降鈣素原、C反應蛋白與線粒體DNA水平檢測在老年膿毒癥多器官功能衰竭病情評估中的應用

廖小龍　郭偉新　王中華　梁駿　王首紅

[摘要]目的 探討降鈣素原（PCT）、C反應蛋白（CRP）與線粒體DNA（mt-DNA）水平檢測在老年膿毒癥多器官功能衰竭（MODSE）病情評估中的應用價值。方法 選取2014年1月～2016年12月我院收治的62例老年膿毒癥患者，將其中合并器官功能衰竭的29例患者設為衰竭組，未合并器官功能衰竭的33例患者設為未衰竭組；選取同期的30例正常體檢者作為對照組。比較三組受檢者的PCT、CRP、mt-DNA水平差異。結果 膿毒癥患者的PCT、CRP、mt-DNA水平均顯著高于對照組（P<0.05），衰竭組的mt-DNA、PCT水平顯著高于未衰竭組（P<0.05），但衰竭組的CRP水平與未衰竭組比較，差異無統計學意義（P>0.05）。根據器官衰竭情況進一步分組，分為單器官衰竭組（11例）、雙器官衰竭組（9例）、三個及以上器官衰竭組（9例），隨著衰竭器官數量的增多，患者的mt-DNA、PCT水平也顯著增高，各組間比較差異均有統計學意義（P<0.05），但各組間CRP水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）。結論 PCT、CRP及mt-DNA均能提示老年患者膿毒癥的發生，PCT、mt-DNA水平測定不但能夠用于膿毒癥的診斷，更能夠用于老年膿毒癥患者器官功能衰竭情況的評估，值得在臨床中推廣和應用。

[關鍵詞]膿毒癥；多器官功能衰竭；老年；降鈣素原；C反應蛋白；線粒體DNA

[中圖分類號] R592 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）10（c）-0123-03

Application of procalcitonin，C-reactive protein and mitochondrial DNA level test in the assessment of multiple organ dysfunction in elderly patients with sepsis

LIAO Xiao-long GUO Wei-xin WANG Zhong-hua LIANG Jun WANG Shou-hong

Institute of Geriatrics，People′s Hospital of Guangdong Province （Guangdong Academy of Medical Sciences），Guangzhou 510080，China

[Abstract]Objective To explore the application values of procalcitonin （PCT），C-reactive protein （CRP） and mitochondrial DNA （mt-DNA） level test in the assessment of multiple organ dysfunction in multiple organ dysfunction in elderly （MODSE） patients with sepsis.Methods From January 2014 to December 2016，62 elderly patients with sepsis admitted into our hospital were selected as research objects.Among them，29 patients complicated with organ failure were classified into the failure group，and the rest was categorized into the non-failure group.Meanwhile，another group of 30 healthy participants after physical examinations was classified into the control group.The differences of PCT，CRP，and mt-DNA levels were compared.Results The levels of PCT，CRP and mt-DNA levels in sepsis patients were significantly higher than those in the control group （P<0.05）.The levels of mt-DNA and PCT in the failure group were significantly higher than those in the non-failure group （P<0.05）.But，there was no great difference in CRP between the failure group and the non-failure group （P>0.05）.According to the conditions of organ failure，the patients were further divided into the single-organ failure group （n=11），the double-organ failure group （n=9），and the three or above organ failure group （n=9）.With the increased number of failure organs，the levels of mt-DNA and PCT were greatly increased，which were displayed statistical significance between inter-group comparison （P<0.05），the CRP level was not in a statistical difference after comparison （P>0.05）.Conclusion Procalcitonin，CRP and mt-DNA all can indicate the occurrence of sepsis in elderly patients.Test of PCT and mt-DNA levels can not only be used in the diagnosis of sepsis，but also to evaluate the MODSE patients with sepsis，which is worthy of clinical promotion and application.endprint

[Key words]Sepsis；Multiple organ dysfunction；Elderly；Procalcitonin；C-reactive protein；Mitochondrial DNA

膿毒癥是感染引起的全身炎癥反應綜合征，具有復雜的生理病理機制，此類疾病發病快、進展迅速，死亡率高，且患者易出現休克及多器官功能衰竭等情況，因此膿毒癥的早期病情評估對于患者的預后而言十分重要[1]。近年來生物標志物的應用給膿毒癥的診斷和評估提供了新的思路，目前臨床常用的膿毒癥評估指標包括降鈣素原（PCT）、C反應蛋白（CRP）、乳酸等，但這些指標具有一定的局限性[2]。線粒體DNA（mt-DNA）是血漿中可檢測到的游離DNA片段，主要是由于細胞壞死或凋零釋放，也有部分為主動分泌釋放，在正常人體血漿中含量較低。近年來關于mt-DNA水平檢測在多種疾病診斷上均有較好應用[3]，但國內關于mt-DNA水平與膿毒癥相關性的研究報道尚少。本文就PCT、CRP、mt-DNA水平檢測在膿毒引起的老年膿毒癥多器官功能衰竭（multiple organ dysfunction syndrome in the elderly，MODSE）評估中的應用效果進行研究評價，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2014年1月～2016年12月轉入或入住我科的62例老年膿毒癥患者，將其中合并器官功能衰竭的29例患者設為衰竭組，未合并器官功能衰竭的33例患者設為未衰竭組；選取同期的30例正常體檢者作為對照組。衰竭組中，男性15例，女性14例；年齡70～92歲，平均（79.4±2.5）歲。未衰竭組中，男性17例，女性16例；年齡71～90歲，平均（79.2±2.6）歲。對照組中，男性16例，女性14例；年齡70～91歲，平均（79.5±2.9）歲。三組受檢者均知情同意參與研究，一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會審批通過。

