單核細胞趨化蛋白-1-2518G/A位點基因多態性與糖尿病腎病易感性的Meta分析

張雄燕，黃一鑫，程 鵬

(1.浙江省臺州市腫瘤醫院內分泌科 317500； 2.浙江省臺州市中心醫院內分泌科 317700)

·循證醫學·

單核細胞趨化蛋白-1-2518G/A位點基因多態性與糖尿病腎病易感性的Meta分析

張雄燕1，黃一鑫2，程 鵬1

(1.浙江省臺州市腫瘤醫院內分泌科 317500； 2.浙江省臺州市中心醫院內分泌科 317700)

目的評估單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)-2518G/A基因多態性與糖尿病腎病(DN)發病風險的關系。方法系統檢索PubMed、Web of Science、EMbase、Cochrane Library、中國知網(CNKI)、萬方和維普數據庫中截至2016年10月收錄的所有有關MCP-1 -2518G/A基因多態性與DN發病風險的文獻。提取相關數據，應用STATA11.0統計軟件計算合成數據的比值比(OR)和95%可信區間(CI)，同時評估研究的異質性、發表偏倚。結果共納入的9項研究涉及2 767例獨立樣本，其中病例組為1 096例，對照組為1 671例。對于總體人群，在4個基因模型中均未發現MCP-1-2518G/A多態性與DN發病風險有關(顯性模型：OR=1.01,95%CI:0.67～1.54；隱性模型：OR=0.93,95%CI:0.60～1.44；純合子模型：OR=0.93,95%CI:0.70～1.23；雜合子模型:OR=0.89,95%CI:0.61～1.31)。亞組分析結果顯示，在印度人群中，MCP-1-2518G/A基因多態性會顯著增加DN的發病風險(顯性模型：OR=1.56,95%CI:1.19～2.06)，但在中國人、土耳其人及韓國人中均未發現MCP-1-2518G/A基因多態性與DN的發病風險有關。結論總體人群中，MCP-1-2518G/A位點基因多態性與DN發病風險無關，但MCP-1-2518G/A位點多態性會增加印度人群DN發病風險，而不增加中國人群、韓國人群、土耳其人群中DN的發病風險。

單核細胞趨化蛋白-1；MCP-1-2518G/A；基因；多態現象,遺傳；糖尿病腎病；Meta分析

糖尿病是目前我國主要的非感染性疾病之一，據統計，21世紀前10年我國成年人糖尿病患病率約為6.19%，僅次于心血管疾病和腫瘤，居于第3位[1]。微血管病變是糖尿病較為特異的病變之一，病理學上主要表現在視網膜、腎、心肌、神經組織及足趾的損害。其中糖尿病患者合并腎病的概率約為39.7%，糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)也被認為是造成慢性腎衰竭的常見原因之一[2]。目前認為DN與糖代謝紊亂、血流動力學異常、氧化應激、免疫異常、炎性反應激活及基因遺傳等多種因素有關，其中炎性反應是DN發病過程中的一個重要環節[3]。

單核細胞趨化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1) 是趨化因子家族的重要成員之一，它可以激活單核細胞和巨噬細胞，并促使單核細胞或巨噬細胞向損傷的組織聚集，從而參與調節炎性反應的過程[4]。最近研究證實，DN患者外周血中MCP-1水平明顯升高，提示MCP-1是DN發病的重要因素之一[5]。MCP-1-2518G/A基因多態性位點位于該基因5′端調控區，研究證實這一位點突變可以增加炎性反應刺激后MCP-1的表達水平。因此有學者推測MCP-1-2518G/A基因多態性有可能會增加DN發病風險[6]。

然而，目前關于MCP-1-2518G/A基因多態性與DN發病風險的研究結論不一，存在較大的爭議。本研究擬通過收集已發表的病例對照研究數據，通過Meta分析的方法評估MCP-1-2518G/A因多態性與DN發病風險。

1 資料與方法

1.1文獻檢索策略 計算機檢索PubMed、Web of Science、EMbase、Cochrane Library、中國知網(CNKI)、萬方和維普數據庫中截至2016年10月所收錄的所有文獻。檢索的英文關鍵詞包括：“diabetic nephropathy”“genetic polymorphism”“genetic variants”“monocyte chemotactic protein 1”“MCP-1”“monoctye chemotactic and activating factor”。檢索的中文關鍵詞包括：“MCP1-2518A>G”“單核細胞趨化蛋白-1”“單核細胞趨化和激活因子”“糖尿病腎病”“基因多態性”“基因突變”。同時輔助以手工檢索。兩個研究者通過閱讀題目、摘要，必要時閱讀文獻全文后，嚴格依據所規定的文獻納入和排除標準對文獻進行獨立的評價，如兩人意見不一致時，所有研究者共同參與評估是否納入該篇文獻。

1.2文獻納入和排除標準 納入標準：(1)是評估MCP-1基因多態性與DN發病風險之間關系的研究；(2)病例對照或隊列研究；(3)提供有病例組和對照組基因型的分布頻數或從文獻中可以計算出基因型的分布頻數。排除標準：(1)重復報道的研究；(2)細胞和動物的研究；(3)缺少對照組的研究；(4)文獻類型為綜述、病例報告及Meta分析的研究。

