 13.00±2.77 AA組 20 2.70±1.02 0.90±0.39 10.00±1.94 12.60±2.63 ITP組 30 16.80±4.28*# 3.60±2.12*# 20.00±4.63*# 26.50±3.68*#膿毒癥組 30 8.30±2.96*#△ 4.50±2.51*# 14.30±2.66*#△ 18.60±3.64*#△

RP是骨髓釋放到外周血中的新生PLT，是巨核細胞生成的幼稚PLT，存在于RP胞質中的RNA成分與巨核細胞活性有著密切關系。李文慶等[2]的研究結果顯示，IPF%（IPF與PLT總數的比值）與MPV、PDW、大血小板比率均呈正相關，且與PDW高度相關。他們認為IPF%可用于判斷骨髓PLT的增生情況，特別是部分標本未能報告出MPV、PDW時，IPF%可作為MPV、PDW必要的補充。巨核細胞活性增強，RP胞質中RNA水平增高，即RP%增高。所以，RP%可判斷巨核細胞活性，預測RP生成能力。MPV代表單個PLT平均體積，常用來評價骨髓功能。PDW是反映PLT體積大小變化的重要參數。PLT相關參數與體外PLT功能具有很好的相關性，可間接反映PLT功能狀況。通過對RP及其參數的檢測，可鑒別患者PLT減少原因是骨髓生成障礙還是外周血PLT破壞增加導致。因此，RP及其參數是分析骨髓PLT生成及PLT更新速度的重要指標。隨著檢測方法的不斷改進，RP在臨床上的應用更加廣泛，在兒童血小板減少癥病因診斷及療效觀察中具有更重要意義。

兒童ITP是由于免疫性因素，患者PLT破壞增加導致的PLT減少性疾病。ITP患兒由于外周血PLT破壞增加，因此骨髓中的巨核細胞生成PLT的速率加快，釋放到外周血中的RP增加。ITP過去的診斷標準僅以PLT計數＜100×109/L作為唯一的標準[3]。兒童膿毒癥往往導致多器官功能障礙，骨髓是常見的受累器官，常表現為PLT降低。PLT作為急性生理與慢性健康評分-Ⅱ和簡明急性生理學評分Ⅱ的評分項目，在膿毒癥患者中是一個獨立的危險因子，PLT進行性下降往往提示疾病預后不良[4-6]。PLT降低的主要原因是由于嚴重的感染導致患者的凝血功能障礙，大量微血栓的形成引起PLT過度消耗[7]，由于PLT的消耗過度，導致PLT的生成速率加快，釋放到外周血中的新生PLT明顯增加，與之相關的RP、RP%、MPV及MPV等PLT參數也隨之升高。陳建霞等[8]的研究結果顯示，RP及RP%可以有效地明確PLT的降低是外周血中的PLT遭到破壞所致。AA是由骨髓造血功能障礙導致的，其發生雖然與免疫因素有關，但免疫因素僅影響早期階段及造血干/祖細胞，對PLT的質量沒有影響。治療后AA患兒的RP檢測結果有可能會發生變化，但還有待于進一步研究。PLT相關參數具有不同的特點，其對指導PLT減少癥病因的判斷具有一定的意義[9]。

綜上所述，RP在PLT減少性疾病的診斷和治療過程中有較高的臨床應用價值，特別是在兒童ITP及兒童膿毒癥所致的PLT降低患兒中，RP及PLT相關參數的檢測可以部分替代骨髓穿刺等檢查，用于反映骨髓中巨核細胞的增生情況，減少創傷性檢查給患者帶來的痛苦，對分析患者PLT降低的原因具有重要的意義，同時在患者的療效觀察上也有非常重要的應用價值。因此，RP%、RP、MPV、PDW可作為兒童ITP及兒童膿毒癥患兒的常規檢查項目。