肺癌患者中血清維生素D水平的研究

王力金 于修楠 吳 狄 牛曉南 張龍奎 王迎秋

（齊齊哈爾市第一醫(yī)院，黑龍江 齊齊哈爾 161005）

肺癌是一種常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率以及病死率都十分的高，而當(dāng)前對于該病的預(yù)防以及治療的方法效果并不十分理想，使得肺癌并沒有得到有效的控制，造成患者5年內(nèi)的生存率比較低。維生素D是一種脂溶性的維生素，其與人體的健康有著緊密的聯(lián)系，其除了調(diào)節(jié)機(jī)體對鈣磷的吸收以外還能夠歲骨骼的生長和重構(gòu)起到促進(jìn)的作用。近年以來，維生素D在腫瘤中所起到的作用也逐漸受到人們的關(guān)注[1]。維生素D不僅能夠誘導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)行分化，抑制細(xì)胞進(jìn)行增殖，促使細(xì)胞快速凋亡，對膠原的形成起到拮抗的作用，還能夠?qū)υ┗虻谋磉_(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)，對免疫調(diào)節(jié)起到作用等多種功能[2]，而且其發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的受體是普遍存在于組織細(xì)胞內(nèi)的維生素D受體。當(dāng)前，對維生素D喝腫瘤之間聯(lián)系的研究主要涉及到乳腺癌以及結(jié)腸癌等，關(guān)于其與肺癌的研究相對而言數(shù)量較少。本研究重點(diǎn)討論了維生素D水平與肺癌發(fā)病間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2015年11月至2016年11月在我院進(jìn)行治療的肺癌患者84例作為本次的研究對象，所有患者都進(jìn)行病理活檢后確診患有肺癌，并作為觀察組。同時(shí)，以此84例患者的性別以及年齡構(gòu)成作為標(biāo)準(zhǔn)在本院同期的體檢者中抽取84例健康成人組成對照組。觀察組中有46例男性患者和38例女性患者，患者年齡不低于31歲也不高于70歲，平均（51.23±5.18）歲。觀察組中男性患者有44例，女性患者有40例，年齡最大72歲，最小30歲，平均年齡（52.46±5.34）歲。兩組患者在性別、病情等一般資料方面進(jìn)行比較無明顯差異（P＞0.05），有可比性。

1.2 儀器：主要包括酶標(biāo)儀，ELISA試劑盒，離心機(jī)，光學(xué)顯微鏡，石蠟切片儀。

1.3 方法

1.3.1 使用ELISA對血清中的25（OH）D濃度進(jìn)行測定：觀察組和對照組所有患者均在清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取3 mL靜脈血液，使用離心機(jī)進(jìn)行離心操作，將血清保存在零下80 ℃的冰箱中。使用ELISA試劑盒[3]對25（OH）D水平進(jìn)行檢測，在酶標(biāo)儀450 nm處進(jìn)行數(shù)據(jù)的讀取工作。

1.3.2 免疫組化法對維生素D受體的表達(dá)水平進(jìn)行檢測：觀察組患者中有70例進(jìn)行了手術(shù)治療，分別取其癌變組織和癌變旁邊正常組織的標(biāo)本，采用免疫組化法對維生素D受體的表達(dá)水平進(jìn)行檢測。首先將采集到的所有組織制作成組織蠟塊，而后連續(xù)切片組織蠟塊，切片厚度是5 μm，而后進(jìn)行免疫組化。最后由兩位病理科的醫(yī)師在光學(xué)顯微鏡下采用雙盲法觀測組織的變化。每一個病例的標(biāo)本可隨機(jī)抽取10個高倍鏡下的視野，對陽性細(xì)胞的百分率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，還要對標(biāo)本的染色強(qiáng)度給予評分。一般對陽性細(xì)胞的統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)是細(xì)胞質(zhì)或者是細(xì)胞核里面可以看見黃色或者是棕黃色的顆粒即可認(rèn)為是陽性細(xì)胞。同時(shí)若陽性細(xì)胞所占的比例在5%以下則記0分，所占比例在5%～10%則記1分，陽性細(xì)胞占比＞10%而＜30%的評為2分，占比超過30%則評3分。相加以后的最終評分≤1分的即為陰性，＞1分則為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 ELISA檢測血清中25（OH）D濃度：ELISA的檢測結(jié)果顯示，對照組血清里25（OH）D的濃度是（125.35±6.28）nmol/L，而觀察組肺癌患者體內(nèi)血清里25（OH）D的濃度是（92.34±5.19）nmol/L。觀察組患者血清中維生素D的水平顯著低于對照組，兩組進(jìn)行比較差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 免疫組化法檢測肺癌患者癌變組織及其旁邊正常組織中維生素D受體的表達(dá)水平：癌變組織中，維生素D受體表達(dá)呈陰性的有41例，占58.57%，呈陽性的有29例，占到41.43%。癌變位置旁邊的正常組織中維生素D受體表達(dá)呈現(xiàn)陰性的有19例，占到27.14%，呈現(xiàn)陽性的有51例，占到72.86%。檢測結(jié)果可以看到，無論是癌變組織還是癌變位置旁邊的正常組織內(nèi)都存在維生素D受體的表達(dá)，但是癌變組織內(nèi)的維生素D受體陽性表達(dá)的概率是41.43%，顯著低于癌旁的正常組織的陽性表達(dá)率72.86%，比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。充分說明在癌變組織中維生素D受體的表達(dá)更低。

