李海蘭 孫利峰
(遼寧省凌源市中醫院,遼寧 凌源 122500)
血尿是泌尿系統常見的臨床表現,可由多種原因引起,不同病因引起的血尿,其紅細胞形態不盡相同,因此尿中紅細胞的形態是鑒別腎小球疾病與非腎小球疾病的關鍵環節之一。目前,實驗室鑒別血尿來源大多采用全自動尿沉渣分析儀聯合相差顯微鏡的方法,鑒于相差顯微鏡價格昂貴,不能在基層檢驗科普遍應用,本實驗特采用普通光學顯微鏡與全自動尿沉渣分析儀聯合應用,鑒別紅細胞形態,為血尿來源的鑒別提供參考,報道如下。
1.1 一般資料:收集我院2014年2月至2015年5月血尿標本180份,腎臟病理活檢確診腎小球性血尿116例,非腎小球性血尿64例。
1.2 儀器和試劑:光學顯微鏡(OLYMPUS CX-21);UF-1000i尿沉渣分析儀(日本Sysmex公司)及配套試劑、質控品。
1.3 方法:所有患者取混勻新鮮中段尿20 mL,分裝兩支試管(每支試管10 mL),分別用光學顯微鏡和UF-1000i分析儀和進行檢測。顯微鏡法檢測前,對尿液標本進行離心處理,以1500 r/min離心5 min,去上清液留0.2 mL尿沉渣,輕輕充分混勻,將混勻的尿沉渣置于載玻片上,在高倍鏡下計數每高倍視野的紅細胞[1];UF-1000i尿沉渣分析儀的操作按儀器使用說明書進行,并在測定前用進口配套質控物進行室內質量控制,結果在質控后進行檢測;所有尿液標本在收集后2 h內完成檢查。
1.4 結果判斷標準。顯微鏡結果判斷[2]:①非均一性血尿:尿中紅細胞數>8000個/mL,且大部分(>70%)紅細胞為兩種以上類型變形。②均一性血尿:尿中紅細胞數>8000個/mL,但大部分(>70%)紅細胞為正常紅細胞或單一型紅細胞。③混合性血尿:尿中紅細胞數>8000個/mL,形態異常紅細胞30%~70%;UF-1000i將紅細胞信息分為以下3種情況[3]:①非均一性:70%紅細胞前向散射光強度(FCS)<80 ch,紅細胞前向散射光分布寬度(RBC-FSCDW)<或>50 ch為腎性血尿(小紅細胞);②均一性:70%紅細胞FCS>100 ch,RBC-FSC-DW<50 ch為非腎性血尿(正常紅細胞);③混合性:70%紅細胞FCS>100 ch,RBC-FSC-DW>50 ch或70%紅細胞FCS80~100 ch,RBC-FSC-DW<或>50 ch為混合性血尿。
1.5 統計學處理:采用SPSS13.0統計軟件對數據進行處理,計數資料采用χ2檢驗,P<0.05認為差異有統計學意義。
UF-1000i尿沉渣分析儀與普通光學顯微鏡兩種方法測得180份患者尿中紅細胞信息見表1。
在116例腎性血尿中,UF-1000i分析儀敏感性[(非均一性+混合性)/腎性血尿總例數]為97.4%,普通光學顯微鏡敏感性為90.5%;在64例非腎性血尿中,UF-1000i分析儀特異性(均一性/非腎性血尿總例數)為82.8%,普通光學顯微鏡特異性為90.6%,差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。
腎病包含有急慢性腎小球腎炎、腎盂腎炎、IgA腎病、糖尿病腎病、腎病綜合征等。腎病后期均可發展為腎功能衰竭而危及患者生命,給社會及家庭帶來極重的經濟及精神負擔。如何及早發現腎病,對之進行及時有效的治療、延緩腎病的發展,成為腎臟病的關鍵。
