LC-MS法測定食用農產品中61種獸藥殘留及違法添加物

◎ 黃武平，宋 洋

（重慶市計量質量檢測研究院，重慶 401123）

食用農產品的飼養不可避免會使用各種獸藥，合理使用獸藥可以提高其質量，但不遵守休藥期/不合理用藥問題屢屢發生，造成各種食用農產品中的獸藥殘留及可能違法添加非食用物質，威脅人們健康。因此，農業部專門發布公告如235號、176號、1025號、560號、1077號等，專門規定了最高獸藥殘留限量、禁止使用的藥物品種目錄。目前，各類農產品的獸藥殘留及可能違法添加的非食用物質檢測標準很多，如GB/T 19857-2005、GB/T 20366-2006等分類檢測方法，分類檢測雖針對性強，但同時測定的種類有限，檢測效率低。本方法采用液相色譜質譜聯用（LC-MS）儀對61種獸藥殘留及可能違法添加的非食用物質進行測定，確定了各類物質的檢出限、重復性要求。

1 實驗部分

1.1 試劑

甲醇；乙腈；甲酸；1%甲酸乙腈-水溶液；0.1%甲酸乙腈溶液；0.1%甲酸水溶液；標準品；1 000 mg/L標準儲備液；1.0 mg/L標準中間溶液；混合標準使用液。（注：除另有說明外，本方法所用水均為一級水，各有機試劑均為色譜純）

1.2 儀器

配有電噴霧離子源LC-MS，電子分析天平，均質器，旋渦混合器，超聲波清洗儀，離心機，固相萃取裝置。

1.3 分析步驟

1.3.1 試樣制備

從所取全部樣品中取出有代表性樣品的可食部分約500 g，攪碎后用均質器勻漿，制好的試樣均分成兩份，裝入潔凈的盛樣容器內，密封，并注明標記。將試樣于-18 ℃冷凍保存。

1.3.2 試樣處理

準確稱取試樣5 g（精確至0.01 g），于50 mL離心管中，加入10 mL 1%甲酸乙腈-水溶液，渦旋混勻1 min，超聲提取20 min，于6 000 r/min離心5 min，取上清液4 mL，待凈化。同時進行空白實驗。將EMR-Lipid柱放入固相萃取裝置上，移入上述4 mL提取液，收集濾液約1 mL，用于液相色譜-質譜測定。

1.3.3 測定條件

色譜柱：C18，2.1 mm×50 mm，1.8 μm；流動相A：0.1%甲酸水溶液；流動相B：0.1%甲酸乙腈溶液（梯度洗脫）；流速：0.3 mL/min；柱溫：30℃；進樣量：5 μL。流動相梯度洗脫程序見表1。

表1 流動相梯度洗脫程序表

質譜條件：離子源，電噴霧ESI，正離子5 500 V/負離子-4 500 V。

離子源溫度：正離子600 ℃/負離子500 ℃；CUR，25；GS1，50；GS2，50；掃描方式，多反應監測MRM。

2 結果與討論

（1）定性測定。樣品中化合物色譜峰的保留時間與標準溶液的保留時間相比在允許偏差±2.5%之內；每種化合物的質譜定性離子必須出現，至少包括一個母離子和兩個子離子，而且同一檢測批次，對同一化合物，樣品中目標化合物的兩個子離子的相對豐度比與濃度相當的標準溶液相比，其允許偏差不超過規定的范圍（相對豐度＞50%，允許±20%偏差；50%≥相對豐度＞20%，允許±25%偏差；20%≥相對豐度＞10%，允許±30%偏差；相對豐度≤10%，允許±50%偏差），則可判斷樣品中存在目標物質。如果不能確證，應重新進樣，采用增加其他確證離子的方式或用其他靈敏度更高的分析儀器來確證。

（2）定量分析。本方法采用外標校準曲線法定量測定。

（3）平行試驗。按以上步驟對同一試樣進行平行測定。

（4）空白試驗。除不稱取試樣外，均按上述步驟進行。

（5）加標回收。稱取試樣后，加入一定體積混合標準溶液，渦旋混勻，靜置10 min，按上述操作步驟進行。所有物質的加標回收率在65%～100%。

（6）結果計算。按式（1）進行計算：

式（1）中：X為試樣中待測組分的含量，μg/kg；C為待測組分響應值在標準曲線上計算得到的濃度，μg/L；V為樣品定容體積，mL；m為樣品稱樣質量，g。

計算結果保留3位有效數字。

注：計算結果應扣除空白值。

（7）精密度。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對值差不得超過算術平均值的20%。檢出限見表2。

表2 61種獸藥殘留及非食用物質檢出限表

續表2

續表2

3 結語

本方法融合了食用農產品的多種獸藥殘留及違法添加非食用物質的液相色譜質譜聯用儀的檢測方法，可以同時進行61種獸藥殘留及可能違法添加的非食用物質的快速檢測，大大提高了檢測效率。經驗證，確定了61種物質的檢出限，可以作為食用農產品中獸藥殘留及可能違法添加的非食用物質的快速初篩方法。