顯微鏡復(fù)查在血常規(guī)檢驗(yàn)中的重要意義

趙歆慧

（遼寧省大連市金州區(qū)第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 大連 116100）

近年來，全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)工作中，它具備精密度高、速度快、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)勢(shì)，但同時(shí)也存在異常細(xì)胞無法識(shí)別和細(xì)胞誤判等問題，而顯微鏡復(fù)查能夠彌補(bǔ)儀器分析在這方面的不足，為疾病診斷提供更加可靠的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源：選取我院2015年2月的門診患者2987例作為研究對(duì)象，對(duì)其中血常規(guī)結(jié)果異常且符合復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)的216例標(biāo)本進(jìn)行顯微鏡復(fù)查。

1.2 儀器與試劑：Sysmex XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套試劑、光電顯微鏡、瑞士-姬姆薩復(fù)合染液。

1.3 方法

1.3.1 做好每日質(zhì)控，保證Sysmex XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀能夠正常、準(zhǔn)確地工作。

1.3.2 采集患者的EDTA抗凝血標(biāo)本2 mL，在采集后0.5～2 h內(nèi)進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)，將符合復(fù)檢要求的標(biāo)本各制作一張血涂片，然后用瑞士-姬姆薩復(fù)合染液在1 h內(nèi)完成染色。血涂片要求：厚薄適宜，血膜頭、體、尾分明，分布均勻，兩側(cè)留有一定空隙，邊緣整齊，染色良好。

1.3.3 顯微鏡復(fù)查：首先在顯微鏡低倍鏡下閱全片，初步判斷一下血涂片的制片和染色情況，再在油鏡下對(duì)血細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行分析，觀察是否存在異常形態(tài)的紅細(xì)胞和血小板，計(jì)數(shù)有核細(xì)胞各系各階段的數(shù)量和百分比，并對(duì)分析結(jié)果進(jìn)行紀(jì)錄。估算細(xì)胞數(shù)量，如果與儀器檢測(cè)結(jié)果差異較大則需要進(jìn)行手工計(jì)數(shù)；如果有核紅細(xì)胞數(shù)量增多，則應(yīng)對(duì)細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行校準(zhǔn)。

1.4 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)衛(wèi)生部頒發(fā)的《血細(xì)胞復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)》相關(guān)內(nèi)容：對(duì)于新生兒；WBC＞20.0×109/L或＜3.5×109/L；Hb＞180 g/L或＜70 g/L；PLT＞500×109/L或＜70×109/L；中性粒細(xì)胞＞12.0×109/L或＜1.0×109/L；淋巴細(xì)胞＞5.0×109/L；嗜堿性粒細(xì)胞＞0.5×109/L；嗜酸性粒細(xì)胞＞1.0×109/L；單核細(xì)胞＞1.5×109/L；無細(xì)胞分類及異常分類提示者，均需做血涂片鏡檢。

2 結(jié) 果

2987例標(biāo)本中，符合復(fù)檢要求的標(biāo)本為283例，占9.47%。283例異常標(biāo)本中實(shí)際復(fù)檢為216例，占76.33%；未復(fù)檢為67例，占24.67%。216例顯微鏡復(fù)檢結(jié)果：與儀器檢測(cè)結(jié)果相符的有161例，占74.54%；不相符的有55例，占25.46%。結(jié)果不符主要表現(xiàn)在幼稚細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、聚集血小板等方面。

3 討 論

血液通過血管在全身循環(huán)，各種組織器官都與血液密切接觸。全身各系統(tǒng)的疾病可以反應(yīng)在血液變化中。血常規(guī)檢驗(yàn)是臨床最常用的檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，可以發(fā)現(xiàn)血細(xì)胞形態(tài)以及數(shù)量的變化，對(duì)患者體內(nèi)早期病癥及時(shí)發(fā)現(xiàn)，包括：血液疾病、造血功能異常、貧血等疾病[1]，目前仍是篩檢疾病的首要項(xiàng)目。而血細(xì)胞數(shù)量和形態(tài)的改變尤以血液病最為明顯。觀察血涂片對(duì)疾病的診斷和鑒別診斷具有非常重要的意義。

傳統(tǒng)的顯微鏡血細(xì)胞計(jì)數(shù)或分類方法速度慢、誤差大、影響因素多，而且難以滿足臨床日益增多的標(biāo)本檢測(cè)量的需求。現(xiàn)在，全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀已在臨床普及，它具有精度高、速度快、操作易、功能強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)，已基本取代傳統(tǒng)的血細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類方法。但顯微鏡鏡檢也有儀器檢測(cè)無法取代的優(yōu)勢(shì)，它可以準(zhǔn)確區(qū)分毒性變中性粒細(xì)胞、嗜酸性及嗜堿性粒細(xì)胞、幼稚細(xì)胞、杜勒氏體、空泡變性、潘漢氏畸形、奧氏小體、漿細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、核左移等細(xì)胞，從而為疾病診斷提供可靠依據(jù)[2]。

