血清骨橋蛋白水平在急性腦出血患者診斷及預后評價中的價值

向紹通,肖 豪,陳安妮

(廣東省人民醫院神經內科/廣東省醫學科學院/廣東省老年醫學研究所/廣東省神經科學研究所,廣州 510080)

血清骨橋蛋白水平在急性腦出血患者診斷及預后評價中的價值

向紹通,肖 豪,陳安妮

(廣東省人民醫院神經內科/廣東省醫學科學院/廣東省老年醫學研究所/廣東省神經科學研究所,廣州 510080)

目的通過分析血清骨橋蛋白(OPN)水平在急性腦出血患者的變化及對預后的影響，探討OPN在急性腦出血的臨床價值。方法選取2014 年1月至2016年12月就診于該院的急性腦出血患者63例作為急性腦出血組，來該院健康體檢者60例作為對照組。收集入組者的相關臨床資料，包含吸煙史、血脂、糖尿病、血壓、體溫、白細胞數、纖維蛋白原等，入院24 h內對腦出血組患者完成腦出血評分，并評定組內患者神經功能缺損嚴重程度，根據入院時CT影像計算出血量。利用改良Rankin量表(mRS)評分評估腦出血3個月后的預后情況。結果急性腦出血組血清骨橋蛋白[(7.81±4.97)ng/mL]水平明顯高于對照組[(5.41±3.25)ng/mL]水平(P=0.008)。 急性腦出血組中預后良好(mRS評分小于4分)37例(58.73%)，預后不良(mRS評分大于或等于4分)26例(41.27%)。預后不良組其白細胞數量、出血體積、腦出血評分、腦出血破入腦室比例及OPN水平均明顯高于預后良好組(均P<0.05)。通過繪制受試者工作曲線(ROC)，得到當OPN的截斷點為7.38 ng/mL時，曲線下面積為0.652，敏感度為0.691，特異度為0.627。進行多因素Logistic回歸分析顯示，血清OPN水平大于7.38 ng/mL(OR=3.916,95%CI:1.023～15.104，P=0.031)及腦出血破入腦室(OR=5.635,95%CI:1.016～26.305，P=0.030)是腦出血預后不良的獨立危險因素。結論OPN水平升高，是急性腦出血患者預后不良的獨立危險因素，可作為評價腦出血患者預后的參考生物學指標。

骨橋蛋白質；腦出血；mRS評分；預后

腦卒中發病人數逐年增高，并逐漸超過心血管疾病，腦血管疾病現已經成為威脅人類健康的首要疾病，給日益老齡化的社會帶來沉重負擔[1]。腦卒中即腦血管意外，其包括缺血性腦卒中及出血性腦卒中，與缺血性腦卒中相比，出血性腦卒中的降壓治療更為復雜，并且出血性腦卒中具有更高的病死率[2]。骨橋蛋白(osteopontin,OPN)是一種帶負電的非膠原性骨基質糖蛋白，參與骨的代謝，其在骨基質的礦化和吸收過程中有重要作用[3]。近年來研究發現，OPN作為一種多功能蛋白，在心血管尤其是血管重塑過程中起到重要調節作用，其還參與了腫瘤惡化、骨轉換、抑制結石形成、傷口愈合、免疫反應、炎性反應等病理、生理過程[4]。OPN屬于分泌型細胞外基質蛋白，具有軟組織礦化抑制作用，能夠阻止血管的異位鈣化[5]。雖然已有上述研究，但OPN與急性腦出血的關系及其在急性腦出血中的作用研究很少。本研究通過分析OPN水平在急性腦出血患者的變化及對預后的影響，探討OPN在急性腦出血中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2014年1月至2016年12月就診于本院神經內科的急性腦出血患者63例作為急性腦出血組，其中男38例，女25例，平均年齡(70.74±11.82)歲。納入標準：(1)經顱腦CT檢查診斷的患者；(2)每個顱腦CT均經2位資深影像科醫師完成診斷且無分歧；(3)年齡50～85歲；(4)首次發病并在24 h內入院；(5)簽署知情同意書。排除標準：(1)臨床數據不完整的患者；(2)繼發性腦出血，如外傷、腫瘤等引起的腦內出血；(3)使用抗血小板或抗凝藥物；(4)蛛網膜下腔出血；(5)既往患有腦器質性疾病、肝腎疾病、心臟病、血液系統疾病、自身免疫性疾病、惡性腫瘤。選取2014 年1月 至 2016年 12 月來本院體檢健康者60例作為對照組，其中男37例，女23例，平均年齡(68.83±10.34)歲。對照組均簽署知情同意書，未使用抗血小板或抗凝藥物，且無腦血管疾病、腦器質性疾病、肝腎疾病、心臟病、血液系統疾病、自身免疫性疾病、惡性腫瘤等。急性腦出血組和對照組的性別、年齡差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1臨床資料收集 收集入組者的相關臨床資料，包含吸煙史、血脂、糖尿病、血壓、體溫、白細胞數、纖維蛋白原等，并進行進一步診斷學檢查，如心電圖、血生化、凝血指標、胸片等。入院24 h內對腦出血組患者完成腦出血評分，并評定組內患者神經功能缺損嚴重程度。依照多田公式根據入院時CT影像計算出血量[出血量(mL)=1/6×π×長(cm)×寬(cm)×高(cm)]。利用改良Rankin量表(mRS)評分評估腦出血3個月后的預后情況，把mRS評分大于或等于4分定義預后不良，把住院期間死亡及3個月后死亡患者也歸為預后不良。

