腫瘤細(xì)胞與CD133+細(xì)胞數(shù)檢測(cè)對(duì)惡性胸腔積液患者病情與治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值*

石 芳，王 妍

中國(guó)石油中心醫(yī)院呼吸科 (廊坊065000)

胸腔積液是肺癌的臨床常見并發(fā)癥，臨床研究表明，有高達(dá)70%以上的惡性胸腔積液患者，由于肺癌而發(fā)生胸腔轉(zhuǎn)移[1]。惡性胸腔積液的成分較為復(fù)雜，其中包括少量的腫瘤細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞[2]。目前，臨床上采用離心的方法難以獲得高純度的腫瘤細(xì)胞[3]。本次研究通過(guò)免疫熒光染色，對(duì)腫瘤細(xì)胞與CD133+細(xì)胞作出鑒別，主要對(duì)腫瘤細(xì)胞與CD133+細(xì)胞數(shù)對(duì)惡性胸腔積液患者病情與治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值進(jìn)行研究分析，報(bào)道如下。

資料與方法

1 一般資料 選取2014年1月至2017年1月在我院進(jìn)行治療的伴有惡性胸腔積液的肺癌患者58例。年齡29～79歲，平均年齡(57.2±7.2歲)。男性患者36例，女性患者22例。腺癌37例，鱗癌11例，小細(xì)胞癌10例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均為伴有惡性胸腔積液的初治肺癌患者；②患者自愿參加本次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：③患者患有精神方面疾病；④患者不愿意配合調(diào)查研究。

2 治療方法 所有患者均進(jìn)行化療治療，其中腺癌37例，采用培美曲塞(國(guó)藥準(zhǔn)字H20051288)+順鉑(國(guó)藥準(zhǔn)字H20010743)治療；鱗癌11例，采用紫杉醇(國(guó)藥準(zhǔn)字 H20058719)+順鉑化療；小細(xì)胞癌10例，采用依托泊苷(國(guó)藥準(zhǔn)字H32025583)+順鉑治療。通過(guò)免疫熒光染色-染色體熒光原位雜交技術(shù)，鑒別腫瘤細(xì)胞和CD133+細(xì)胞。免疫熒光染色試劑盒(IFH-STB-001)由賽特生物公司生產(chǎn)。

3 觀察指標(biāo) ①根據(jù)實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[4]，評(píng)價(jià)患者治療前后的治療效果。②比較腫瘤細(xì)胞數(shù)與患者臨床療效的關(guān)系。③比較CD133+細(xì)胞數(shù)與與患者臨床療效的關(guān)系。

結(jié) 果

1 腫瘤細(xì)胞數(shù)與臨床病理的關(guān)系分析 腫瘤細(xì)胞數(shù)在不同性別、不同年齡段以及肺癌的病理類型之間沒(méi)有顯著差異，腫瘤細(xì)胞數(shù)在不同轉(zhuǎn)移范圍中有明顯差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 腫瘤細(xì)胞數(shù)與臨床病理的關(guān)系分析

2 CD133+細(xì)胞數(shù)與臨床病理的關(guān)系分析 CD133+細(xì)胞數(shù)在不同性別、不同年齡段以及肺癌的病理類型之間沒(méi)有顯著差異，腫瘤細(xì)胞數(shù)在不同轉(zhuǎn)移范圍中有明顯差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 CD133+細(xì)胞數(shù)與臨床病理的關(guān)系分析

3 腫瘤細(xì)胞數(shù)、 CD133+細(xì)胞數(shù)與臨床療效的關(guān)系分析 腫瘤細(xì)胞數(shù)和 CD133+細(xì)胞數(shù)少的患者臨床療效明顯優(yōu)于細(xì)胞數(shù)多的患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 腫瘤細(xì)胞數(shù)、 CD133+細(xì)胞數(shù)與臨床療效的關(guān)系分析 (例)

討 論

胸腔積液是肺癌患者的臨床常見并發(fā)癥，且胸腔積液成分復(fù)雜[5]。臨床研究表明，肺癌患者的胸腔積液中存在大量的淋巴細(xì)胞，大量的白細(xì)胞存在對(duì)臨床診斷帶來(lái)一定的難度[6-8]。本次研究通過(guò)應(yīng)用差減富集技術(shù)，有效去除了肺癌患者胸腔積液中大量的白細(xì)胞，幫助臨床上獲得高純度的腫瘤細(xì)胞。通過(guò)這種方法獲得的高純度腫瘤細(xì)胞，一方面，提高了臨床陽(yáng)性檢出率；另一方面，有利于研究腫瘤細(xì)胞對(duì)惡性胸腔積液患者病情與治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值[9-10]。目前，臨床上采用離心的方法難以獲得高純度的腫瘤細(xì)胞，相比于臨床上傳統(tǒng)的離心法，采用差減富集技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞檢測(cè)具有十分明顯的優(yōu)勢(shì)[11]。目前臨床上關(guān)于胸腔積液的研究還停留在良性、惡性的鑒別上[12-14]。本次研究，通過(guò)免疫熒光染色-染色體熒光原位雜交技術(shù)，鑒別腫瘤細(xì)胞和CD133+細(xì)胞，進(jìn)一步研究腫瘤細(xì)胞與CD133+細(xì)胞數(shù)對(duì)惡性胸腔積液患者病情與治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值。

