綠原酸的研究進展

王玲娜， 姚佳歡， 馬超美*

（1.內蒙古大學 生命科學學院，內蒙古 呼和浩特 010021；2.呼和浩特職業學院 生物化學工程學院，內蒙古 呼和浩特 010058）

綠原酸（Chlorogenic acid，CGA）是由咖啡酸的1位羧基和奎尼酸的3位羥基縮合成酯的天然產物，是許多中藥材和蔬菜水果的有效成分，具有清除自由基、抗氧化、抗炎癥等多種生理活性，對II-型糖尿病、心血管疾病及一些與衰老相關的疾病也有預防或治療作用[1-4]。綠原酸被德國Free大學E.Eich教授認為是有希望成為抗艾滋病病毒（HIV）的先導化合物，因為他在研究中發現有些植物的次生代謝產物具有抗逆轉錄病毒活性[5]。在挪威和英國，綠原酸以商品名“Svetol”出售，作為添加劑加入咖啡和口香糖等食品中用于減肥[6]?？傊?，綠原酸在醫藥、化工和食品等領域都具有光明的應用前景。本文作者擬從理化性質、生物活性、合成方法及體內代謝等幾個方面對綠原酸的國內外研究進行了綜述，目的是為綠原酸的研究及資源的合理開發利用提供理論依據。

1 綠原酸

綠原酸，又稱3-O-咖啡?？崴?（3-O-caffeoylquinic acid），相對分子質量354.31，熔點208℃，半水合物為針狀結晶，[α]20D=-37（C=2.8），可溶于甲醇、乙醇，微溶于水、醚、乙酸乙酯，在氯仿、苯中溶解度較差。

1837年，Robiquet[7]第一次在咖啡豆中發現綠原酸，但那時并沒有“綠原酸”這個概念，直到1846年Payen[1]在描述綠色的咖啡豆中的酚類物質時首次提出“綠原酸”的概念。又經過半個世紀的探索，1897年Campbell和Osbome 2位科學家在向日葵籽中共同發現了一種名為：heli-anthotannic acid的物質，并指出該物質是向日葵籽蛋白變黑的根本原因；1909年，Gorter等人確認該化合物為綠原酸；1947年，Rudkin和Nelson初次確定了綠原酸的化學結構，即奎尼酸與咖啡酸縮合而成的一種酯[8]（結構見圖 1）。

圖1 綠原酸化學結構Fig.1 Chemical structure of chlorogenic acid

2 綠原酸及其天然類似物的分布

咖啡豆是富含綠原酸的飲食資源之一，咖啡豆品種不同，所含綠原酸的量也大不相同。綠色咖啡豆的干物質中，綠原酸的質量分數是6%～10%[1]。隨著研究的深入，科學家發現綠原酸分布廣泛，從高等雙子葉植物到蕨類植物都有，其中金銀花、杜仲葉、葵花籽、咖啡豆、茵陳、藍盆花等植物中含有較多綠原酸[9-10]。在金銀花和杜仲葉這2種中藥材中，綠原酸是其主要有效成分之一，以此同時，在我國，綠原酸的質量分數還被國家藥典規定為評價金銀花和綿茵陳等重要生藥的質量標準[11]。金銀花即“銀翹解毒片”、“銀黃口服液”和“雙黃連口服液”等臨床用清熱解毒藥的主要原料。

在植物中，除了含有綠原酸（chlorogenic acid，1）之外，還天然存在著許多綠原酸的類似物[12]。例如：綠原酸甲酯（methyl chlorogenate，2），綠原酸乙酯（ethyl chlorogenate，3），隱綠原酸（4-caffeoylquinic acid，4），新綠原酸（5-caffeoylquinic acid，5），異綠原酸 A （3，5-dicaffeoylquinic acid，6）， 異綠 原 酸 B（3，4-dicaffeoylquinic acid，7）， 異綠原酸 C （4，5-dicaffeoylquinic acid，8）， 萊薊素 （1，3-dicaffeoylquinic acid，9），1，5- 二 咖 啡 酰 奎 尼 酸 （1，5-dicaffeoylquinic acid，10）

