獸藥多殘留樣品前處理技術研究情況

張鳳鳳

（陜西省西安市未央區動物疾病預防中心 710016）

現代畜牧業和水產養殖業幾乎都離不開獸藥，因為合理使用獸藥能夠減少動物的發病率和死亡率，促進動物生長從而提高經濟效益。但也有一些養殖戶為了追求更高的經濟效益，肆意濫用、超量使用獸藥，造成獸藥在動物體能殘留過量，給消費者帶來危害。因此，獸藥殘留分析方法顯得尤為重要，當前獸藥殘留分析方法包含樣品前處理和測定方法兩部分。本文將介紹獸藥多殘留樣品前處理技術，對現階段已有動物樣本前處理技術進行研究和推廣，針對不同樣本具有的特點對樣本前處理技術進行選擇，以期能實現檢測數據的準確性。

1 沉淀蛋白技術

沉淀蛋白技術作為一種動物樣品前處理的方法，其作用機理是通過對蛋白質進行沉淀，釋放動物樣品中的存在的藥物成分，然后對動物樣品中存在的藥物成分進行監測，獲得準確的數據，評估動物樣品中的藥物殘留情況。通過對蛋白質的沉淀去除可有效的防止提取過程中的發泡情況，這不僅可以降低樣品發生乳化幾率，同時還可以有效的保護儀器，延長儀器使用時間。作為獸藥殘留濃度監測的第一步，動物身體部位的不同也會導致同一種獸藥的殘留含量不同。如在取動物內臟后首先清除組織殘留的血液，然后加入適量生理鹽水，研磨以后離心，沉淀后吸取適量上清液進行檢測。通常情況下使用有機溶劑對獲得的蛋白質進行溶解，但如果存在水溶性蛋白質可以用酸類使蛋白質沉淀，過濾獲得蛋白。在所有有機溶劑中，乙腈是最好的一種溶劑，使用乙腈可有效的提高組分分離度，獲得較好的分離峰。如果使用高氯酸進行分離，則沉淀蛋白最好不要直接使用色譜柱進行分析，應在調整合適酸堿度的情況下用滲透膜進行過濾。這樣的操作可以避免因酸液的酸性太強損壞色譜柱。與其他樣品前處理技術相比，蛋白沉淀技術操作相對方便，但存在準確度和靈敏度較低的缺點。

2 液-液提取技術

液-液提取技術作為獸藥殘留檢測過程中對樣品進行前處理較為多用的一種技術在現階段也得到大范圍的推廣。這種技術主要包括液相萃取技術、多次提取技術及離子對提取技術。液相萃取技術同傳統萃取技術相似，是通過對與樣品不相同的溶解度選擇，利用待測組分在不同溶劑中溶解度不同，對待測組分進行提取。對于現階段，大部分獸藥主要屬于脂溶性獸藥，在對生物樣品進行前處理過程中，其他物質大多數屬于水溶性的。因此，可以利用液相萃取技術對雜質進行分離，實現待測組分的純化。如對可能含有較高獸藥殘留的樣本，如動物血液、皮毛、肌肉等進行處理。在進行實際操作過程中，檢驗人員可以根據相似相容原則，選取合適的溶劑如乙醚、乙醇等進行，在進行溶劑選擇時要注意選取的溶劑純度要達到分析純以上，這樣可以降低溶劑中存在的水分對分離造成的影響。此外，選取的溶劑在熔沸點、揮發性等特性方面也有較高的要求，這有利于降低對紫外檢測造成的影響。同時，為了保證實驗過程中的安全性，選取的溶劑應具有較高的化學穩定性。可以根據待測組分的極性對溶劑進行選擇，但在所有有機溶劑中盡量避免使用氯仿作為溶劑。不過液-液提取技術也存在一定的缺陷，就是需要較長的操作時間，且消除基質干擾得到的效果并不明顯，還需要用到較多的有機溶劑，而這些有機溶劑對人體和環境是有害的。

3 固相萃取技術

固相萃取技術是現階段應用最為廣泛的生物樣品處理技術，相對于液-液提取技術更為常用。其在原理上同高效液相色譜、氣相色譜的原理基本一致，同樣是通過相似相容原理對待測物質進行提取。經過幾十年的發展，固相萃取技術已較為成熟。現階段固相萃取技術主要通過4步完成對待測物質的萃取工作。首先，選擇合適的固相萃取柱，其口徑等都需要滿足實驗要求。然后進行萃取柱的填裝，填料粒度等同樣需要進行選擇，接著將樣品通過萃取柱，實現對測量樣本的分離工作。雖然固相萃取技術具有較好的優點，但由于其不能使用高壓進行萃取，因此消耗時間較多。如果基質比較復雜的情況下，則會存在低回收率且容易造成填料堵塞等問題。

4 總結

通過對當前使用最多的幾種動物樣品前處理技術分析可以發現，不同動物樣本具有不同的特點。要實現通過這些樣本的檢測獲得較為準確獸藥殘留量檢測必須選擇合適的樣品前處理技術。因此，必須加強對現有樣品前處理技術的學習，同時注意對新的處理技術進行研發。如此才能通過先進的、準確的獸藥多殘留樣品前處理技術獲得動物產品的獸藥殘留情況，從而服務于動物產品的市場準入，使食品安全問題得到有效解決，使消費者身體健康得到進一步的保障。