肺癌胸腔積液成分復(fù)雜，除了含有少量腫瘤細(xì)胞，還包括一些數(shù)量稀少的腫瘤干細(xì)胞[15]。本次研究所有患者均進(jìn)行化療治療，其中腺癌37例，采用培美曲塞+順鉑治療；鱗癌11例，采用紫杉醇+順鉑化療；小細(xì)胞癌10例，采用依托泊苷+順鉑治療。通過(guò)差減富集技術(shù)，去除肺癌患者胸腔積液中絕大多數(shù)的白細(xì)胞，然后再通過(guò)免疫熒光染色對(duì)腫瘤細(xì)胞與CD133+細(xì)胞作出鑒別[16]。本次研究主要對(duì)腫瘤細(xì)胞與CD133+細(xì)胞數(shù)對(duì)惡性胸腔積液患者病情與治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值進(jìn)行研究分析，具體結(jié)果如下：腫瘤細(xì)胞數(shù)在不同性別、不同年齡段以及肺癌的病理類型之間沒(méi)有顯著差異，腫瘤細(xì)胞數(shù)在不同轉(zhuǎn)移范圍中有明顯差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CD133+細(xì)胞數(shù)在不同性別、不同年齡段以及肺癌的病理類型之間沒(méi)有顯著差異，腫瘤細(xì)胞數(shù)在不同轉(zhuǎn)移范圍中有明顯差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。腫瘤細(xì)胞數(shù)和 CD133+細(xì)胞數(shù)少的患者臨床療效明顯優(yōu)于細(xì)胞數(shù)多的患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。早期的研究，通過(guò)基于染色體著絲粒探針的FISH技術(shù)來(lái)進(jìn)行胸腔積液的良、惡性鑒別[17]。隨著技術(shù)的發(fā)展，臨床相關(guān)研究已經(jīng)證實(shí)，F(xiàn)ISH技術(shù)相比于傳統(tǒng)的細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)具有更高的敏感性[18-19]。本次研究以FISH檢測(cè)技術(shù)為基礎(chǔ)聯(lián)合使用陰性富集法，去除肺癌患者胸腔積液中絕大多數(shù)的白細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)了更多的循環(huán)血腫瘤細(xì)胞，進(jìn)一步通過(guò)免疫熒光染色-染色體熒光原位雜交技術(shù)，對(duì)腫瘤細(xì)胞和CD133+細(xì)胞作出鑒別。本次研究的結(jié)果也提示，陰性富集法與FISH檢測(cè)技術(shù)相聯(lián)合的檢測(cè)方法，有效提高了臨床檢測(cè)的檢出率，診斷的陽(yáng)性率高達(dá)86%，這顯著體現(xiàn)了兩種方式相聯(lián)合的檢測(cè)優(yōu)勢(shì)。臨床有研究表明，肺癌患者的胸腔積液中，可能存在腫瘤干細(xì)胞表達(dá)標(biāo)志物[20]。有相關(guān)研究專門對(duì)胸腔積液中的CD133+細(xì)胞作出進(jìn)一步探討，發(fā)現(xiàn)表達(dá)CD133+的腫瘤細(xì)胞數(shù)具有腫瘤干細(xì)胞特性[21-22]。本次研究中在國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究腫瘤細(xì)胞與CD133+細(xì)胞數(shù)對(duì)惡性胸腔積液患者病情與治療效果的預(yù)測(cè)價(jià)值。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與腫瘤細(xì)胞的預(yù)測(cè)價(jià)值相一致，CD133+細(xì)胞與腫瘤轉(zhuǎn)移范圍關(guān)系密切[23]。同時(shí)腫瘤細(xì)胞和CD133+細(xì)胞與惡性胸腔積液患者的治療效果關(guān)系密切，胸腔積液中的腫瘤細(xì)胞和CD133+細(xì)胞數(shù)越多，可能惡性腫瘤的擴(kuò)散范圍越廣，臨床治療效果也相應(yīng)的越差。

綜上所述，胸腔積液中的腫瘤細(xì)胞和CD133+細(xì)胞數(shù)可以較為準(zhǔn)確的反映惡性胸腔積液患者病情，同時(shí)它們可能是晚期肺癌的有效預(yù)測(cè)因子。

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