表1 天然存在綠原酸的成分Table 1 Naturally occurring chlorogenic acid analogues acid

續表1

3 綠原酸的分離提取和檢測

綠原酸類物質的提取方法包括：水提法、有機溶劑浸提法、酶解法、超臨界流體萃取法、微波輔助法、超聲波輔助法等多種方法[12]。但鑒于綠原酸分子中存在5個羥基和1個羧基，在水中溶解度達4%，在中藥加工時多采用水為溶劑，加熱煮沸提取，以便提高綠原酸的浸出率，但相應地也增加了蛋白質、多糖等雜質的溶出。隨著科學技術的發展和研究的深入，李丹等[13]利用NKA-9樹脂對元寶楓中的綠原酸進行了分離，該樹脂具有較大的吸附容量，且易被解吸附，洗脫峰集中，分離效果較好。Sun Lijun等[14]有選擇性地采用X-5和聚酰胺樹脂分離和純化綠原酸，回收率達到89.16%，這種方法的開發將在工業和制藥業有非常廣闊的應用前景。Saleh[15]利用超聲波輔助技術從洋薊（朝鮮薊）中提取綠原酸，綠原酸的提取率高達50%，比單獨利用甲醇提取的提取率顯著增加。田龍[16]利用超高壓液相技術提取杜仲葉中綠原酸，與傳統方法相比，該法大大縮短了提取時間，提高了提取率。Hao Yi等[17]通過滲透實驗證明，發明了一種新型親水性磁性納米顆粒，這種顆粒具有選擇性吸附水性果汁中綠原酸的能力，因此可用于選擇性的分離和測定綠原酸。

綠原酸的含量測定多使用傳統方法[18]，如：紫外分光光度法（UV）、高效液相色譜（HPLC）；高效毛細管電泳（HPCE）等傳統的方法。但綠原酸的含量測定主要挑戰就是綠原酸同分異構體和類似物。這些物質結構相似，而且常常同時存在于同一種植物或同一藥材中，特別是對中藥復方成分進行含量測定時容易形成干擾，因此科學家不斷地進行研究、創新，發明了許多測定綠原酸類物質的新方法。Ma JN等用超高效液相-串聯四極桿質譜的多重反應動態監測模式對蒙藥藍盆花的綠原酸及3種二咖啡奎尼酸異構體進行了定量分析[19]。Ribeiro[20]研制出一種新型的碳納米分子印跡溶膠凝膠電化學傳感器，該傳感器應用于咖啡和番茄中綠原酸的測定，回收率分別是99.3%和108.6%，在食品檢測中顯示出良好的應用潛力。Zhang ShuiHan等[21]利用高效液相色譜串聯四極桿飛行時間質譜法（HPLC-Q-TOF-MS/MS）技術，對灰氈毛忍冬的花蕾中的綠原酸進行了全面分析，這種方法在檢測天然產物中的同分異構體時效果很好。Tomac[22]根據綠原酸的電化學性能，尤其是分子結構中的羥基（-OH）、碳碳雙鍵（-CH=CH）和酯基（-COOR））的電子效應，用微分脈沖伏安法（DPV）測定其在咖啡中的含量，結果表明：這種方法對綠原酸非常敏感且具有很好的選擇性。

4 綠原酸及其類似物的化學合成

4.1 綠原酸的合成

綠原酸在人類健康中發揮著重要的作用，由于其含量低、提取分離困難，很難大量獲得，因此越來越多的人希望通過化學合成的方法得到這類化合物。然而，由于分子中有多個羥基和羧基及酯鍵的存在，使綠原酸的合成困難重重，進展緩慢。綠原酸本身的全合成早在50年代就有報道，羥基和羧基均需要使用幾個保護基團并需要酸和堿處理去保護，使得綠原酸的產率不高。1998年Rohloff[23]報道了用丙酮與2，2-二甲氧基丙烷（DMP）的混合物可將奎尼酸轉化為B和微量的AOH（見圖2合成路線中相應的結構）?；衔顰OH是1，7和4，5位被保護，只有3-位為游離羥基的奎尼酸二縮酮中間體。2001年，Michael Sefkow[24]也成功合成了綠原酸，他指出，反應的關鍵是合成中間產物二縮丙酮。二縮丙酮合成主要是使用動力學的縮化作用，先將奎尼酸用三甲基氯硅烷（Me3SiCl）轉化為五硅烷化奎尼酸，在丙酮和DMP的混合溶液中，降低溫度并相對增加催化劑TMS-OTf的量可以減少副產物的生成，同時大量生成3位羥基游離的二縮丙酮AOH?；衔顰OH再與乙酰咖啡酰氯反應后去保護得到收率較好的綠原酸（合成路線1）。2008年，Smarrito等[25]通過奎尼酸馬龍酸酯與阿魏醛進行Knoevenagel縮合反應，合成了3-O-阿魏酰奎尼酸，即3'-O-甲基化綠原酸。