1.2.2OPN水平檢測 入院24 h內對所有入組者完成肘部靜脈血的采集，并把血液樣本置于4 ℃的離心機以3 000 r/min離心20 min,收集血清并編碼后置于-80 ℃恒溫保存，以備檢測OPN水平。OPN水平檢測采用ELISA法，按照人OPN蛋白試劑盒(北京百奧萊博科技有限公司)說明書進行操作。

2 結 果

2.1對照組和急性腦出血組臨床資料和實驗室檢查結果情況 經比較兩組間高血壓病、糖尿病的比例差異有統計學意義(均P<0.05)。腦出血組血清OPN水平明顯高于對照組(P=0.008)，見表1。

2.2不同預后的急性腦出血患者臨床資料及實驗室檢查結果情況 急性腦出血組中預后良好(mRS評分小于4分)37例(58.73%)，預后不良(mRS評分大于或等于4分)26例(41.27%)。預后不良組白細胞數、腦出血體積、腦出血評分、腦出血破入腦室比例及OPN水平均明顯高于預后良好組(均P<0.05)，見表2。

2.3影響急性腦出血預后相關因素的分析 通過繪制ROC，得到OPN的截斷點為7.38 ng/mL時，曲線下面積為0.652，敏感度為0.691，特異度為0.627。多因素Logistic回歸分析顯示，血清OPN>7.38 ng/mL(OR=3.916,95%CI:1.023～15.104，P=0.031)及腦出血破入腦室(OR=5.635,95%CI:1.016～26.305，P=0.030)是腦出血預后不良的獨立危險因素，見表3。

表1 急性腦出血組與對照組臨床資料和實驗室檢查結果情況

表2 不同預后的急性腦出血患者臨床資料及實驗室檢查結果情況

續表2 不同預后的急性腦出血患者臨床資料及實驗室檢查結果情況

表3 影響急性腦出血預后相關因素Logistic回歸分析

3 討 論

關于血清OPN水平對腦出血預后影響的研究目前國內外鮮有報道。本研究通過檢測63例急性腦出血患者及60例健康對照者的血清OPN水平，發現腦出血組血清OPN水平較對照組升高明顯,但血清OPN水平與腦出血評分、腦出血體積等危險因素無明顯的相關性。預后不良組白細胞數、腦出血體積、腦出血評分、腦出血破入腦室比例及OPN水平也較預后良好組明顯升高。Logistic回歸分析結果示，血清OPN蛋白大于7.38 ng/mL屬于預后不良的獨立危險因素。

