CD63在戊型肝炎病毒感染中的作用機制

張黎，溫智恒，田亞賓，黃維金，王佑春

中國食品藥品檢定研究院，北京 102629

CD63在戊型肝炎病毒感染中的作用機制

張黎，溫智恒，田亞賓，黃維金，王佑春

中國食品藥品檢定研究院，北京 102629

本研究旨在尋找戊型肝炎病毒(hepatitis E virus，HEV)衣殼蛋白ORF2的相互作用蛋白，探討其在HEV感染中的作用。采用酵母雙雜交方法從人肝細胞文庫中篩選與HEV ORF2相互作用的蛋白，結果顯示CD63與HEV ORF2相互作用。Pull-down實驗提示原核表達的ORF2與CD63結合較弱，而免疫共沉淀實驗提示真核表達的ORF2能與CD63結合。流式細胞術檢測結果顯示，HEV易感細胞PLC/PRF/5細胞膜表面的CD63表達水平普遍低于HEV非易感細胞。過表達CD63抑制PLC/PRF/5細胞的HEV感染，而小干擾RNA(small interfering RNA，siRNA)干擾CD63表達則促進HEV感染。結果提示，CD63能與HEV ORF2相互作用，可能抑制HEV感染肝細胞。

戊型肝炎病毒；ORF2；CD63

近年來，戊型肝炎在我國許多地區已超過甲型肝炎，成為發病率最高的急性病毒性肝炎。戊型肝炎病毒(hepatitis E virus，HEV)主要經糞-口途徑傳播，也可經輸血傳播和母嬰垂直傳播。雖然大多數戊型肝炎為急性感染，并具有自愈性，但一些免疫力低下的特殊人群，如器官移植、艾滋病等患者[1]感染HEV后會發展為慢性肝炎、急性重癥肝炎(暴發性肝炎)，甚至死亡。妊娠晚期婦女感染HEV的病死率也高達20%[2-4]。

HEV為單鏈正向RNA病毒。雖然HEV一直被認為是無包膜病毒，但近來一些研究認為其產生過程中可能存在帶有包膜的形式。經膽汁處理后的HEV在糞便內呈無包膜狀態。HEV基因組全長7.2 kb，編碼3個開放讀碼框(open reading frame，ORF)。ORF1編碼病毒轉錄和復制相關病毒，ORF2編碼長度為660個氨基酸(amino acid，aa)的病毒衣殼蛋白，ORF3編碼與病毒釋放有關的小分子磷蛋白。……