1.3資料提取 兩個研究人員通過閱讀文獻全文后將每一篇文獻的作者信息、出版年、研究人群的種族、國家，以及病例組和對照組的樣本數、基因型數目依次填寫到提前制訂好的標準表格中。如兩人意見不一致時，第3名研究者參與確定所提取資料的準確性。

1.4納入文獻質量評價 所納入研究的文獻依據文獻質量評價量表(NOS)標準進行評分，NOS評分大于等于7分認定為高質量的研究。具體評分標準參考文獻[7]。

1.5統計學處理 所有統計學分析均采用STATA11.0軟件，采用χ2擬合優度檢驗檢查每個研究對照組基因型的分布情況是否符合哈迪-溫伯格遺傳平衡(Hardy-Weinberg equilibrium，HWE)。應用比值比(OR)及95%CI來評估在顯性模型(GG+AGvs.AA)、隱性模型(GGvs.AA+AG)、純合子模型(GGvs.AA)和雜合子模型(GGvs.AG)等4個不同基因遺傳模型中MCP1-2518A>G多態性與DN發病風險關系。應Cochran′sQ檢驗評估各研究之間的異質性，當P<0.10或I2>50% 時認為具有異質性，應用隨機效應模型計算OR及95%CI；反之則采取固定效應模型計算OR及95%CI。應用敏感性分析的方法評估所合成結果的穩定性。應用Begg′s檢驗所納入的文獻是否存在有發表偏倚，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1文獻檢索結果及最終納入研究的基本情況 如圖1所示，通過系統檢索共獲得76篇文獻，通過閱讀題目和摘要排除51篇文獻(包括30篇非DN研究，11篇重復檢索文獻，7篇綜述類文章，3篇Meta分析)，所剩余25篇文章通過進一步閱讀全文后再次排除不相關文獻16篇(10篇實驗動物，細胞研究和6篇非MCP-1-2518G/A位點的研究)，最終納入密切相關的9篇文獻。其中包括7篇亞洲人群的研究(2篇韓國[8-9]，3篇中國[10-12]，2篇印度[13-14])及2篇歐洲人群的研究(均為土耳其)[15-16]。納入的9項研究共涉及2 767例獨立樣本，其中病例組為1 096例，對照組為1 671例。所有對照組人群均符合H-W遺傳平衡，所有納入研究的文獻NOS評分均大于等于7分，見表1。

2.2Meta分析結果 總體人群數據匯總后，在4個基因模型中均未發現MCP-1-2518G/A多態性與DN發病風險有關(顯性模型：OR=1.01,95%CI:0.67～1.54；隱性模型：OR=0.93,95%CI:0.60～1.44； 純合子模型：OR=0.93,95%CI：0.70～1.23；雜合子模型：OR=0.89,95%CI：0.61～1.31)。同時，匯總的數據結果呈現出較大的異質性。本研究進一步應用亞組分析的方法來探索異質性的來源。如圖2所示，亞組分析結果發現，當按國家進行亞組分析后，各個不同亞組的異質性顯著下降，在印度人的顯性模型研究中，MCP-1-2518G/A多態性會顯著增加DN的發病風險(顯性模型：OR=1.56,95%CI：1.19～2.06)，但在中國人、土耳其人及韓國人的研究中均未發現MCP-1-2518G/A多態性與DN的發病風險有關，見表2。

圖1 文獻篩選過程

納入文獻發表年限種族國家病例組(n)AAAGGG對照組(n)AAAGGGH-W平衡NOS評分(分)Joo等[8]2007亞洲人韓國267365237868是7Jeon等[9]2013亞洲人韓國28163*50349*是8王蕓等[10]2013亞洲人中國103121555835是7唐煥文等[11]2009亞洲人中國42391874023是7程潔等[12]2007亞洲人中國244426558746是7Raina等[13]2015亞洲人印度597214113848是7Ahluwalia等[14]2009亞洲人印度94130161229736是8Karadeniz等[15]2010歐洲人土耳其2419026170是8Bagci等[16]2015歐洲人土耳其262936711017是8

*：AG+GG的總數目

表2 各種遺傳模型的Meta分析結果

-:此項無數據

圖2 MCP-1-2518G/A多態性與DN的發病風險在

縱坐標1～9分別代表納入的文獻8～16

圖3敏感分析圖

圖4 Begg′s檢驗發表偏倚漏斗圖

2.3敏感性分析及發表偏倚結果 如圖3所示，將9項研究逐一排除后對于其他剩余的8項研究的數據Meta結果并沒有導致顯著的改變，表明該Meta分析的結果是穩定的。如圖4所示，Begg′s檢驗未發現本研究存在有發表偏倚(Begg′s test:P=0.675)。