OPN在機體中有細胞信號分子的作用，其主要由兩種機制來完成：(1)通過細胞表面黏附性糖蛋白CD44，以非RGD依賴方式結合；(2)通過分子內RGD與整合蛋白家族分子結合，這兩種作用機制介導細胞的黏附、遷移和增殖均通過激活細胞內的特異性信號傳導系統[6]。OPN是分泌型細胞外基質中一種重要的功能性蛋白,其能夠介導骨組織細胞與骨基質的連接，并且參與骨基質礦化及重吸收的過程[7]。OPN可以阻止血管的異位鈣化，其在動脈粥樣硬化、動脈鈣化及血管成形術后再狹窄發生過程中起到重要作用[8]。OPN也是參與組織重構、炎癥的重要因子，在血管生成內皮細胞、巨噬細胞和脈管斑塊中平滑肌細胞的表達。有研究發現OPN在大腦局部缺血后可以調節神經母細胞遷移，且能夠促進神經的再生。趙佳佳等[9]通過動物實驗研究發現OPN可通過減少神經細胞死亡提高神經行為功能、減輕腦水腫，從而降低腦出血的腦損傷。李欣遙等[10]對腦出血患者的臨床研究發現，腦出血患者血清OPN水平表達增加，OPN可增強血-腦屏障的穩定性，OPN另一方面可減輕損傷部位神經炎癥及細胞死亡，發揮其神經保護功能。

腦出血后，血清OPN水平升高明顯并產生保護作用，機制可能是腦出血后炎性介質激活，血中OPN表達上調，阻斷了JAK/STAT細胞信號傳導通路，抑制誘導型基質金屬蛋白酶-9及一氧化氮合酶的表達，從而保護內皮及上皮細胞膜處的緊密連接蛋白，發揮抗炎作用[11]。另外，腦出血后巨噬細胞、小膠質細胞激活，OPN表達增高，OPN可通過誘導神經母細胞增殖、遷移等方式，促進神經再生，利于腦功能的恢復[12]。

Faria等[13]通過制作急性腦出血模型，發現OPN可與整合素β1結合，并通過誘導神經母細胞向受損區域遷移，而促進神經再生，這表明OPN在神經發生及組織修復方面有重要的協調功能，提示OPN可能與腦出血預后相關。Bonestroo等[14]發現重組OPN可以減輕小鼠出血后早期腦損傷。孔令波等[15]也發現，OPN通過抑制誘導性-氧化氮合酶(iNOS)合成可以增強細胞對NO破壞的抵抗力。但本研究發現血清OPN水平升高與腦出血不良預后有關，這看似并不支持OPN具有神經保護功能。然而本研究并不是探究因果關系，也許結果可能是與OPN神經保護作用無效有關。OPN作為一種多功能蛋白，可能在協調積極及消極影響中發揮著重要作用。許多基質金屬蛋白酶-s可以切割OPN，這可能與破壞了其中某些結合域，從而限制了OPN的一些有利影響[16]。同樣引起相反的細胞反應，可能與被凝血酶切割的OPN暴露了潛在的結合位點相關。有研究報道，在缺血性腦卒中模型中，經凝血酶切割的OPN與完整的OPN比較，有更好地保護神經作用[17]。所以，凝血酶和基質金屬蛋白酶-9將OPN切割成不同的片段產生的影響，取決于這些片段的活性及比例。人們曾認為OPN是冠狀動脈粥樣硬化性心臟病患者的預測指標，但在后來研究中發現，OPN是在接受過冠脈介入手術患者中再次發生心血管事件的獨立預測因素。

綜上所述，OPN水平升高，是急性腦出血患者預后不良的獨立危險因素，OPN水平是評價腦出血患者預后的重要參考生物學指標。本研究由于樣本量有限，觀察檢測時間有限，以及其他不可控因素的影響，需要在以后研究中進一步完善。

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向紹通(1980-),主治醫師，碩士，主要從事神經系統變性疾病及腦血管病研究。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.34.029

R816.1

B

1671-8348(2017)34-4838-04

2017-08-11

2017-09-12)