圖2 綠原酸的合成路線Fig.2 Synthetic route of chlorogenic acid

4.2 綠原酸衍生物的合成

由于綠原酸的分子結構中含有多個羥基和羧基，因此可以作為原料來合成活性更強或有新活性的衍生物。在綠原酸的7位引入親脂性基團后，生成有抗深部真菌作用的衍生物[26]（見圖3（a））。在綠原酸1，7和3，4位通過縮酮或縮醛鍵引入親脂性基團的化合物對α-葡萄糖苷酶有很強抑制作用，α-葡萄糖苷酶抑制劑可以延緩胃腸道對碳水化合物的消化和吸收，降低餐后高血糖，也是用來研發抗 II-型糖尿病藥物的重要物質[27]（見圖 3（b））。以奎尼酸二縮酮中間體（AOH）為起始原料，合成一系列2，3脫水的咖啡奎尼酸衍生物，其中2，3脫水的單咖啡?？崴峋哂辛己玫目笻IV病毒活性。2，3脫水的4，5二咖啡?？崴岬目笻IV病毒活性是3，5 二咖啡?？崴岬?2 倍[28]（見圖 3（c））。 在綠原酸1位引入氨基酸側鏈形成帶有酰胺鍵的衍生物，該物質具有抑制真菌1，3-β-D-葡聚糖合成酶的活性[29]（見圖 3（d））。

5 綠原酸生物活性

5.1 抗氧化活性

氧化應激（Oxidative Stress，OS）是指機體在遭受各種有害刺激時，體內高活性分子如活性氧自由基 （reactive oxygen species，ROS）和活性氮自由基（reactive nitrogen species，RNS）產生過多，導致氧化系統和抗氧化系統失衡，這種負面反應是導致衰老和疾病的一個重要因素。同樣，在傷口愈合過程中，一旦氧化應激發生，傷口的愈合也被延遲。Bagdas[30]研究發現，綠原酸具有非常強的抗氧化作用，能加速糖尿病大鼠創面修復，同時還不影響傷口超氧化物歧化酶和過氧化氫酶水平。氧化應激和炎癥反應發生的過程中伴隨著肝功能和腎功能下降。Li Shiyong等[31]研究發現，綠原酸能促進蛋白激酶B（Akt）的磷酸化，增加FOXO家族基因和抗凋亡蛋白Bcl-2的表達來抑制活性氧對骨髓干細胞的損傷。Zhou Yan[32]研究了綠原酸對線粒體的保護作用，通過綠原酸可以改善H2O2誘導損傷的腸道線粒體，使其呼吸鏈復合物I、IV、V的活性增加，還可以改變三硝基苯磺酸誘導的結腸炎大鼠的線粒體超微結構和線粒體損傷的事實，因此，證明綠原酸是一種可以通過改善和治療線粒體氧化損傷的防治腸道疾病的很有前途的藥物。Ferlemi等[33]用亞硒酸鈉誘導大鼠白內障形成，然后采用含有綠原酸等強生物活性的多酚物質的藍莓葉提取物進行體外實驗，發現其可以通過直接或間接抑制鈣蛋白酶的活性來防止白內障的發生。

圖3 綠原酸衍生物的合成路線Fig.3 Synthetic route of Chlorogenic acid derivatives

5.2 綠原酸的消炎和抗菌活性

炎癥反應是由外源性或內源性因素所引起組織損傷的一種生理反應。腸道炎癥是一種慢性復發性疾病，可使腸道上皮細胞損傷。綠原酸可以通過調節白細胞介素-8（IL8）來抑制由TNF-α和 H2O2所引起的腸上皮細胞炎癥反應[34]。Feng Yan等人[35]考察了綠原酸在體內、體外的抗氧化作用，結果表明綠原酸對D-半乳糖（D-galactose）所誘導的慢性肝、腎損傷有保護作用，這種保護作用是由于其具有抗氧化和抗炎活性。Lou Lixia等[36]通過白細胞介素誘導成纖維樣滑膜細胞（RSC-364）的發生炎癥反應，通過流式細胞儀和Western blot檢測發現，綠原酸能夠抑制細胞JAK/STAT and NF-kappa B信號通路中的關鍵分子的表達水平，并抑制這些信號通路在炎癥反應中的激活，從而抑制滑膜細胞增殖。綠原酸在治療類風濕關節炎中顯示出較好的的治療潛力。

