喉癌組織Survivin、Aurora-b表達及其臨床意義

劉春玲，張少燕，梁久平，李三立，曲亞明，利顯民

(深圳市寶安區人民醫院，廣東深圳518100)

喉鱗狀細胞癌是最常見的喉癌病理類型，病死率高、患者預后差[1，2]。研究表明，喉癌的發生、發展是多種內源性因素(如促癌基因激活、抑癌基因失活和凋亡相關基因異常表達等)和外源性因素(吸煙、飲酒、病毒感染和空氣污染等)共同作用的復雜過程[3]。生存素(Survivin)是迄今發現的作用最強的凋亡因子之一，通過Caspase路徑抑制細胞凋亡過程，調節染色體分離和胞質分離，增強細胞的增殖潛能[4]。Aurora-b是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，參與調節中心體和微管功能，促進細胞分裂的順利進行。Survivin和Aurora-b異常表達可促進胃癌、結腸癌等多種腫瘤的發生、發展[5，6]，但其在喉癌中的作用并不明確。本研究觀察了喉癌組織Survivin、Aurora-b mRNA表達，現分析結果并探討其在喉癌發生、發展中的作用。

1 臨床資料

1.2 喉組織Survivin和Aurora-b mRNA表達 取兩組手術標本，采用實時熒光定量PCR法檢測Survivin和Aurora-b mRNA表達，采用2-ΔΔCt法計算Survivin和Aurora-b mRNA相對表達量。實驗重復3次，結果取平均值。以Survivin和Aurora-b mRNA表達的平均值為界限，大于平均值為高表達，小于等于平均值為低表達。結果顯示，喉癌組、正常組Survivin mRNA相對表達量分別為3.80±1.27、1.32±0.63，Aurora-b mRNA相對表達量分別為4.88±1.60、1.13±0.61。喉癌組Survivin和Aurora-b mRNA相對表達量均高于正常組(P均<0.05)。喉癌組Survivin高表達者44例、低表達者45例，Aurora-b高表達者43例、低表達者46例。

1.3 喉癌組織Survivin和Aurora-b mRNA相對表達量與患者臨床病理參數的關系 喉癌組織Survivin和Aurora-b mRNA相對表達量與患者年齡、性別、腫瘤部位和組織分化程度均無關(P均>0.05)，與淋巴轉移和臨床分期均有關(P均<0.05)。見表1。

表1 喉癌組織Survivin和Aurora-b mRNA相對表達量與患者臨床病理參數的關系

1.4 喉癌組織Survivin和Aurora-b表達與患者預后的關系 分別繪制喉癌患者術后1～60個月Survivin高、低表達者及Aurora-b高、低表達者的生存曲線(見圖1、2)。Survivin高表達者及低表達者術后5年總生存率為分別65.91%(29/44)、84.44%(38/45)，二者比較P<0.05；術后生存時間分別為(50.30±2.48)、(54.60±2.04)個月，二者比較P<0.05。Aurora-b高表達者及低表達者術后5年總生存率分別為65.11%(28/43)、84.78%(39/46)，二者比較P<0.05；術后生存時間分別為(50.70±2.53)、(56.13±3.04)個月，二者比較P<0.05。

2 討論

Survivin、Aurora-b、著絲粒內蛋白(INCENP)和Borealin共同組成染色體乘客復合體(CPC)；CPC是調節細胞有絲分裂、細胞增殖的重要因子[7]。Aurora-b是CPC的蛋白核心激酶，Aurora-b可使組蛋白H3、Survivin和INCENP等蛋白發生磷酸化。在有絲分裂過程中，紡錘絲的定位、染色體的分離以及細胞質的正確分離等均依賴于Survivin和Aurora-b的精確調節，若Survivin和Aurora-b定位錯誤，可誘導腫瘤的發生、發展[8]。Survivin屬于細胞凋亡抑制蛋白(IAP)家族成員，一般情況下只表達于胚胎、正常成人的生殖器和胸腺組織中，但在許多腫瘤組織細胞中Survivin呈過度表達狀態[7]。研究證實，Survivin具有促癌基因的功能，可抑制細胞凋亡、增強細胞增殖活性、降低細胞死亡率，且與腫瘤化療耐藥性和侵襲性相關[8]；喉癌組織Survivin高表達與患者不良預后相關[9]；Survivin可用于預測喉癌放化療敏感性[10]。本研究結果顯示，Survivin在喉癌組織中表達水平顯著高于正常喉黏膜組織，提示Survivin高表達與喉癌的發生相關；喉癌患者有淋巴結轉移和Ⅲ～Ⅳ期患者癌組織Survivin表達水平高于未發生淋巴結轉移和Ⅰ～Ⅱ期患者，表明Survivin表達與喉癌細胞的侵襲性和惡性程度呈正相關。由此推測，Survivin可能通過阻礙細胞凋亡，進而增強腫瘤的侵襲性和惡性程度。此外，喉癌患者Survivin高表達者術后5年總生存率低于低表達者、生存時間短于低表達者，提示喉癌組織Survivin高表達者預后不良。

