育齡婦女血清維生素D水平不足可能增加早期自然流產的風險

王立芹，侯 偉，閆曉婷，惠凌云，王 麗，白 娥，于學文

(1. 西安交通大學第一附屬醫院，陜西 西安 710061；2. 西安醫學院護理系，陜西 西安 710021；3. 西北婦女兒童醫院，陜西 西安 710002)

維生素D屬于脂溶性維生素，除具有經典的鈣磷調節作用之外，近年來研究認為維生素D調節著人類的生殖功能[1]。調查顯示中國北京育齡婦女和妊娠婦女維生素D缺乏是一種常見的現象[2]，妊娠期維生素D缺乏與產前子癇、胎兒宮內生長發育遲緩相關，我們既往研究也發現妊娠期維生素D營養不足與復發性早期自然流產相關[3]，但關于有復發性早期自然流產史的育齡婦女血清維生素D水平尚未見報道，因此本研究檢測了有正常生育史的育齡婦女和有復發性早期自然流產史的育齡婦女血清維生素D水平，分析了血清維生素D水平與有復發性早期自然流產史的育齡婦女的相關性，為早期自然流產預防提供一定的研究基礎和理論依據。

1資料與方法

1.1資料

收集因為有復發性早期自然流產史于2014年5月至2015年10月在西安交通大學第一附屬醫院及西北婦女兒童門診就診的育齡婦女血清標本35份，設為實驗組；同時收集同期來門診進行孕前檢查的育齡婦女血清標本35份，作為對照組。實驗組和對照組的納入標準：①育齡婦女至少有2次早期自然流產史，無活產史；②平時月經規則，排除黃體功能不全的可能；③夫婦雙方的染色體分析結果正常；④無甲狀腺功能異常；⑤無糖尿病及高血壓等全身性慢性疾病；⑥生殖系統的解剖結構及性激素檢測未見異常；⑦自身免疫抗體檢測陰性及凝血相關檢查正常；⑧無生殖道感染；⑨葉酸代謝率及同型半胱氨酸檢測結果正常。對照組除滿足以上條件外，至少有一次活產史，未發生過任何不良孕產史。實驗組及對照組均排除在冬季就診的患者。本研究獲得西安交通大學第一附屬醫院倫理委員會的批準，研究對象均知情同意。

1.2調查內容

調查內容包括：患者的年齡，身高、體重、并計算體質指數(body mass index，BMI)，月經情況等。將月經周期為24～35天，經期2～7天確定為月經周期規則，否則為不規則。

1.3血清25羥基維生素D測定

晨起空腹抽取靜脈血5mL置于無菌的促凝管中，室溫放置2h，4℃ 1 000×g離心15min，收集上清液于干凈的1.5mL離心管中，置于-80℃保存。采用ELISA方法檢測外周血中25羥基維生素D[25-hydroxyvitamin D，25(OH)D]含量(武漢華美公司人25HVD3檢測試劑盒)。試驗嚴格按照試劑說明書操作。

1.4維生素D水平低下的判斷標準

本研究采用2011年美國內分泌學會的臨床指南建議的判斷人體維生素D缺乏的標準[4]:維生素D足夠即25(OH)D>75nmol/L(30μg/L)，維生素D不足即50nmol/L(20μg/L)<25(OH)D≤75 nmol/L(30μg/L)，維生素D缺乏即25(OH)D≤50nmol/L (20μg/L)。因此，本課題將血清25(OH)D水平在75nmol/L (30μg/L)以下確定為維生素D水平低下。

1.5統計學方法

利用SPSS 18.0軟件進行統計分析，定量資料采用均數±標準差(χ±S)表示，采用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗，相關分析采用Pearson相關檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1一般資料

在所調查的70名婦女中，平均年齡29.06歲，最大年齡40歲，最小年齡23歲，實驗組和對照組的平均年齡及平均BMI相比較無明顯差異(t=0.22，P=0.83；t=0.61，P=0.55)，見表1。

表1兩組育齡婦女年齡和BMI比較(χ±S)

Table 1 Comparison of age and BMI in childbearing aged women between two groups (χ±S)

指標實驗組對照組tP年齡(歲)29．14±2．5928．97±3．940．220．83BMI(kg/m2)21．74±1．4921．55±1．170．610．55

2.2兩組婦女血清25(OH)D水平比較

本次檢測中有自然流產史的未孕育齡婦女血清25(OH)D含量的平均值為13.15±8.60μg/L，有正常妊娠史的未孕育齡婦女血清25(OH)D含量的平均值為36.44±11.33μg/L，有自然流產史的未孕育齡婦女血清25(OH)D水平明顯低于有正常妊娠史的婦女(t=9.69，P=0.00)，見表2。

表2兩組育齡婦女血清25(OH)D水平比較(χ±S)