1.2方法

患者轉入或入住ICU后進行常規檢查，包括CRP、PCT檢測，收集臨床檢驗中的這兩項數據。另外再取患者靜脈血2 ml置于EP管中，室溫下靜置30 min，3000 r/min下離心10 min，將上層血漿轉移至另外一個潔凈EP管中，再于10000 r/min下離心10 min，完全去除細胞成分后將上層血漿轉移至凍存管中，置于-80℃條件下保存備用。采用實時熒光定量檢驗進行mt-DNA水平測定，引物序列參照Butt等[4]的文獻，上游引物：CACAGAAGCTGCCATCAAGTA，下游引物：CCGGAGAGTATATTGTTGAAGAG。試劑盒由Qiagen公司提供，檢測過程嚴格按照試劑說明書進行操作。

1.3觀察指標

比較三組受檢者的PCT、CRP及mt-DNA水平差異。將衰竭組患者根據衰竭器官數量進行進一步分組，對比不同衰竭器官數量患者的PCT、CRP及mt-DNA水平差異。

1.4統計學方法

采用SPSS 20.0統計學軟件對數據進行處理，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用方差分析，檢驗水平α=0.05。

2結果

2.1三組患者PCT、CRP、mt-DNA水平的比較

膿毒癥患者（衰竭組與未衰竭組）的PCT、CRP、mt-DNA水平均顯著高于對照組（P<0.05），衰竭組的mt-DNA、PCT水平顯著高于未衰竭組（P<0.05），但衰竭組的CRP水平與未衰竭組比較，差異無統計學意義（P>0.05）（表1）。

2.2不同衰竭器官數量患者PCT、CRP、mt-DNA水平的比較

根據器官衰竭情況進一步分組，隨著衰竭器官數量的增多，患者的mt-DNA、PCT水平也顯著增高，各組間比較差異有統計學意義（P<0.05），但各組間的CRP水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）（表2）。

3討論

膿毒癥具有發病急、進展快、預后差的特點，多見于兒童。對于老年膿毒癥患者而言，由于身體各項功能均出現衰退，發生器官衰竭的可能性也有所增加。PCT被廣泛用于感染性疾病的診斷，能夠反映全身性炎癥反應的活躍程度，一般而言，影響PCT水平的因素主要包括感染器官的大小和類型等，但Dwivedi等[5]的研究顯示，在胰島素抵抗患者血清中也能發現PCT水平的異常增高，因此認為PCT并非針對傳統意義上的急性感染而發生改變，而是發生在感染性和自身免疫性炎癥水平以下的炎癥反應中。CRP屬于一種急性時相反應蛋白，對于各種炎癥反應均有較高的敏感性，當CRP水平增高時往往提示慢性免疫系統被激活。CRP屬于多功能蛋白，能夠激活蛋白Ⅰ/核因子K*的信號傳導通路，從而導致酪氨酸磷酸化過程異常，Gloria等[6]的研究顯示，膿毒癥患者隨著癥狀的加深，CRP水平也會表現出明顯的上升。目前關于PCT、CRP與膿毒癥的關系已有報道，但主要集中在診斷應用上[7-9]。

Mt-DNA是由線粒體分泌的一種遺傳物質，在不同組織中的變化很大，一般而言，正常人體血漿內的mt-DNA水平極低，而當組織細胞出現大面積的壞死、凋零時，mt-DNA會被釋放入血，導致血漿mt-DNA水平的增高[10-12]。mt-DNA由于缺乏組蛋白的保護，且無對應的修復機制，因此當感染誘發炎癥反應時mt-DNA會被氧自由基和其他毒性物質損傷，同時線粒體遭到破壞，mt-DNA被釋放入血，導致循環中游離的mt-DNA及碎片增多[13-15]。從本次研究數據來看，膿毒癥患者的PCT、CRP及mt-DNA水平顯著高于正常人群，但CRP并不能反應患者是否發生器官衰竭。從進一步的研究來看，CRP水平與器官衰竭數量無關，但PCT、mt-DNA不但能夠反映膿毒癥患者是否合并器官衰竭，同時也能夠反應器官衰竭的數量。考慮原因可能是由于組織器官出現損傷時血漿mt-DNA水平增高，且受累器官越多，損傷越重則游離mt-DNA也就越多，而CRP只能反應機體的炎癥進展。endprint

綜上所述，PCT、CRP及mt-DNA均能提示老年患者膿毒癥的發生，mt-DNA水平測定不但能夠用于膿毒癥的診斷，更能夠用于老年膿毒癥患者器官功能衰竭情況的評估，值得在臨床中推廣和應用。

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（收稿日期：2017-06-25 本文編輯：祁海文）endprint