圖1 Survivin高、低表達者的生存曲線

圖2 Aurora-b高、低表達者的生存曲線

Aurora 激酶共有Aurora-a、Aurora-b和Aurora-c三個類型，其中Aurora-b基因定位于染色體17q13.1，有絲分裂早期Aurora-b蛋白位于染色體著絲粒區，而在分裂后期Aurora-b蛋白則移動至微管，校對動粒與紡錘絲微管的錯誤連接[11]。研究證實，Aurora-b在頭頸部鱗狀細胞癌、食道癌、卵巢癌等腫瘤組織中過量表達，且其過量表達與腫瘤惡性程度有關[12～14]。本研究結果顯示，喉癌組織Aurora-b mRNA表達顯著高于正常喉黏膜組織，說明Aurora-b可能參與并促進了喉癌的發生；喉癌患者有淋巴結轉移和臨床分期Ⅲ～Ⅳ期的患者癌組織Aurora-b表達明顯高于無淋巴結轉移和Ⅰ～Ⅱ期患者，Aurora-b高表達者術后5年總生存率低于低表達者、生存時間短于低表達者。提示Aurora-b可能參與并促進了喉癌的發生、發展。

綜上所述，Survivin和Aurora-b可促進喉癌的發生、發展；在此過程中二者有協同作用。Survivin和Aurora-b表達有助于喉癌的診斷及病情、預后的判斷。Survivin和Aurora-b有望作為喉癌治療的新靶點。

參考文獻：

[1] 席盼盼,張淑香. 凋亡相關基因及其與喉癌關系的研究進展[J].蚌埠醫學院學報,2016,41(1):137-140.

[2] de Miguel-Luken MJ,Chaves-Conde M,de Miguel-Luken V,et al. MAP17 (PDZKIP1) as a novel prognostic biomarker for laryngeal cancer[J]. Oncotarget,2015,6(14):12625-12636.

[3] Butler A,Rigby MH,Scott J,et al. A retrospective review in the management of T3 laryngeal squamous cell carcinoma: an expanding indication for transoral laser microsurgery[J]. J Otolaryngol Head Neck Surg,2016,45(1):34.

[4] Jaiswal PK,Goel A,Mittal RD. Survivin: a molecular biomarker in cancer[J]. Indian J Med Res,2015,141(4):389-397.

[5] Chiou SK,Hoa N,Hodges A,et al. Indomethacin promotes apoptosis in gastric cancer cells through concomitant degradation of Survivin and Aurora B kinase proteins[J]. Apoptosis,2014,19(9):1378-1388.

[6] Tuncel H,Shimamoto F,Kaneko GQH,et al. Nuclear Aurora B and cytoplasmic Survivin expression is involved in lymph node metastasis of colorectal cancer[J]. Oncol Lett,2012,3(5):1109-1114.

[7] Waligórska-Stachura J,Jankowska A,Wasko R,et al. Survivin--prognostic tumor biomarker in human neoplasms--review[J]. Ginekol Pol,2012,83(7):537-540.

[8] Soleimanpour E,Babaei E. Survivin as a potential target for cancer therapy[J]. Asian Pac J Cancer Prev,2015,16(15):6187-6191.

[9] Geng J,Lei YR,Pei SG. Correlation between Survivin expression and laryngeal carcinoma: a meta-analysis[J]. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci,2017,37(6):965-973.

[10] Tiefenb?ck-Hansson K,Haapaniemi A,Farnebo L,et al. WRAP53β,survivin and p16INK4a expression as potential predictors of radiotherapy/chemoradiotherapy response in T2N0-T3N0 glottic laryngeal cancer[J]. Oncol Rep,2017,38(4):2062-2068.

[11] Poon RY. Aurora B: hooking up with cyclin-dependent kinases[J]. Cell Cycle,2013,12(7):1019-1020.

[12] Hoellein A,Pickhard A,von KF,et al. Aurora kinase inhibition overcomes cetuximab resistance in squamous cell cancer of the head and neck[J]. Oncotarget,2011,2(8):599-609.

[13] González-Loyola A,Fernández-Miranda G,Trakala M,et al. Aurora B overexpression causes aneuploidy and p21Cip1 repression during tumor development[J]. Mol Cell Biol,2015,35(20):3566-3578.

[14] Tanaka H,Nakashiro K,Iwamoto K,et al. Targeting Aurora kinase A suppresses the growth of human oral squamous ceⅡ carcinoma cells in vitro and in vivo[J]. Oral Oncol,2013,49(6):551-559.