綠原酸類化合物對多種病毒有較強的抑制和殺滅作用[9，37]。董俊興等[38]通過病毒、細胞和動物實驗發現二咖啡?？崴峒翱Х弱？崴嵫苌飳σ倚透窝撞《炯澳孓D錄病毒抗原的表達、DNA的復制有良好的抑制作用，從而可以治療乙型肝炎及逆轉錄病毒的相關疾病。甲型流感病毒也嚴重威脅著人類的健康，各種亞型的病毒更是嚴重制約了藥物的開發。Karar等[39]通過酶的抑制實驗證明：綠原酸及其衍生物能夠抑制神經酰胺酶的活性從而具有抗病毒活性。同時，Liu Zekun[40]利用計算機程序也計算出這些小分子與神經氨酸酶有較強的結合能力，有助于進一步設計和開發出治療H1N1及其他抗病毒的藥物。綠原酸和3，5-二咖啡酰奎尼酸也顯示出細胞水平的抗丙型肝炎病毒作用[19]。

綠原酸對植物病害也有抑制作用。玉米抗穗腐病是由禾谷鐮刀菌（Fusarium graminearum）和單端孢菌（Trichothecium spp）等多種病原菌侵染而引起的，Atanasova-Penichon等人[41]在為期2年的實地研究中發現，綠原酸含量高的品種中玉米抗穗腐病的發病率較低，這可能是因為綠原酸對單端孢菌的積累有抑制作用，以此達到抗病的效果。

5.3 綠原酸的保肝作用

內毒素是革蘭氏陰性細菌細胞壁中的一種成分，它可誘導代謝異常，如血脂異常、高脂血癥。Zhou Yan等[42]通過腹腔注射內毒素造成大鼠的脂代謝紊亂，而后每日灌胃給予綠原酸，一段時間后發現給予綠原酸的大鼠與損傷組大鼠相比內臟脂肪細胞的面積減少，肝損傷改善。這些結果表明綠原酸通過調節脂肪酸代謝酶有效地改善大鼠肝臟脂質紊亂，并刺激腺苷酸活化蛋白激酶的活化，調節肝脂肪酸水平。永久性膽管結扎也可致肝損傷，Wu Duohu等[43]通過肝指數、肝功能及病理學觀察，口服綠原酸治療3周明顯減弱肝腫脹和纖維化。血生化結果顯示綠原酸可降低谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶、總膽紅素、直接膽紅素和總膽汁酸。

5.4 綠原酸的其他生物活性

杜仲是中國著名滋補藥材，綠原酸是杜仲中的重要化合物，它具有改善認知能力的藥理作用。Wu Jianming等[44]第一次報道綠原酸抗抑郁的藥理作用，其過程是綠原酸穿過血-腦脊液屏障對神經元起到保護作用，同時還促進血清素釋放來提高體外胚胎大鼠中縫神經元細胞Ⅰ的表達，達到抗抑郁的效果。因此，該項研究證明杜仲可作為治療抑郁癥的天然藥物。綠原酸能夠維持血糖濃度，Peng Bingjie等[45]利用高脂飲食引起大鼠小腸葡萄糖代謝紊亂，破壞血糖平衡。通過在高脂飲食中添加綠原酸，利用實時定量聚合酶鏈反應分析葡萄糖轉運蛋白的胰高血糖素原mRNA在不同腸段 （十二指腸、空腸、回腸、結腸）的表達水平，由此得出，綠原酸可以通過調節腸道內葡萄糖轉運蛋白和胰高血糖素原的表達，來影響葡萄糖代謝，從而控制血糖和胰島素來維持血糖平衡。綠原酸是忍冬藤的主要成分，中藥用于治療類風濕關節炎（RA）。在日常生活中，酒精是最常見的濫用精神藥物之一，對中樞神經系統有不良影響，最不利的結果就是海馬和新皮質腦區的神經元丟失，這可能與細胞凋亡和壞死的氧化應激介導相關。最近的研究表明，許多植物的天然產物對神經細胞的損傷起著重要的保護作用。有報道稱，綠原酸對氧化應激有神經保護作用。PC12細胞與神經元相似，因此研究人員利用PC12細胞，研究了綠原酸對乙醇誘導的大鼠PC12細胞凋亡的影響，結果表明：綠原酸可以增加細胞的活力，促進細胞分化，防止乙醇誘導的細胞凋亡，其機制可能與GAP-43的表達增強和線粒體凋亡途徑的抑制有關[46]。

