血液病患者反復輸血對配血相合率的影響分析

林玉蓓 李曉榮（通訊作者） 詹曉燕 魯思文

（江蘇省中醫院血庫 江蘇 南京 210029）

輸血是血液病重要的治療手段，該院50%的輸血治療應用于血液科。血液病患者長期反復輸血，存在嚴重的輸血安全隱患，但卻未引起臨床足夠的重視。輸血工作者應該致力于如何防范和減少其輸血不良反應，檢測患者血清中的不規則抗體或確認患者紅細胞的致敏狀態是關鍵。抗人球蛋白試驗是輸血前試驗的經典方法，但在臨床上卻極少被開展為輸血前常規篩查項目，尤其是針對反復輸血患者。直接抗人球蛋白試驗（DAT）：是利用抗人球蛋白血清與體內已被不完全抗體或補體致敏的紅細胞產生凝集反應，檢查紅細胞是否已被不完全抗體所致敏。間接抗人球蛋白試驗（IAT）：是利用已知抗原的紅細胞測定受檢者血清中相應的不完全抗體或補體。該研究對176例血液科患者根據輸血次數進行分組，分別進行直接/間接抗人球蛋白試驗，旨在分析其相關性，研究過程如下。

1.材料與方法

1.1 標本

來源于該院血液科2013年1月—2014年5月申請輸血的血液病患者176例。涉及淋巴瘤、骨髓增生異常綜合征、再生障礙性貧血、白血病、自身免疫性溶血性貧血等15個病種。輸血次數從1次到80次不等。根據輸血治療次數分為輸血1-3次組和輸血 4次以上組，其中輸血1～3次患者共77例。輸血4次以上患者99例。

1.2 儀器

Diana Incubator孵育器、Dianafuge離心機

1.3 試劑

抗人球蛋白檢測卡anti-IgG+C3d型（批號13183.01.1）由戴安娜Grifols公司提供；抗體篩選細胞（批號20145609）由上海血液生物醫藥公司提供；不規則抗體質控品（批號：20140422）由北京金豪制藥公司提供。

1.4 方法

按照《全國臨床檢驗操作規程》的方法及結果判定。

DAT：取1張coomb’s卡，在受檢者孔中加入受檢者1%紅細胞懸液50ul，立即用Dianafuge離心機離心9分鐘（1100轉/分），判定結果：受檢者紅細胞凝集者為直接抗人球蛋白試驗陽性，不凝集者為陰性。

IAT：取1張coomb’s卡，標注1、2、3號柱，分別加入Ⅰ號Ⅱ號Ⅲ號篩選紅細胞50ul，再分別加入患者血漿25ul，孵育15分鐘，用Dianafuge離心機離心9分鐘（1100轉/分），判定結果：1、2、3號柱中有一柱凝集，間接抗人球蛋白試驗陽性。1、2、3號柱全部不凝集，間接抗人球蛋白試驗陰性。

1.5 統計學處理

使用SPSS13.0統計學軟件，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05具有統計學意義。

2.結果

2.1 輸血1～3次組與輸血4次以上組直接抗人球蛋白試驗結果比較

經過統計學分析，直接抗人球蛋白試驗兩組之間陽性率差別有統計學意義，P＜0.05。（表1）

表1 輸血1～3次組與輸血4次以上組直接抗人球蛋白試驗陽性率統計

2.2 輸血1～3次組與輸血4次以上組間接抗人球蛋白試驗結果比較

經過統計學分析，間接抗人球蛋白試驗，兩組之間陽性率差別有統計學意義，P＜0.01。（表2）

表2 輸血1～3次組與輸血4次以上組間接抗人球蛋白試驗陽性率統計

2.3 各型血液病直抗/間抗陽性例數的分布比較（表3）

表3 直抗/間抗陽性率在各型血液病中的分布情況

3.討論

本研究數據表明輸血4次以上的血液病患者DAT/IAT陽性率明顯高于輸血1～3次的患者。隨著輸血次數和輸血量的增加，紅細胞的致敏率、不規則抗體的產生率都隨之升高，將直接導致配血困難，從而拖延治療。在血液病漫長的治療過程中，輸血是主要的支持手段之一，長期反復輸血不可避免。免疫因素和血液病的發生密不可分，人體免疫功能異常是血細胞病變的重要原因之一，而輸入患者體內的異源則加劇了免疫功能的紊亂。由于反復輸血引起機體進行性的免疫功能抑制[1]，輸入患者血液中的IgG與其體內的血型物質結合，或者患者本身的IgG與輸入的血型物質結合，從而形成循環免疫復合物，當機體未能及時清除此種免疫復合物，其攜帶補體結合紅細胞上的補體受體[2]，在血液中持續存在，導致DAT陽性。有研究報道反復輸血DAT陽性率為16.7%[3]，明顯高于一般人群（0.37%）[4]。輸血過程中的免疫刺激更能導致不規則抗體的出現，引起IAT陽性。一般人群不規則抗體檢出率為0.2%～2%[5]。有文獻報道大量多次輸血產生不規則抗體的頻率為15%～20%[6]，本研究數據則達到均數30%以上。更有研究顯示受血者產生抗紅細胞的自身抗體與輸血次數相關，輸血次數達到6次以上，其抗體產生率高達87.9%[7]。在本研究中，反復輸血“4次以上組”有16例因抗體篩查陽性造成配血困難，經江蘇省血液中心進一步檢驗，確認其中4例為抗-E。E抗原的抗原性僅次于D抗原，由于目前臨床并未開展E抗原的普篩，所以輸血產生抗-E幾率較高，為69.7%[8]。

本統計顯示Coomb’s試驗陽性患者多分布于淋巴瘤和自身免疫性溶血性貧血。自身免疫性溶血性貧血（AIHA）是由于患者自身免疫功能調節紊亂，不能正確識別自身和外來抗原，從而使體內產生了自身抗體和活化補體，這些抗體和（或）補體吸附于紅細胞表面或游離于血清中，導致紅細胞破壞加速、壽命縮短而引起溶血性貧血。AIHA包括原發性和繼發性兩大類，繼發性自身免疫性溶血性貧血中淋巴系統腫瘤最常見，約占50%，而通常繼發于B淋巴細胞來源的淋巴瘤[9]。這可能與惡性淋巴瘤患者免疫功能紊亂導致的血漿中產生自身抗體及針對紅系生成的某些體液抑制因子有關。在AIHA的輸血問題上，臨床醫生與實驗室人員的意見往往相左。臨床常為AIHA患者反復申請輸血，而輸血的免疫學風險很大，除了＞1/3的患者有不規則抗體，部分患者血清中的自身抗體具有血型特異性以外，輸血本身也可能加重溶血[10]。

綜上所述，應對血液科反復受血患者進行常規輸血前Coomb’s試驗，檢測不規則抗體，監測機體被致敏的情況。對AIHA患者必須認識到輸血的危險性，嚴格把控輸血指征。不規則抗體篩查陽性患者應進一步檢測其特異性，選擇缺乏相應抗原的血液進行交叉配血，這對保證臨床輸血安全有很重要的意義。

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