3 討 論

盡管DN的發病機制是多因素的，但是炎性反應一直被認為是DN發病的重要環節。目前認為糖尿病導致的糖代謝紊亂可以導致腎臟局部炎性反應的發生，而這些炎性反應最終將導致腎臟的纖維化和結構重塑[17]。近來的動物研究發現早期炎癥階段的標志因子MCP-1參與了DN的發病過程[18]，MCP-1也被認為是預測DN發病的重要生物學標志[19]。-2518G/A位點是MCP-1基因研究得最為深入的一個突變位點，該位點突變可以增加MCP-1基因產物的表達量。目前發現MCP-1-2518G/A位點多態性與糖尿病[20]、惡性腫瘤[21]、冠心病[22]的發生密切相關。

最近關于MCP-1-2518G/A位點多態性與DN的研究屢有報道，但是結果不一致，存在較大的爭議。本次Meta分析的結果顯示，無論是對于總體人群而言，MCP-1-2518G/A位點多態性與DN發病風險并無關系。但是，本研究這一匯總結果存在有明顯的異質性。通過進一步的亞組分析發現異質性可能來自于不同國家、種族，這可能是由于MCP-1基因型的分布頻率在不同人群分布差異較大導致的[12]。本文對于不同國家人群的Meta結果發現，在印度人群中，MCP-1-2518G/A位點多態性增加DN發病風險，這與之前2篇印度人的研究[13-14]是一致的。對于中國人群，本文并未發現MCP-1-2518G/A位點多態性會增加DN發病風險，這與的程潔等[12]的研究一致。對于韓國人群和土耳其人群Meta的結果跟中國人群相似，也未發現該基因多態性與DN發病存在聯系。

本研究也存在一些不足之處：(1)本研究總共只納入了2 767例樣本，總體樣本量相對較小，研究結論論證的強度不夠強，尚需要多中心、大樣本的病例對照研究來驗證。(2)本文分析所納入的研究大部分是在亞洲人群中進行的，在歐洲人群的研究較少并且缺少非洲人群的研究，因此本結論尚需在更多的歐洲人群和非洲人群中驗證。(3)影響DN發展的因素還包括年齡、高血壓等因素，本研究所計算的OR值沒有經過年齡、高血壓等因素的調整，所以結論的可靠性要進一步論證。

綜上所述，在總體人群中，MCP-1-2518G/A位點多態性與DN發病風險無關，但MCP-1-2518G/A位點多態性會增加印度人群DN發病風險，而在中國人群、韓國人群、土耳其人群中并未發現其會增加DN的發病風險，本研究的結論有待多中心、大樣本的病例對照研究來驗證。

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MetaanalysisonMCP-1-2518G/Agenepolymorphismandsusceptibilityofdiabeticnephropathy

ZhangXiongyan1,HuangYixin2,ChengPeng1

(1.Departmentofendocrinology,TaizhouMunicipalTumorHospital,Taizhou,Zhejiang317500,China;2.DepartmentofEndocrinology,TaizhouMunicipalCentralHospital,Taizhou,Zhejiang317700,China)

ObjectiveTo evaluate the relation between MCP-1-2518G/A gene polymorphism and the onset risk of diabetic nephropathy(DN) by the data of collected and publishedcase control studies and using the meta analysis method.MethodsAll literatures on moncyte chemoattractant protein-1(MCP-1)-2518G/A gene polymorphism and the onset risk of DN included in the databases of PubMed,Web of Science,EMbase,Cochrane Library,CNKI,Wanfang and VIP until October 2016 were systametically retrieved.Then the related data were extracted.The Stata11.0 statistical software was used to calculate the odds ratio(OR) of synthetic data and 95% confidence interval (CI),meanwhile the heterogeneity and publication bias of the studies were evaluated.ResultsA total of 9 studies were included involving 2767 independent samples,the number of cases was 1096,the control number was 1671.For the general population,the relationship between MCP-1 gene -2518G/A polymorphism and the onset risk of DN was not found in 4 gene models (dominant model:OR=1.01,95%CI:0.67-1.54;recessive model:OR=0.93,95%CI:0.60-1.44;homozygous model:OR=0.93,95%CI:0.70-1.23;heterozygous model:OR=0.89,95%CI:0.61-1.31).The subgroup analysis results showed that in India population,MCP-1-2518G/A gene polymorphism might significantly increase the onset risk of DN (dominant model:OR=1.56,95%CI:1.19-2.06),but in Chinese,Turks or South Koreans,the MCP-1-2518G/A gene polymorphism had no relation with the onset risk of DN.ConclusionIn the general population,MCP-1-2518G/A gene polymorphism has no relation with the onset risk of DN.But the MCP-1 gene -2518G/A polymorphism can increase the onset risk of DN in India population,while does not increase the onset risk of DN in Chinese population,Korean population and Turkey population.

] monocyte chemotaxis protein-1;MCP-1-2518G/A;gene;polymorphism,genetic;diabetic nephropathy;Meta analysis

張雄燕(1980-)，主治醫師，本科，主要從事內分泌學研究。

2016年度重慶市出版專項資金資助項目

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.36.032

R587.2;R692.9

A

1671-8348(2017)36-5137-04

2017-07-26

2017-09-04)