無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒抗體ELISA法陽(yáng)性與TPPA確證比對(duì)分析

吳漢鐘，曾媛媛

(汕尾市中心血站，廣東 汕尾 516600)

導(dǎo)致梅毒的病原體梅毒螺旋體(TP)，具有傳染性強(qiáng)、病程長(zhǎng)等特點(diǎn)，最初侵蝕人體生殖器官，隨著病情的發(fā)展會(huì)蔓延至人體各個(gè)臟器器官，對(duì)人體造成嚴(yán)重的傷害[1]。相關(guān)報(bào)道指出我國(guó)梅毒發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)，無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒感染率也呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)[2]。因此加強(qiáng)無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒篩查，提升檢測(cè)準(zhǔn)確性，指導(dǎo)臨床盡早對(duì)患者展開救治，對(duì)于保證患者的身心健康均具有重要意義。本研究基于數(shù)據(jù)分析，對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒抗體ELISA法陽(yáng)性與TPPA確證結(jié)果進(jìn)行比對(duì)分析，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2014年1月至2016年12月在汕尾市中心血站獻(xiàn)血的22 330例無(wú)償獻(xiàn)血者為研究對(duì)象，其中：男14 537例，女7793例；獻(xiàn)血者年齡18～59歲，平均(34.62±4.27)歲。

1.2 儀器與試劑 檢測(cè)試劑：ELISA雙抗原夾心法，以英科新創(chuàng)(廈門)科技有限公司提供的試劑(XC-TP)為 1號(hào)試劑，以北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司提供的試劑(WT-TP)為2號(hào)試劑。TPPA確證試劑由上海酶聯(lián)生物研究所提供。檢測(cè)試劑盒均由北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司提供。所有檢測(cè)試驗(yàn)均嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑盒操作說(shuō)明進(jìn)行，所有試劑均有中國(guó)食品藥品檢定研究院提供的批檢合格報(bào)告，并在有效期內(nèi)。檢測(cè)設(shè)備：使用愛(ài)康公司生產(chǎn)的URANUS AE全自動(dòng)酶免儀進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 ELISA檢測(cè) 基于《獻(xiàn)血者健康檢查要求》[3]，使用1號(hào)、2號(hào)試劑盒對(duì)所有無(wú)償獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本進(jìn)行初篩，若檢測(cè)為單試劑陽(yáng)性，則予以雙試劑雙孔復(fù)核篩查。

1.3.2 TPPA確證檢測(cè) 對(duì)于ELISA檢測(cè)陽(yáng)性者予以TPPA確證檢測(cè)，檢測(cè)以試劑盒操作說(shuō)明為依據(jù)進(jìn)行。檢測(cè)在23～29 ℃的室溫條件下進(jìn)行，將待檢測(cè)血漿放于U型培養(yǎng)板上進(jìn)行稀釋，稀釋完成后將未致敏和致敏粒子分別加于稀釋液中，充分搖晃、震蕩30 s，加蓋、放置2 h，觀察檢測(cè)結(jié)果。為了避免操作誤差，所有檢測(cè)均重復(fù)操作2次，并由兩名或以上檢驗(yàn)員對(duì)結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行判讀。

1.4 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)分析無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒初篩陽(yáng)性、梅毒螺旋體(TP)陽(yáng)性年變化趨勢(shì)、性別、年齡分布特點(diǎn)，對(duì)比ELISA法陽(yáng)性與TPPA確證結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)資料均使用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件予以處理，數(shù)據(jù)資料采用百分比(%)形式表示，并以F檢驗(yàn)觀察樣本總體差異性，用χ2檢驗(yàn)對(duì)比差異， 若P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 篩查結(jié)果分析 本次研究對(duì)2014—2016年22 330例獻(xiàn)血者進(jìn)行梅毒篩查，初篩共有122例為陽(yáng)性，TP確認(rèn)陽(yáng)性77例。經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)不同年份初篩是陽(yáng)性、TP陽(yáng)性呈逐年遞減趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表1。