6 綠原酸的吸收與代謝

6.1 綠原酸的吸收

Azuma等[47]以248 mg/kg的綠原酸灌胃大鼠，結果只在血漿中檢測到少量咖啡酸和阿魏酸的結合物，并未檢測到原形藥物。以同樣劑量咖啡酸灌胃大鼠，結果在血漿中不僅可以檢測到原形藥物，還可以檢測到多種代謝產物。因此推測咖啡酸口服效果好，而綠原酸口服效果差，究其原因可能是綠原酸分子中有化學性質不穩定的酯鍵存在，綠原酸口服后僅有微量可被完整吸收（見圖4），絕大部分綠原酸在體內會發生酯鍵斷裂，水解釋放出咖啡酸[48-51]。而酯鍵斷裂后，綠原酸的一些生理活性消失，如綠原酸有抑制肝臟葡萄糖-6-磷酸酶作用，而綠原酸的水解產物咖啡酸和奎尼酸則無此作用。Khan等[52]為了提高綠原酸的口服生物利用度和藥效活性，開發了一種可口服的納米脂質載體（NLC），評估其體外釋放。Wang Lingna等[53]合成了化學性質相對穩定的酰胺鍵代替酯鍵的綠原酸類似物，該化合物不僅抗氧化性強于綠原酸，同時還具有抗HCV病毒活性，代謝穩定性也大幅增加。

圖4 綠原酸的吸收Fig.4 Absorption of chlorogenic acid

6.2 綠原酸的代謝

綠原酸的吸收主要在小腸和結腸，在微生物的作用下轉化成多種代謝產物。Tomas-Barberan等[54]將9個供試者的糞便樣品與綠原酸共孵育，利用四極桿串聯質譜檢測微生物轉化結果，結果顯示綠原酸可代謝為咖啡酸等幾個化合物。Goodwin[55]比較了大鼠腸道中的微生物對綠原酸代謝的影響，結果無菌大鼠給藥后，綠原酸以原型存在；而普通大鼠給藥后，很快能檢測到咖啡酸。體內外實驗表明腸道菌群是造成綠原酸水解的主要因素。

透過腸道屏障的綠原酸、咖啡酸和奎尼酸進一步在肝臟中代謝[56]，當研究人員把咖啡酸給予腸道中無菌的大鼠時，可在尿液中可檢測到咖啡酸和阿魏酸，因此證明，甲基化發生于肝臟。其原理是咖啡酸的羥基在兒茶酚鄰位甲基轉移酶的作用下，發生甲基化，轉化為阿魏酸和異阿魏酸；肝臟中也可發生氧化還原反應，阿魏酸的側鏈被氧化，生成香草酸；或者側鏈的不飽和鍵被還原，還原成二氫阿魏酸、二氫咖啡酸、二氫異阿魏酸；咖啡酸還可發生酯化反應，例如：咖啡酸與硫酸結合形成3-或4-O-硫酸酯；阿魏酸與硫酸結合形成阿魏酸-4-O-硫酸酯[57]；馬尿酸與甘氨酸結合形成馬尿酸甘氨酰酯[58]。

7 結語與展望

在衛生部《藥品標準》中收錄了170種中成藥，其中在清熱解毒、抗菌消炎的藥物中多以綠原酸為主要成分。綠原酸等多酚類物質也被稱為“第七類營養素”，因此被廣泛用于保健行業，添加了綠原酸的保健藥品具有清熱解毒、養顏潤膚等特點[59]。在食品行業中，綠原酸具有增香和護色作用，在食品和果品的保鮮中應用廣泛。綠原酸還能有效防止紫外線對人體皮膚產生的傷害作用，因此研究人員將綠原酸添加到化妝品中，研發出各種皮膚防曬劑和保護染發劑對頭發損傷的洗發水[60]。

我國擁有豐富的富含綠原酸的植物資源，如金銀花、杜仲、藍盆花等。目前，我國對于綠原酸開發利用，主要依靠天然植物資源，但是對于任何一種天然化合物來講均不利于其可持續發展。因此，提高綠原酸的生物利用度，擴展其開發利用途徑勢在必行。目前本實驗室針對提高綠原酸的生物利用度開展了一系列的實驗，目的是在保持原有生物活性的基礎上增加其穩定性，為新藥開發提供有效途徑。

[1]CLIFFORD M N.Chlorogenic acids and other cinnamates-nature，occurrence and dietary burden [J].Science of Food Agriculture，1999，79（3）：362-372.