此次研究結(jié)果說明儀器分析雖然能方便快捷的提供檢測(cè)結(jié)果，但它只能作為一種篩選試驗(yàn)，有時(shí)很難提供完全準(zhǔn)確的分析結(jié)果，容易造成誤診和漏診。顯微鏡鏡檢是血常規(guī)傳統(tǒng)的檢查方法，雖然操作繁瑣并對(duì)檢驗(yàn)人員技術(shù)經(jīng)驗(yàn)要求高，但它卻是儀器無法完全替代的一種檢查手段。

要想得到準(zhǔn)確的顯微鏡鏡檢結(jié)果必須要有合格的血涂片和準(zhǔn)確的細(xì)胞識(shí)別做基礎(chǔ)。①一張合格的血涂片應(yīng)該是血膜由厚到薄逐漸過渡，厚薄適宜，血膜頭、體、尾分明，分布均勻，兩側(cè)留有一定空隙，邊緣整齊，染色良好。血膜厚度、長(zhǎng)度與血滴的大小、推片與載玻片的角度、推片速度及HCT有關(guān)。血滴大、角度大、推片速度快則血膜厚，反之，血膜薄。HCT增高時(shí)應(yīng)保持較小的角度，HCT減低時(shí)應(yīng)保持較大的角度，這樣才能得到滿意的血涂片。血涂片應(yīng)在一小時(shí)內(nèi)完成染色。染色時(shí)應(yīng)根據(jù)染液濃度、室溫、細(xì)胞及有核細(xì)胞的數(shù)量來調(diào)整染色時(shí)間，不能使用同一標(biāo)準(zhǔn)，要有個(gè)性化。染色時(shí)血涂片應(yīng)水平放置，染液不能過少，以免染液蒸發(fā)后染料沉淀。染液應(yīng)覆蓋整個(gè)血膜，加緩沖液后要讓染液與其充分混勻。應(yīng)用流水直接沖去染液和緩沖液，而不能先倒掉染液再用流水沖洗，以免染料沉淀干擾閱片。當(dāng)血涂片染色不佳時(shí)要準(zhǔn)確查找原因并采取相應(yīng)措施予以糾正。②準(zhǔn)確的細(xì)胞識(shí)別要由有經(jīng)驗(yàn)的血細(xì)胞檢驗(yàn)人員完成，他不僅要有準(zhǔn)確識(shí)別血細(xì)胞的能力，還要具有一定程度的血液病臨床知識(shí)，對(duì)疾病能下診斷。血涂片的觀察內(nèi)容包括：粒細(xì)胞系統(tǒng)、淋巴細(xì)胞系統(tǒng)、單核細(xì)胞系統(tǒng)的細(xì)胞數(shù)量及形態(tài)，是否存在原始或幼稚階段的細(xì)胞等；是否存在有核紅細(xì)胞、漿細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、淋巴瘤細(xì)胞等其他有核細(xì)胞；紅細(xì)胞數(shù)量、大小、形態(tài)、有無內(nèi)含物（如瘧原蟲）、色澤及排列方式；血小板數(shù)量、大小、形狀、聚集性等。實(shí)際工作中，顯微鏡下的血細(xì)胞形態(tài)與教科書的描述并不完全一致，各系血細(xì)胞形態(tài)特征在成熟階段較為明顯，容易識(shí)別，然而當(dāng)細(xì)胞處于原始或幼稚階段時(shí)辨認(rèn)起來就比較困難，有時(shí)甚至還需要進(jìn)行一系列細(xì)胞化學(xué)染色輔助辨認(rèn)，這就需要我們通過大量的閱片和前輩的指導(dǎo)，在工作中不斷積累經(jīng)驗(yàn)才能掌握，這不是一朝一夕就能辦到的。

現(xiàn)在，隨著全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的普及，臨床實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)了過分依賴儀器分析、忽視常規(guī)形態(tài)學(xué)檢查的現(xiàn)象。從此次的研究結(jié)果來看，完全依賴全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)結(jié)果是不能滿足臨床診療疾病的需求的，因此必須加強(qiáng)血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，有計(jì)劃地培養(yǎng)后備人才，將儀器測(cè)定與顯微鏡復(fù)查有機(jī)地結(jié)合在一起，才能提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，更好地服務(wù)于臨床，為疾病的診斷和治療提供可靠的保障。

參考文獻(xiàn)

[1] 周麗華.不同采血方法進(jìn)行血常規(guī)檢驗(yàn)在臨床應(yīng)用中的價(jià)值探討[J].中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng),2012,22(5):431.

[2] 韓臨鳳.全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀與血涂片細(xì)胞形態(tài)學(xué)在血常規(guī)檢驗(yàn)中的聯(lián)合應(yīng)用價(jià)值探討[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2013,11(31):349-350.