Table 2 Comparison of serum of 25(OH)D levels in childbearing aged women between two groups (χ±S)

組別例數(n)25(OH)D含量(μg/L)實驗組3513．15±8．60對照組3536．44±11．33t9．69P0．00

2.3兩組婦女血清25(OH)D水平低下的發生情況

以葉酸不足為因變量，可能影響葉酸水平的因素作為自變量進行二分類單因素Logistic回歸分析，結果顯示與年齡≥35歲的育齡婦女相比，20～24歲、25～29歲和30～34歲的育齡婦女發生葉酸不足在所檢測的35名有自然流產史的未孕育齡婦女中，34名婦女血清25(OH)D 水平低于30μg/L，維生素D不足的發生情況達到97.14%；而35名有正常妊娠史的未孕育齡婦女血清25(OH)D水平不足的發生情況為17.14%(6/35)；有自然流產史的未孕育齡婦女血清25(OH)D水平不足的發生情況明顯高于有正常妊娠史的婦女(χ2=45.73，P=0.00)。相關分析也顯示，育齡婦女血清維生素D水平不足與早期自然流產的發生明顯相關(r=0.81，P=0.00),從而推斷育齡婦女血清維生素D水平不足增加了妊娠后早期自然流產的風險，見表3。

表3兩組婦女血清25(OH)D水平低下的發生情況[n(%)]

Table 3 Incidence of low level of serum 25(OH)D in two groups of women [n(%)]

組別例數(n)25(OH)D水平低下者實驗組3534(97．14)對照組356(17．14)χ245．73P0．00

3討論

3.1循環血中25(OH)D含量檢測

目前1α,25-二羥基維生素D(1α,25-dihydroxyvitamin D3)是公認的最有生物活性的維生素D，但由于其半衰期短，僅有4～6小時，而且受到甲狀旁腺激素調節的影響，較難反映體內維生素D營養狀況。而血清25(OH)D是外周血中維生素D的重要代謝產物，半衰期較長，一般為2～3周，25(OH)D含量及生物形式相對較穩定，所以目前認為25(OH)D水平是反映個體維生素D狀態的最好指征[5]，所以選擇檢測了循環血清中25(OH)D含量來確定婦女的維生素D狀況。

3.2血清維生素D水平與復發性早期自然流產

孕齡婦女血清中維生素D水平與生殖健康的關系已經受到廣大學者的關注。既往研究發現患有多囊卵巢綜合征的育齡婦女循環血中維生素D含量較正常婦女低，68.00%的多囊卵巢綜合征的婦女有維生素D缺乏[6]；也有研究發現婦女血清中25(OH)D水平低與子宮肌瘤的高發相關[7]；在循環血中維生素D缺乏的婦女中，用克羅米芬促排卵，卵泡的發育的數量明顯減少[8]。本次研究也發現有正常妊娠史的育齡婦女血清中25(OH)D水平明顯高于有自然流產史的育齡婦女，提示育齡婦女血清25(OH)D水平降低也許是妊娠后早期自然流產的一個危險因素。其機制也許與維生素D參與了人體的免疫調節及一些特異的基因調節有關。在妊娠期，維生素D調節了母胎界面的免疫反應，參與了妊娠期激素的調節及胎盤血管的重建；在非妊娠期，維生素D通過減少促炎細胞因子的合成，增加抗炎細胞因子的產生而參與了子宮內膜的免疫調節，同時也調節了特異基因HOXA10的表達，HOXA10基因調節著子宮內膜激素的變化及著床期子宮內膜的容受性[9]。但維生素D對妊娠調節的具體機制還有待進一步研究。

3.3婦女血清維生素D水平低下的狀況

對于人體血清維生素D最佳濃度的評價標準尚存在爭議。對于成人骨骼健康，一些學會認為血清25(OH)D≥50nmol/L可以足以維持骨骼健康(Ross A C, 2011年; Nowson C A, 2012年)；一些學會認為血清25(OH)D>75nmol/L才可以達到維生素D的非骨骼效應(Holick M F，2012年；Dawson-Hughes B，2010年)。本次研究是觀察維生素D的非骨骼效應，所以以血清25(OH)D<75nmol/L為維生素D低下的標準。結果發現有復發性早期自然流產史的育齡婦女維生素D低下的發生率為97.14%，明顯高于有正常生育史的婦女，推斷存在維生素D營養不良的育齡婦女將來妊娠時發生自然流產的風險增加。

綜上所述，育齡期婦女血清維生素D水平降低可能增加妊娠后早期自然流產的風險，但還需大樣本或前瞻性研究證實。綜述文獻及本研究結果建議育齡期婦女在有條件的情況下可開展血清維生素D的篩查，如果缺乏適當補充或增加非劇烈日光的皮膚曝露，減少生殖健康問題的發生。

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