王
(開封市中心醫院五福路院區,河南 開封 475003)
胃腸間質瘤是胃腸道最常見的間葉源性腫瘤[1],據統計,胃腸間質瘤的發病率為(1~2)/10萬[2],主要發生在中老年,KIT陽性的胃腸道間質瘤通常表現為梭型細胞形態,而KIT陰性的胃腸道間質瘤有PDGFRA 突變可以是上皮樣或混合型。目前,胃腸間質瘤的確切發病機制尚不清楚,并且沒有明確的腫瘤標志物預測其預后。本研究通過分析胃腸間質瘤組織中CD133、CD34、DOG-1表達水平,探討三者對胃腸間質瘤臨床診斷與治療的影響。
1.1研究對象入組我院自2015年1月至2017年6月間收治的150例胃腸間質瘤患者,其中男83例,女67例;腫瘤發生部位:直腸7例(4.67%),胃68例(45.30%),十二指腸13例(8.67%),空回腸42例(28.00%),結腸8例(5.33%),胃腸道外12例(8.00%)。納入標準:經病理組織學檢查確診為胃腸間質瘤;采樣前未經過其他治療包括放療及治療胃腸間質瘤;18歲以上;無其他重大疾病史。排除標準:有嚴重基礎性疾病;1個月內有大手術或大出血;年齡≤75歲。
1.2試劑與方法本研究中采用的抗體CD133(兔抗人多克隆抗體 1100),抗體CD34(單克隆抗體 150),抗體DOG-1(兔抗人多克隆抗體 1100),均購自美國Sigma公司。免疫組化的具體方法[3]:將載玻片放入烤箱中,60 ℃ 1 h,室溫冷卻載玻片;二甲苯浸洗3次,每次10 min;梯度乙醇水化,依次為100%、85%、75%,每次3 min;蒸餾水浸洗3次,每次3 min;將玻片浸入盛有500 mL 0.01 mol·L-1檸檬酸鹽溶液的燒杯中,保鮮膜覆蓋,微波高火加熱至沸騰,調整至解凍溫度,12 min;室溫冷卻,蒸餾水浸洗3次,每次3 min;體積分數3% H2O2浸洗10 min,消除內源性過氧化物酶;蒸餾水浸洗1次,3 min,PBS浸洗2次,每次3 min;100 μL體積分數10%羊血清室溫封閉10 min;……