[2]JOHNSTON K L，CLIFFORD M N，MORGAN L M.Coffee acutely modifies gastrointestinal hormone secretion and glucose tolerance in humans：glycemic effects of chlorogenic acid and caffeine[J].American Journal of Clinical Nutrition，2003，78（4）：728-733.

[3]MORTON L W，CACCETTAH R A，PUDDEY I B，et al.Chemistry and biological effects of dietary phenolic compounds：relevance to cardiovascular disease[J].Clinical and Experiment pharmacology Physiology，2000，27（3）：152-159.

[4]JASSIM S A A，NAJI M A.Novel antiviral agents：a medicinal plant perspective[J].Journal of Applied Microbiology，2003，95（3）：412-427.

[5]LIU Yunxi.European botanical medicine conference[J].Foreign Medicine Plant Medicine，1997，12（6）：257-260.（in Chinese）

[6]Chlorogenic Acid[DB/OL].[2011-02-22]http：//en.wikipedia.org/wiki/Chlorogenic acid.

[7]ROBIQUET.Ueber den kaffee[J].Annalen der Pharmacie，1837，23（1）：93-95.

[8]SHAMANTHAKA S M C，NARASINGA R M S.Binding of chlorogenic acid by the isolated polyphenol-free 11s protein of sunflower（helianthus annuus） seed[J].Agriculture Food and Chemistry，1990，38（12）：2103-2110.

[9]林啟壽.中草藥成分化學[M].北京：科學出版社，1977：146.

[10]周榮漢.中藥資源學[M].北京：中國醫藥科技出版社，1993：426-433，179，85.

[11]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：中國醫藥科技出版社，2010：205-206.

[12]GAO Jinming，ZHANG Anling，ZHAO Xiaoming，et al.Advances in the researches of distribution，extraction and bioactives of chlorogenic acid[J].Journal of Northwest Forestry University，1999，14（2）：73-82.（in Chinese）

[13]LI Dan，LIU Bo，SI Huiqing.Research on the performance of adsorption and desorption for chiorogenic acid with NKA-9 resins[J].Journal of Food Science and Biotechnology，2009，28（1）：136-139.（in Chinese）

[14]SUN L J，GUO Y R，FU C C，et al.Simultaneous separation and purification of total polyphenols，chlorogenic acid and phlorizin from thinned young apples[J].Food Chemistry，2013，136（2）：1022-1029.

[15]SALEH I A，VINATORU M，MASON T J，et al.A possible general mechanism for ultrasound-assisted extraction （UAE）suggested from the results of uae of chlorogenic acid from Cynara Scolymus L.（Artichoke） leaves[J].Ultrasonics Sonochemistry，2016，（31）：330-336.

[16]TIAN Long.Study of on the effective extracting chlorogenic acid from eucommia ulmoides by ultrahigh_pressure extraction[J].Journal of Food Science and Biotechnology，2008，27（6）：68-72.（in Chinese）

[17]HAO Y，GAO R X，LIU D C，et al.Selective extraction and determination of chlorogenic acid in fruit juices using hydrophilic magnetic imprinted nanoparticles[J].Food Chemistry，2016，200：215-222.

[18]LUO Siqi.The overview of the content determination of active components in Chinese herbal medicine[J].Chinese Herbal Medicine，1989，20（9）：19-26.（in Chinese）

[19]MA J N，BOLRAA S，JI M，et al.Quantification and antioxidant and anti-HCV activities of the constituents from the inflorescences of Scabiosa comosa and S.tschilliensis[J].Natural Product Research，2016，30：590-594.

[20]RIBEIRO C M，MIGUEL E M，SILVA J D，et al.Application of a nanostructured plat form and imprinted sol-gel film for determination of chlorogenic acid in food samples[J].Talanta，2016，156-157：119-125.

[21]ZHANG S H，HU X，SHI S Y，et al.Typical ultraviolet spectra in combination with diagnostic mass fragmentation analysis for the rapid and comprehensive profiling of chlorogenic acids in the buds of Lonicera Macranthoides[J].Analytical And Bioanalytical Chemistry，2016，408（13）：3659-3672.

[22]TOMAC I，SERUGA M.Electrochemical properties of chlorogenic acids and determination of their content in coffee using differential pulse voltammetry[J].International Journal Of Electrochemical Science，2016，11（4）：2854-2876.

[23]ROHLOFF J C，KENT K M，POSTICH M J，et al.Practical total synthesis of the anti-influenza drug GS-4104[J].Journal of Organic Chemistry，1998，63（13）：4545-4550.

