肝癌小鼠模型中調節性T細胞對樹突狀細胞的作用

杜勇,黃智銘,林秀清,陳新

(溫州醫科大學附屬第一醫院,浙江 溫州 325015,1.兒科;2.消化內科)

肝癌小鼠模型中調節性T細胞對樹突狀細胞的作用

杜勇1,黃智銘2,林秀清2,陳新2

(溫州醫科大學附屬第一醫院,浙江 溫州 325015,1.兒科;2.消化內科)

目的:構建BALB/c小鼠原位肝癌模型,分離腫瘤小鼠體內的CD4+CD25+調節性T細胞(Tregs)和樹突狀細胞(DC),研究Tregs對DC功能的影響.方法:采用肝癌細胞懸液直接接種BALB/c小鼠肝臟建立原位肝癌模型.模型制作成功后25 d處死動物,無菌取出脾臟,用免疫磁珠分選法分離純化肝癌小鼠脾臟中的Tregs、CD4+CD25-效應T細胞和DC.Tregs和效應T細胞共培養,CCK8法檢測Tregs對效應T細胞增殖情況的影響.DC和Tregs直接接觸共培養,用流式細胞儀檢測DC表面協同刺激分子CD80/CD86表達的變化,ELISA法檢測培養上清液中TNF-α、IL-12的分泌.結果:成功構建了小鼠原位肝癌模型,并分離出高純度的Tregs、效應T細胞和DC.Tregs在體外能抑制CD4+CD25-效應T細胞的增殖.DC和Tregs共培養時,Tregs會下調DC表面協同刺激分子CD80/CD86的表達,并抑制DC分泌IL-12和TNF-α.結論:肝癌小鼠模型中Tregs能抑制DC的功能,從而抑制機體的抗腫瘤免疫,針對Tregs進行腫瘤免疫治療是腫瘤治療的新策略.

肝腫瘤;CD4+CD25+調節性T細胞;樹突狀細胞;免疫抑制;小鼠

原發性肝癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一,傳統的治療手段效果不佳,預后差.樹突狀細胞(dentritic cells,DC)疫苗可以有效地提呈腫瘤相關性抗原,激發宿主體內產生特異性抗腫瘤細胞的免疫,故成為近年來腫瘤治療的研究熱點[1].然而機體的腫瘤免疫抑制微環境與腫瘤免疫耐受及逃逸……