兩種檢測方法在檢測G6PD活性中的應用對比

吳 燕

廣東省河源市婦幼保健院，廣東河源 517000

兩種檢測方法在檢測G6PD活性中的應用對比

吳 燕

廣東省河源市婦幼保健院，廣東河源 517000

目的通過兩種方法對G6PD的活性進行檢測，通過對比該兩種檢測方法的異同性，總結其相關性。方法抽取我院2016年1～3月期間進行G6PD活性檢測的100例新生兒進行實驗對比研究，分別都用比值測定法和還原試驗檢測法測定G6PD的活性，分析檢測情況。結果還原試驗檢測法中，100例新生兒53.0%為陰性，47%為陽性。而比值檢測法中，有55.0%為陰性，45%為陽性，兩種檢測方法檢測結果比較差異無統計學意義（P＞0.05）。100例新生兒中，通過還原試驗檢測法與G6PD比值檢測法檢測結果不同的有2例，均為女性新生兒，該2例通過G6PD比值檢測法測定G6PD/6PGD比值處于正常范圍內，分別為1.15、1.19，而該2例經過還原試驗檢測法還原率均異常。結論高鐵白紅蛋白還原試驗檢測法與上生化機G6PD比值檢測法均存在一定優勢，但其二者也存在不足，所幸其不足可相互補充。因此，為了在臨床檢測中快速獲取結果，可將其進行結合共同檢測。

G6PD活性；比值測定法；高鐵血紅蛋白還原試驗；新生兒

R722.1

A

2095-0616（2018）01-149-03

Comparison of two detection methods in detection of G6PD activity

WU Yan
Maternal and Child Health Care Institute of Heyuan City,Guangdong Province,Heyuan 517000,China

ObjectiveTo detect the activity of G6PD by two methods,and to sum up its correlation by comparing the similarities and differences of the two methods.MethodsOne hundred newborns with G6PD activity were selected from January to March,2016.The activity of G6PD was detected by ratio test and reduction rate test,and the detection situation was analyzed.ResultsIn the reduction test,53.0% of 100 newborns were negative and 47% were positive.In the ratio test,55.0% were negative and 45% were positive.There was no significant difference between the results of the two detection methods (P＞0.05).Of the 100 newborns,two cases were found to be female newborns by the reduction test and the G6PD ratio test.In the 2 cases,the ratio of G6PD1/6PGD was measured in the normal range by G6PD ratio test,which was 1.15 and 1.19,respectively.The reduction rate of the 2 cases by the reduction test was all abnormal.ConclusionThere are some advantages between the high iron hemoglobin reduction test and the upper biochemical machine G6PD ratio test,but they also have shortcomings,but their shortcomings can complement each other.Therefore,in order to get the results quickly in the clinical test,it can be combined together to detect the results.

G6PD activity;Ratio determination method;High iron hemoglobin reduction test;Newborn

G6PD活性檢測是為了篩選出G6PD缺乏的新生兒，G6PD缺乏是一種常見的遺傳性酶缺乏病[1]，據統計數據記載，目前的世界人口中約有2億人檢測出G6PD缺乏。而我國是G6PD缺乏的高發區，其患病的概率為0.2% ～ 44.8%。根據地域分布研究發現，長江以南的海南、廣東、廣西、云南、貴州、四川等省發病率較高[2]。但G6PD缺乏是因G6PD的基因突變，使其酶活性降低，同時其紅細胞因不能抵抗外界的氧化損傷而破壞，引起了溶血性貧血[3]。目前，我院對G6PD活性檢測的方法有高鐵白紅蛋白還原試驗檢測法與上生化機G6PD比值檢測法，為了分析這兩種檢測法中的相關性，本文以2016年1～3月期間進行G6PD活性檢測的新生兒進行實驗對比研究，分析其檢測結果及其相關性[4-5]?，F作如下報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽取我院2016年1～3月期間進行G6PD活性檢測的100例新生兒進行實驗對比研究，其中男68例，女32例，且其均為一個月內出生的新生兒。日齡 8h～ 30d，平均（11.8±1.2）d。

