腎綜合征出血熱患者血清白細胞介素-8、L-選擇素水平的變化及意義

韋志平, 韓秋玉, 孫志堅, 馬志俊, 韓亞萍

(1. 揚州大學醫學院附屬南京市高淳人民醫院, 江蘇 高淳, 211300; 2. 江蘇省人民醫院, 江蘇 南京, 210029; 3. 江蘇省丹陽市人民醫院, 江蘇 丹陽, 212300)

腎綜合征出血熱患者血清白細胞介素-8、L-選擇素水平的變化及意義

韋志平1, 韓秋玉1, 孫志堅2, 馬志俊3, 韓亞萍2

(1. 揚州大學醫學院附屬南京市高淳人民醫院, 江蘇 高淳, 211300; 2. 江蘇省人民醫院, 江蘇 南京, 210029; 3. 江蘇省丹陽市人民醫院, 江蘇 丹陽, 212300)

腎綜合征出血熱; 白細胞介素-8; L-選擇素

腎綜合征出血熱(HFRS)是由漢坦病毒引起的自然疫源性疾病，以發熱、出血、腎臟損害為主要表現，其基本病理變化是廣泛的毛細血管損傷和炎癥反應[1-2]。本研究探討血清白細胞介素-8(IL-8)和L-選擇素(L-sel)的變化，評價其在HFRS發病中的作用，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2007年1月—2008年3月收治的HFRS患者共19例，其中男13例，女6例，年齡27～60歲，平均47歲，入院時間平均為(4.0±1.4) d, 皆有典型的臨床表現，經檢測血清HFRS特異性IgM陽性而確診。按1997年衛生部頒布的流行性出血熱診斷標準分型，其中輕型2例，中型8例，重型8例，危重型1例。為便于比較，將輕型與中型合并為輕癥組，重型與危重型合并為重癥組。因低血壓期持續短暫，故與少尿期合并統計; 另取15名健康成人作為對照組。

1.2 研究方法

所有患者均以液體療法為主，未使用免疫調節劑。按病期采血，分離血清后置-80 ℃保存。IL-8采用雙抗體夾心 ABC-ELISA方法檢測，試劑盒購自上海森雄科技實業有限公司，先將抗人IL-8單抗包被于酶標板上，然后加樣品，使IL-8與單抗結合，加入生物素化的抗人IL-8抗體，形成免疫復合物連接在板上，再加辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加酶底物OPD顯色，用分光光度計在492 nm處測OD值, IL-8濃度與OD值呈正比，通過繪制的標準曲線求出標本中IL-8濃度，正常值為(25.8±16.7) ng/L(n=15)。L-選擇素亦用ELISA方法檢測，試劑盒購自奧地利Bender公司，步驟大體同上，正常值為(1 090.0±138.0) ng/L(n=20)。外周血嗜中性粒細胞(PMN)計數采用血細胞自動分析儀檢測。采用Microsoft Excel 2000軟件進行數據處理，以平均數±標準差表示各樣本數據，組間差異用雙尾t檢驗。

2 結 果

HFRS輕、重組各病期血清IL-8均高于正常水平，但以低血壓少尿期最為顯著，在發熱期與低血壓少尿期，重癥組顯著高于輕癥組(P<0.05或P<0.01)。輕、重組病程早期均見PMN升高，輕癥組恢復較快，于多尿期便趨近正常，重癥組則延至恢復期方見回降; 在低血壓少尿期, 2組有顯著差異(P<0.05), PMN與IL-8及L-選擇素的變化趨勢大體一致。HFRS發熱期與低血壓少尿期，血清L-選擇素均顯著升高，且重癥組顯著高于輕癥組(P<0.05), 重癥組于多尿期便趨近正常，而輕癥組于多尿期仍處于較高水平。見表1。

3 討 論

關于HFRS的發病機制目前有兩種學說，一是病毒直接作用學說，另一是免疫發病機制。由于前一種學說缺乏循證醫學的依據，故多數學者傾向于后一種學說[4-5]。作者以往的研究[5-6]證明, HFRS急性期存在促炎/抗炎失平衡，腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-1β(IL-1β)、γ-干擾素(IFN-γ)等促炎細胞因子大量釋放，而IL-4、IL-10、轉化生長因子-β1(TGF-β1)等抗炎細胞因子則相對或絕對不足，呈現全身炎癥反應綜合征。本研究進一步發現, HFRS急性期血清IL-8、L-選擇素水平顯著升高，并與外周血中性粒細胞的升高相平行。

表1 腎綜合征出血熱患者血清IL-8、L-sel、PMN的變化比較

與對照組相比, *P<0.05, **P<0.01; 與重癥組相比, △P<0.05。

IL-8主要來源于單核-巨噬細胞，但在病理情況下內皮細胞、肺泡Ⅱ型上皮細胞等受內毒素、TNF-α、IL-1刺激亦可產生IL-8[7]。漢坦病毒是泛嗜性病毒，單核細胞是其重要的靶細胞[8], 受病毒感染后不僅產生IL-8，還可通過其產生的TNF-α、IL-1等細胞因子刺激內皮細胞產生IL-8, 這可能是HFRS患者血清IL-8升高的重要原因。IL-8最重要的功能之一是趨化和激活中性粒細胞，后者激活后便借助其表面的L-選擇素與內皮細胞黏附，通過滾動效應和雙向信號傳導使PMN及內皮細胞產生更多的黏附分子，以利于白細胞跨內皮移行; 滲入到血管外的中性粒細胞則釋放溶酶體酶、超氧陰離子等毒性物質，引起毛細血管的炎癥反應[9]。

在急性炎癥中, IL-8是動員中性粒細胞到炎癥部位的主要趨化分子。有學者[10]在內毒素所致急性呼吸窘迫綜合征、腦缺血再灌注性損傷及其他多種急性炎癥中，應用IL-8抗體可防止中性粒細胞浸潤及其所致的組織損傷。Strieter[9]對急性肺損傷過程作了這樣的描述，首先由TNF、IL-1等細胞因子激活肺微血管內皮細胞，使其表達E-選擇素、P-選擇素、細胞間黏附分子-1(ICAM-1), 再與白細胞表面的L-選擇素相互作用，形成白細胞與內皮細胞的初步黏附和滾動效應; 隨后, L-選擇素脫落，局部產生的IL-8激活白細胞表達β2整合素; 后者與內皮細胞表面的ICAM-1緊密結合，導致白細胞滲出，產生反應性氧、溶蛋白酶及其他細胞因子。由此可見，白細胞滲出與激活需要IL-8與L-選擇素的參與，部份危重型HFRS患者所并發的急性呼吸窘迫綜合征也可能與之有關。

綜上所述，在漢坦病毒感染過程中，受激活的單核-巨噬細胞和內皮細胞均能產生IL-8, 后者在L-選擇素等黏附分子的參與下可刺激白細胞跨內皮移行，從而引起廣泛的小血管炎癥反應，可見IL-8與L-選擇素均參與了HFRS的發病過程。

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1672-2353(2017)23-233-02

10.7619/jcmp.201723097

2017-07-10