‘魯棗2號’和‘魯棗6號’花藥愈傷組織誘導及不定芽分化

關秋竹，張 瓊，孫紅雁，周廣芳，孫清榮

棗(Ziziphus jujube Mill.)組培繁殖通常選擇莖尖、莖段、葉片、胚、花藥等作為外植體，目前已有棗樹品種20個以上以各種類型的外植體建立了無菌離體繁殖體系［1～4］。通過花藥培養獲得愈傷組織和再生植株，可以為遺傳育種研究提供重要材料。棗的花藥培養開始于20世紀90年代，最初僅在金絲小棗上有過報道［5］。隨后研究者們對棗花藥愈傷組織的誘導及分化進行了研究［6，7］，并成功獲得了幾個棗品種花藥再生植株，如‘長紅棗’和‘金絲小棗’再生植株［8］;‘辣椒棗’和‘月光’棗源于花藥壁的再生植株［9］;‘冬棗’單倍體2 株［9］;‘贊皇大棗’單倍體1 株［10］。‘魯棗2 號’和‘魯棗6 號’是由山東省果樹研究所選育的新品種［11，12］，其花藥培養尚未見報道。為了更好地利用、保存和改良這些品種，本次研究以前人報道為基礎，通過正交實驗設計，旨在建立棗的離體花藥植株再生體系，為棗花藥離體培養研究和單倍體育種提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

5月底至6月初，在山東省果樹研究所棗樹資源圃采集棗樹新品種‘魯棗2號’和‘魯棗6號’綠色到黃綠色，且花萼尚未張開的幼嫩花蕾作為材料。

1.2 方法

1.2.1 花藥愈傷組織的誘導 幼嫩花蕾置于4℃冰箱中1 d后，用流水沖洗0.5～1.0 h，控凈水后置于超凈工作臺上的無菌燒杯內，用體積分數為0.70的酒精浸泡1 min，再用體積分數為0.05的次氯酸鈉溶液殺菌15 min，無菌水沖洗3～4次后，剝取花藥接種在愈傷組織誘導培養基上。愈傷組織誘導培養基采用MS，1/2 MS，1/4 MS培養基，附加葡萄糖、蔗糖、麥芽糖作為碳源(質量濃度均為30.0 g·L－1)，添加不同量的萘乙酸(NAA)及 2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)。……