1.2 方法

高鐵白紅蛋白還原試驗檢測法：a.抗凝全血混勻后，吸取全血細胞200uL加入到加有20μL1.25%亞硝酸鈉（北京化工廠北京試劑）-5%葡萄糖（廣東西隴化工廠）及0.004mol/L美蘭混合液（廣州化學試劑廠）（兩者等比例混合）試管中，充分混勻，加塞，置于37℃水浴箱3h；b.取出后搖勻，吸取此液100μL，加于0.02mol/L磷酸鹽緩沖液（天津市北聯精細化學品開發有限公司）10mL中，2min后于波長634nm處比色，測其吸光度S△；c.吸取未加上述試劑但同樣保溫的血液100μL，加于0.02mol/L磷酸鹽緩沖液10mL中，2min后按上法進行比色，測其吸光度為B，再于此液內加入1.25%亞硝酸鈉-5%葡萄糖液1滴，搖勻，5min后同樣方法測其吸光度為St[6]。

上生化機G6PD比值檢測法：抗凝全血混勻后，吸取全血細胞20μL加入到1mL樣品處理液中約1 ～ 2min后充分混勻上機測定，待測定時間不得超過25min[7]。

1.3 儀器及試劑

日立7180、723N可見分光光度計、廣州科方G6PD測定試劑盒（比值法）、0.004mol/L美蘭工作液、1.25%亞硝酸鈉-5%葡萄糖液、0.02mol/L磷酸鹽緩沖液、黃色ACD抗凝管[8]。

1.4 觀察指標

記錄受體G6PD活性檢測的精確度，以及兩種檢測方法的相關性。

1.5 統計學處理

采用統計學軟件SPSS19.0版對數據進行統計分析，計量資料采用（x±s）表示，采用t檢驗，計數資料采用百分數（%）表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種檢測方法檢測結果分析

還原試驗檢測法中，100例新生兒53.0%為陰性，47%為陽性。而比值檢測法中，有56.0%為陰性，47%為陽性，兩種檢測方法檢測結果比較差異無統計學意義（χ2=0.184，P＞ 0.05）。見表 1。

表1 兩種檢測方法檢測結果分析[n（%）]

2.2 兩種檢測方法不相符情況分析

100例新生兒中，通過還原試驗檢測法與G6PD比值檢測法檢測結果不同的有2例，均為女性新生兒，該2例通過G6PD比值檢測法測定G6PD/6PGD比值處于正常范圍內，分別為1.15、1.19，而該2例經過還原試驗檢測法還原率均異常。

3 討論

G6PD缺乏的臨床癥狀與普通溶血性貧血的臨床癥狀大致相同，該病在臨床表現的癥狀不同，女性雜合子患者處于不發病時期時，其無明顯自覺癥狀，但部分患者會出現慢性的溶血性貧血癥狀，如果在此期間有食用蠶豆、或服用、接觸某些藥物會誘發血紅蛋白尿、黃疸、貧血等急性溶血反應[9-10]。同時，因G6PD缺乏可誘發嚴重急性溶血性貧血，若得不到及時處理，會引起患者肝、腎、或心功能衰竭，嚴重時甚至會導致死亡[11]。例如，廣東興寧地區60年代時曾爆發G6PD缺乏癥，該病癥的流行是因其當地處于蠶豆收獲的季節，該誘因導致了許多G6PD缺乏患者死亡[12]。此外，G6PD缺乏還是新生兒病理性黃疸的主要誘因，據統計表明，患有G6PD缺乏癥的新生兒中，約有50%的患兒出現新生兒黃疸，其中約12%可發展為核黃疸，導致腦部損害，引起智力低下[13]。