[24]SEFKOW M.First efficient synthesis of chlorogenic acid[J].Eur J Org Chem 2001，1137-1141.

[25]SMARRITO C M，MUNARI C，ROBERT F，et al.A novel efficient and versatile route to the synthesis of 5-o-feruloylquinic acids[J].Organic&Biomolecular Chemistry，2008，6（6）：986-987.

[26]MA C M，KULLY M，KHAN J K，et al.Synthesis of chlorogenic acid derivatives with promising antifungal activity[J].Bioorganic&Medicinal Chemistry，2007，15（21）：6830-6833.

[27]MA C M，HATTORI M，DANESHTALAB M，et al.Chlorogenic acid derivatives with alkyl chains of different lengths and orientations：potent α-glucosidase inhibitors[J].Journal of Medicinal Chemistry，2008，51（19）：6188-6194.

[28]MA C M，KAWAHATA T，HATTORI M，et al.Synthesis，Anti-HIV and anti-oxidant activities of caffeoyl 5，6-anhydroquinic acid derivatives[J].Bioorganic&Medicinal Chemistry，2010，18（2）：863-869.

[29]MA C M，TAKASHI A，KOMIYAMA M，et al.Synthesis，anti-fungal and 1，3-β-d-glucan synthase inhibitory activities of caffeic and quinic acid derivatives[J].Bioorganic&Medicinal Chemistry，2010，18（2）：7009-7014.

[30]BAGDAS D，ETOZ B C，ZULFIYE G Z，et.al.In vivo systemic chlorogenic acid therapy under diabetic conditions：wound healing effects and cytotoxicity/genotoxicity profile[J].Food and Chemical Toxicology，2015，81：54-61.

[31]LI S Y，BIAN H T，LIU Z，et al.Chlorogenic acid protects MSCs against oxidative stress by altering FOXO family genes and activating intrinsic pathway[J].European Journal of Pharmacology，2012，674（2）：65-72.

[32]ZHOU Y，ZHOU L L，RUAN Z，et al.Chlorogenic acid ameliorates intestinal mitochondrial injury by increasing antioxidant effects and activity of respiratory complexes[J].Bioscience Biotechnology And Biochemistry，2016，80（5）：926-971.

[33]FERLEMI A V，MAKRI O E，MERMIGKI P G，et al.Quercetin glycosides and chlorogenic acid in highbush blueberry leaf decoction prevent cataractogenesis in vivo and in vitro：investigation of the effect on calpains，antioxidant and metal chelating properties[J].Experimental Eye Research，2016，145：258-268.

[34]SHIN H S，SATSU H，BAE M J，et al.Anti-Inflammatory effect of chlorogenic acid on the il-8 production in caco-2 cells and the dextran sulphate sodium-induced colitis symptoms in c57bl/6 mice[J].Food Chemistry，2015，168：167-175.

[35]FENG Y，YU Y H，WANG S T，et al.Chlorogenic acid protects d-galactose-induced liver and kidney injury via antioxidation and anti-inflammation effects in mice[J].Pharmaceutical Biology，2016，54（6）：1027-1034.

[36]LOU L X，ZHOU J W，LIU Y J，et al.Chlorogenic acid induces apoptosis to inhibit inflammatory proliferation of il-6-induced fibroblast-like synoviocytes through modulating the activation of jak/stat and nf-kappa b signaling pathways[J].Experimental and Therapeutic Medicine，2016，11（5）：2054-2060.

[37]柯銘清.中草藥有效成分理化與藥理特性[M].長沙：湖南科學技術出版社，1982：225.

[38]董俊興，湯仲明，米志寶，等.二咖啡酰奎尼酸在治療乙型肝炎及與逆轉錄病毒有關疾病中的用途及新咖啡酰奎尼酸衍生物：中國，CN 1087608 C[P].2002.

[39]KARAR M G E，MATEI M F，JAISWAL R，et al.Neuraminidase inhibition of dietary chlorogenic acids and derivatives-potential antivirals from dietary sources[J].Food&Function，2016，7（4）：2052-2059.

[40]LIU Z K，ZHAO J P，LI W C，et al.Computational screen and experimental validation of antiinfluenza effects of quercetin and chlorogenic acid from traditional chinese medicine[J].Science Report，2016，6：19095.

[41]ATANASOVA P V，PONS S，PINSON G L，et al.Chlorogenic acid and maize ear rot resistance：a dynamic study investigating fusarium graminearum development，deoxynivalenol production and phenolic acid accumulation[J].Molecular Plant-Microbe Interactions，2012，25（12）：1605-1616.