2.2 不同性別、年齡梅毒陽(yáng)性分布特點(diǎn) 經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)男性梅毒陽(yáng)性率顯著性高于女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；另外不同年齡段梅毒陽(yáng)性率比較差異顯著，陽(yáng)性率隨著年齡的增長(zhǎng)而升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見(jiàn)表2。

表1 2014—2016年無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒篩查結(jié)果

表2 不同性別、年齡梅毒陽(yáng)性分布特點(diǎn)

2.3 ELISA法與TPPA確證符合率比較 對(duì)ELISA陽(yáng)性與TPPA確證結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，1號(hào)試劑、2號(hào)試劑陽(yáng)性篩查與TPPA確證符合率分別為79.17%、68.14%，1號(hào)、2號(hào)雙試劑陽(yáng)性篩查與TPPA確證符合率為87.36%，1號(hào)試劑篩查陽(yáng)性，2號(hào)試劑篩查陰性的9例患者經(jīng)TPPA確證全部為陰性，1號(hào)試劑篩查陰性，2號(hào)試劑篩查陽(yáng)性的25例患者經(jīng)TPPA確證1例為陽(yáng)性。詳見(jiàn)表3。

表3 ELISA法與TPPA確證符合率比較

3 討 論

梅毒是國(guó)內(nèi)外關(guān)注的一種性傳播疾病，其發(fā)病率不斷上升，嚴(yán)重威脅世界人民的身心健康，患者的生活質(zhì)量很差[4]。我國(guó)相關(guān)數(shù)據(jù)資料顯示自1999—2009年我國(guó)梅毒感染者增加了24萬(wàn)例以上，每年增長(zhǎng)率約為14%[5]。近年來(lái)，我國(guó)采取了一系列干預(yù)措施，梅毒發(fā)病率得到控制，無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒檢出率呈現(xiàn)穩(wěn)定或下降趨勢(shì)，提示梅毒疫情得到控制。但是由于梅毒篩查準(zhǔn)確性不理想，臨床中梅毒預(yù)防和救治問(wèn)題仍然嚴(yán)重[6]。ELISA法是應(yīng)用最多的篩查方法，但是其檢測(cè)篩查準(zhǔn)確性受到質(zhì)疑[7]。

本研究以2014—2016年3年間的無(wú)償獻(xiàn)血者為對(duì)象進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)資料顯示，無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒陽(yáng)性率逐年下降，其中男性陽(yáng)性率高于女性，年齡越大陽(yáng)性檢出率越高。在此基礎(chǔ)上對(duì)比分析ELISA法初篩陽(yáng)性與TPPA確證陽(yáng)性，其中ELISA雙試劑檢測(cè)符合率最高。本研究對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者使用1號(hào)、2號(hào)兩種檢測(cè)試劑進(jìn)行檢測(cè)后，均發(fā)現(xiàn)不同程度的假陽(yáng)性現(xiàn)象。因此需要對(duì)初篩結(jié)果予以進(jìn)一步確證檢測(cè)。TPPA檢測(cè)法被視為梅毒檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，檢測(cè)特異性和敏感性都高，適用于各時(shí)期梅毒的檢測(cè)，假陽(yáng)性發(fā)生率極低[8]。本研究對(duì)ELISA法初篩陽(yáng)性與TPPA確證陽(yáng)性進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)，1號(hào)試劑、2號(hào)試劑陽(yáng)性篩查與TPPA確證符合率分別為79.17%、68.14%，1號(hào)、2號(hào)雙試劑陽(yáng)性篩查與TPPA確證符合率為87.36%，這一結(jié)果提示ELISA雙試劑檢測(cè)能夠一定程度上提升檢測(cè)準(zhǔn)確性。

綜上所述，無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒陽(yáng)性率逐年下降，性別、年齡分布特點(diǎn)不同，在篩查時(shí)應(yīng)合理選擇ELISA檢測(cè)試劑(必要時(shí)可用TPPA試劑進(jìn)行評(píng)估)，配合應(yīng)用雙試劑檢測(cè)能夠提升檢測(cè)準(zhǔn)確性。盡管如此ELISA檢測(cè)還是存在假陽(yáng)性風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)及時(shí)對(duì)患者予以TPPA確證檢測(cè)。