還原試驗檢測法中，100例新生兒53.0%為陰性（還原率正常），47%為陽性（還原率為30%～70%）。而比值檢測法中，有55.0%為陰性（比值＞1.10），45%為陽性，兩種檢測方法檢測結果比較差異無統計學意義（P＞0.05）。說明以上兩種檢測方法在G6PD活性檢測中效能基本相同，均可作為臨床檢測G6PD活性的手段。通過對兩種檢測方法不相符情況分析，兩種檢測方法存在不符情況的受檢者均為女性新生兒，G6PD比值處在臨界范圍，分別1.15、1.19，出現這一結果可能與女性雜合子有關，也可能是試劑本身檢測時存在誤差所致。因此在新生兒G6PD活性檢測中，女性新生兒通過G6PD比值檢測法測定后比值在臨界范圍內，應進一步進行高鐵白紅蛋白還原試驗檢測法檢測，若還出現不相符情況，應對其進一步進行基因診斷，以確保檢測結果的準確性，避免出現漏診、誤診的檢測結果，從而有利于對G6PD缺失的新生兒作進一步防治護理[14-15]。同時，在G6PD缺乏癥高發的地區做好檢測篩查工作，對提高新生兒健康水平及治療效果具有重要的社會及經濟價值。因此，可將兩種檢測方法相結合應用，以防出現漏誤診情況。

綜上所述，比值法與還原試驗法相比，比值法在檢測G6PD缺乏癥的結果中，具有更高的準確率。同時，還可以縮短G6PD活性的檢測時間，具有更好的檢測價值，值得在G6PD活性臨床檢測中推廣。高鐵白紅蛋白還原試驗檢測法與上生化機G6PD比值檢測法均存在一定優勢，為了在臨床檢測中快速獲取結果，可將其進行結合共同檢測。兩種在檢測G6PD活性中的檢測方法的結合成為臨床G6PD活性檢測的發展趨勢。

[1] 林彩娟，耿國興，謝意，等.比值法和基因檢測G6PD酶活性的對比分析[J].中國優生與遺傳雜志，2014，42（1）：23-24.

[2] 侯家興，黃志浩，謝意文.G6PD缺乏癥基因型檢測診斷與酶學診斷在應用中的比較分析[J].臨床和實驗醫學雜志，2017，16（14）：1410.

[3] 方可欣，尚世強，楊建濱.干濾紙血片制備環境的理化因素對實驗結果的影響[J].臨床檢驗雜志，2017，35（6）：429.

[4] 朱冬林，朱遠航，陳亞瓊.2種檢測女性雜合子G6PD活性的方法比較和探討[J].中國衛生檢驗雜志，2016，26（3）：386.

[5] 胡耀宗，王偉佳，溫冬梅，等.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏對3種HbA1c檢測系統結果的干擾評價[J].臨床檢驗雜志，2017，35（2）：98.

[6] 王朝，趙玉平.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的發病機制及診療現狀[J].國際輸血及血液學雜志，2017，40（2）：35-36

[7] 馬詩玥，鈕晉紅.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏對心血管疾病影響的研究進展[J].醫學綜述，2017，23（8）：1500.

[8] 李維，張靜，劉麗益，等.熒光定量PCR基因檢測對G6PD缺乏癥的診斷價值探討[J].中國優生與遺傳雜志，2017，25（4）：19.

[9] Ley Benedikt，Alam， Mohammad Shafiul，O’Donnell James J.A Comparison of Three QuantitativeMethodsto Estimate G6PD Activity in the Chittagong Hill Tracts，Bangladesh[J].Plos One，2017，22（1）：1-13.

[10] 樊祖茜，孫雷.突變特異性擴增系統（ARMS）結合熔解曲線（MC）技術快速檢測G6PD基因的常見點突變位點[J].中國優生與遺傳雜志，2017，25（5）：17.

[11] 宋錦，李莉，尚魯俊，等.新疾病模式生物斑馬魚G6PD酶活性的動態研究[J].貴州醫科大學學報，2016，41（7）：750.

[12] 周劍輝，周文英，徐倩，等.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶測定試劑盒（熒光比值法）的研制[J].診斷學理論與實踐，2016，15（6）：623.

[13] 林芬，楊輝，楊立業，等.我國葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的分布特征和基因突變[J].分子診斷與治療雜志，2016，8（2）：73.

[14] 唐娟，譚毅.葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥檢測方法的研究進展[J].中國臨床新醫學，2015，8（1）：92.

[15] 黃偉.臍血G6PD活性檢測對新生兒黃疸早期干預的價值 [J].中外醫學研究，2016， 14（1）：61-62.

2017-11-13）