腎病在發生發展和轉化過程中均會出現血尿及尿液成分和各種有病理意義的顆粒[4]。因此,尿液是反映腎臟器官發生病理變化的窗口。尿沉渣檢查檢出紅細胞、白細胞、上皮細胞、管型等成分,有“體外腎活檢”之稱[5]。任何類型的腎臟病變都可以在尿液中反映出來。根據患者不同的出血部位,可分為腎小球性血尿和非腎小球性血尿[6]。腎小球性血尿是指紅細胞通過有病變的腎小球基底膜進入尿中,形態、大小發生改變,如紅細胞出現棘形、環形、芽孢狀、花環狀等,并有體積偏小、大小不一等改變;非腎小球性血尿是指腎小球以下部位和泌尿通路上的出血,此時尿中紅細胞形態和體積無明顯改變[7]。在顯微鏡下可以辨認各種形態改變的紅細胞,準確性更高,缺點是費時費力,而且易受觀察者主觀影響,因此對檢驗人員要求較高。UF-1000i尿沉渣分析儀應用流式細胞術和電阻抗原理,對尿中有形成分進行鑒別及計數,同時可客觀地分析紅細胞形態,繪出形態變化曲線并給出紅細胞信息,這對于血尿的鑒別有重要意義[8]。但由于尿液有形成分復雜且不穩定,儀器檢測有一定的局限性。文獻報道紅細胞提示信息中有誤診現象:如UF-1000i提示紅細胞非均一性,而顯微鏡下發現為酵母樣菌;UF-1000i提示均一性而顯微鏡下見到草酸鈣結晶。因此,單獨應用尿沉渣分析儀根據紅細胞信息判斷血尿來源,只能起過篩作用。顯微鏡對細胞形態的分析更為直觀,但尿液中紅細胞受較多因素影響,如尿滲透壓、尿pH等均會導致紅細胞形態改變,高堿性尿液可使紅細胞膜脂質外層面積增加,出現鋸齒狀和棘形等多形態紅細胞[9]。本實驗采用常用的普通光學顯微鏡與UF-1000i尿沉渣分析儀,對臨床確診病例進行尿液中紅細胞形態進行分析,結果顯示,UF-1000i尿液沉渣分析儀與普通光學顯微鏡檢查這二種方法之間敏感性與特異性的差異均有統計學意義(P<0.05)。UF-1000i尿沉渣分析儀對腎小球血尿的敏感性很好,而顯微鏡對紅細胞形態的特異性比尿沉渣分析儀好,須二者互補聯合檢測,才能更好地為血尿來源提供可靠的實驗室依據。
因為尿中紅細胞形態受尿滲透壓、尿pH、代謝產物的影響,在膀胱內停留時間過長,其形態也會發生改變[10]。另外,尿液隨存放時間的延長紅細胞形態也會發生改變,造成儀器對尿紅細胞提示信息改變、參數改變;有菌尿和(或)結晶存在時,紅細胞更易變形,且結晶的產生也常會被儀器誤認。鑒于此,使用沉渣分析儀檢測尿液時,標本必須新鮮,且在2 h內完成[10]。
綜上所述,將顯微鏡與UF-1000i尿沉渣分析儀聯合應用,可以幫助臨床判斷尿液中紅細胞的來源。同時須做好標本采集的質量控制,以達到最佳檢驗效果。
[1] 張有成.實用臨床檢驗操作規程[M].北京:新世界出版社,2007:174-175.
[2] 劉成玉.臨床檢驗基礎[M].北京:中國醫藥科技出版社,2004:182-183.
[3] 齊杰,陳倩云,韓江,等.流式尿有形成分分析儀UF-1000i聯合相差顯微鏡在血尿來源診斷中的應用評價[J].中國中西醫結合腎病雜志,2009,10,(11):984-987.
[4] 叢玉隆,馬駿龍.幾種檢測尿紅細胞方法的價值與互補關系[J].中華醫學檢驗雜志,2002,25(3):263-264.
[5] 王建成,史振偉.尿紅細胞形態分析對糖尿病腎病與非糖尿病腎病鑒別診斷的意義[J].實用醫學雜志,2015,3l(35):95-97.
[6] 郭世喜.尿液紅細胞形態分型在腎性等血尿鑒別診斷中臨床的價值[J].現代養生,2015(6):45-46.
[7] 孫雪峰,葉任高.尿紅細胞形態及其臨床意義[J].中國實用內科雜志,2002,22(1):19-21.
[8] 叢玉隆,馬俊龍.幾種檢測尿紅細胞方法的價值與互補關系[J].中華檢驗醫學雜志,2002,25(5):263-264.
[9] 陳巧林,顧可梁,胡嘉波,等.相差顯微鏡和UF-1000i聯合檢測鑒別血尿來源[J].臨床檢驗雜志,2005,23(4):281-283.
[10] 汪嘉,李智,黃依明,等.標本放置時間對尿有形成分分析儀檢測紅細胞的影響[J].中華檢驗醫學雜志,2007,30(8):912-913.