[42]ZHOU Y，RUAN Z，WEN Y M，et al.Chlorogenic acid from honeysuckle improves hepatic lipid dysregulation and modulates hepaticfattyacidcompositioninratswithchronicendotoxininfusion[J].Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition，2016，58（2）：146-155.

[43]WU D H，BAO C Y，LI L H.Chlorogenic acid protects against cholestatic liver injury in rats[J].Journal of Pharmacological，2015，129（3）：177-182.

[44]WU J M，CHEN H X，LI H，et al.Antidepressant potential of chlorogenic acid-enriched extract fromeucommia ulmoides oliver bark with neuron protection and promotion of serotonin release through enhancing synapsin i expression[J].Molecules，2016，21（3）：260-277.

[45]PENG B J，ZHU Q，ZHONG Y L，et al.Chlorogenic acid maintains glucose homeostasisi through modulating the expression of sglt-1，glut-2，and plg in different intestinal segments of sprague-dawley rats fed high-fat diet[J].Biomedical and Environmental Science，2015，28（12）：894-903.

[46]FANG S Q，WANG Y T，WEI J X，et al.Beneficial effects of chlorogenic acid on alcohol-induced damage in pc12 cells[J].Biomedicine&Pharmacotherapy，2016，79（4）：254-262.

[47]AZUMA K，IPPOUSHI K，NAKAYAMA M，et al.Absorption of chlorogenic acid and caffeic acid in rats after oral administration[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2000，48（11）：5496-5500.

[48]NARDINI M，CIRILLO E，NATELLA F，et al.Absorption of phenolic acids in humans after coffee consumption[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2002，50（20）：5735-5741.

[49]LAFAY S，GILIA，MANACH C，etal.Chlorogenic acid isabsorbed in itsintactform in the stomach ofrats[J].Journal of Nutritio n，2006，136（5）：1192-1197.

[50]SCHINDLER P W，BELOW P，HEMMERLE H，et al.Identification of two new inhibitors of hepatic glucose-6-phosphate translocase[J].Drug Development Research，1998，44（1）：34-40.

[51]WANG W，HE X L，MA C M.Metabolism schemes of chlorogenic，quinic and caffeic acid derivatives in rats deduced by molecular fragments detected with optimized UPLC-APCI-MS/MS conditions[J].International Journal of Mass Spectrometry，2013，337：34-42.

[52]KHAN S，BABOOTA S，ALI J，et al.Chlorogenic acid stabilized nanostructured lipid carriers （nlc） of atorvastatin：formulation，design and in vivo evaluation[J].Drug Developmen and Industrial Pharmacy，2016，42（2）：209-220.

[53]WANG L N，WANG W，HATTORI M，et al.Synthesis，anti-hcv，antioxidant and reduction of intracellular reactive oxygen species generation of a chlorogenic acid analogue with an amide bond replacing the ester bond[J].Molecules，2016，21：737.

[54]TOMAS B F，GARCIA V R，QUARTIERI A，et al.In vitro transformation of chlorogenic acid by human gut microbiota[J].Molecular Nutrition&Food Research，2014，58（5）：1122-1131.

[55]GOODWIN B L，RUTHVEN C R，SANDLER M.Gut flora and the origin of some urinary aromatic phenolic compounds[J].Biochemical Pharmacology，1994，47（12）：2294-2297.

[56]GAO Ru，LIN Yining，LIANG Ge，et al.Absorption and metabolism of chlorogenic Acid[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae，2012，18（10）：316-319.（in Chinese）

[57]STALMACH A，STEILING H，WILLIAMSON G，et al．Bioavailability of chlorogenic acids following acute ingestion of coffee by humans with an ileostomy[J].Archives of Biochemistry and Biophysics，2010，501（1）：98-105.

[58]GONTHIER M P，VERNY M A，BESSON C，et al.Chlorogenic acid bioavailability largely depends on its metabolism by the gut microflora in rats[J].Journal of Nutrition，2003，133（6）：1853-1859.

[59]LANXiaoyan，ZHANGXuejun，GONGGuizhen，etal.TheprogressofchlorogenicacidinEucommiaLeaf[J].Chinese Agricultural Science Bulletin，2009，25（21）：86-89.（in Chinese）

[60]CHEN Shaozhou，LV Feijie，TAI Jianxiang.The research progress and applied prospect of chlorogenic acid from sunflower meal[J].Food and Fermentation Industries，2002，28（11）：51-54.（in Chinese）