3 討 論

維生素D是脂溶性維生素的一種，主要來自于人體通過自身作用進(jìn)行合成以及食用動物性食物后從中攝取。維生素D在受到光照后進(jìn)行轉(zhuǎn)化或者經(jīng)過食物的消化吸收以后能夠與結(jié)合蛋白相遇并與之結(jié)合[4]，之后被運(yùn)送到肝細(xì)胞內(nèi)，在25-羥化酶的催化下能夠形成比較穩(wěn)定的代謝產(chǎn)物25（OH）D，而在腎臟內(nèi)25（OH）D將會再次發(fā)生羥基化反應(yīng)，生成1，25（OH）D3，其具有生物活性。維生素D除了具有調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)部鈣磷的吸收和代謝左右以外，還能夠?qū)?xì)胞的增殖過程產(chǎn)生抑制作用[5]，對細(xì)胞的分化過程起到誘導(dǎo)的作用，對腫瘤細(xì)胞的凋亡過程起到促進(jìn)的作用，同時(shí)能夠進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)。但是1，25（OH）D3要發(fā)揮其生物效應(yīng)并其他的生物學(xué)上的調(diào)節(jié)作用需要依托維生素D受體的介導(dǎo)。有研究報(bào)道指出[6]，1，25（OH）D3對腫瘤細(xì)胞的繼續(xù)生長有一定的抑制作用，主要是因?yàn)?，25（OH）D3可以在腫瘤細(xì)胞內(nèi)部和維生素D受體相結(jié)合，而后再和視黃醛X受體相遇并與之結(jié)合成異源二聚體[7]，繼而形成能夠?qū)D(zhuǎn)錄過程起到調(diào)控作用的復(fù)合體，進(jìn)而對下游靶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄以及表達(dá)的過程進(jìn)行調(diào)節(jié)[8]。

ELISA檢測結(jié)果顯示，觀察組肺癌患者體內(nèi)血清中25（OH）D的濃度是（92.34±5.19）nmol/L，而對照組正常人群血清里25（OH）D的濃度是（125.35±6.28）nmol/L，觀察組血清中25（OH）D的濃度顯著低于對照組，比較差異有意義（P＜0.05）。說明肺癌患者體血清中維生素D的水平較正常人的要低，由此我們推測可能是由于喪失了維生素D對細(xì)胞的保護(hù)以及調(diào)節(jié)作用，才使得肺癌的患病風(fēng)險(xiǎn)升高。從另一個角度來講，也可以認(rèn)為對于那些患肺癌風(fēng)險(xiǎn)較大的人或者是已經(jīng)患了肺癌的人群，適量的補(bǔ)充機(jī)體需要的維生素D，可能會降低患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)，減緩肺癌進(jìn)一步發(fā)展速度，但其具體的作用機(jī)制還不完全明確，需要進(jìn)一步進(jìn)行更深入的探索。而不可否認(rèn)維生素D發(fā)揮作用的過程中絕離不開維生素D受體的表達(dá)。研究結(jié)果也證明，癌組織中維生素D受體的表達(dá)低于正常組織。

綜上所述，維生素D可能是肺癌患者發(fā)病過程中的一個具有保護(hù)性作用的因素，適時(shí)適量的補(bǔ)充維生素D可能可以降低罹患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)，甚至減緩肺癌患者病情的發(fā)展，有必要在臨床上進(jìn)行更深入的研究。

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