ADAM8基因在胃癌組織中的表達及與臨床病理特征的關系

劉光耀 劉 莉

（江蘇省泰州市中醫(yī)院病理科，江蘇 泰州 225300）

ADAM8基因在胃癌組織中的表達及與臨床病理特征的關系

劉光耀 劉 莉

（江蘇省泰州市中醫(yī)院病理科，江蘇 泰州 225300）

目的在胃癌組織中對ADAM8基因進行檢測，對其表達情況進行分析。方法對醫(yī)院篩選納入的36 例胃癌患者的癌組織及其相應的癌旁組織（癌旁組）采用免疫組織化學法檢測及PCR技術分別對其ADAM8基因表達情況進行分析。結果ADAM8在癌組織中呈現高表達，不同腫瘤直徑大小、不同臨床分期、不同浸潤度及有無轉移等差異具有顯著性（P＜0.05）。ADAM8在胃癌組織中的陽性表達率（63.9%）高于其相應的癌旁正常組織（22.2%），差異具有顯著性（P＜0.05）。經實時定量PCR檢測胃癌組織中ADAM8mRNA的表達水平較癌旁組織中 ADAM8mRNA表達水平明顯升高，二者間差異顯著（P＜0.05）。結論ADAM8基因在胃癌細胞株中的表達較正常細胞者中呈現高表達，可能與其胃癌的發(fā)生發(fā)展相關，可作為胃癌預后的相關評價指標。

ADAM8基因；胃癌組織；表達；臨床病理

胃癌在目前臨床中作為一種較為常見的、多發(fā)的、嚴重的惡性腫瘤，已在歐美等發(fā)達國家惡性腫瘤發(fā)病率位居前列，大多數患者確診時發(fā)現淋巴結的轉移，病死率較高，對患者的生命健康及生活質量產生嚴重的影響[1]。目前對于胃癌的具體發(fā)病機制尚不十分清楚，多數學者認為其發(fā)生發(fā)展的過程受多種因素的共同影響，而胃癌的復發(fā)、轉移是多階段、多因素、多基因綜合作用和長時間的發(fā)展而產生的結果。因此胃癌的早期診斷與轉移的判斷顯得相當重要[2-3]。因此本文通過測定ADAM8基因在胃癌患者體內中的表達狀態(tài)，對其臨床治療提供積極的指導意義。

1資料與方法

1.1 一般資料：我院收治胃癌患者36例，依據臨床資料確定為胃癌，均經胃鏡與活檢、手術和病理切片證實，入選患者均符合診斷標準。其中胃癌組男20例，女16例，年齡均在42～78歲，平均為（53.6±7.1）歲，取胃癌及癌旁組織標本。所有患者經院倫理委員會通過審批，并在知情同意書簽字。

1.2 方法[4]

1.2.1 免疫組織化學（IHC）染色：收集標本采用對其ADAM8基因抗體免疫組織化學染色，ADAM8單克隆抗體的工作濃度為1∶150。采用免疫組化法檢測基因的表達。所有標本均采用10%的甲醛溶液固定，石蠟包埋，切片；采用ADAM8基因單克隆抗體，對切片進行免疫組化，所有操作步驟均嚴格按照說明書進行。以PBS代替一抗作為陰性對照，拍照觀察。

1.2.2 PCR術：切取1～2 mm大小組織，利用抗兔通用型免疫組化試劑盒（上海基因科技），使用Trizol試劑一步法提取組織mRNA，用反轉錄試劑盒逆轉錄成cDNA（-20 ℃儲存?zhèn)溆茫龠M行擴增，采用10 μL反應體系其反應條件為：預變性95 ℃，4 min；變性95 ℃，10 s；退火65 ℃，30 s，延伸72 ℃，30 s共36個循環(huán)。每個樣品3個復孔，取CT平均值。

1.3 統(tǒng)計學分析：對所得的結果用SPSS14.0統(tǒng)計軟件進行比較分析，采用t檢驗方法適用于計量資料用均數±標準差即（x-±s）；計數資料采用χ2檢驗。組間若P＜0.05時差異有顯著性。

2 結 果

2.1 ADAM8基因在胃癌組織及其癌旁組織中的表達：在胃癌組織中ADAM8陽性染色呈棕黃色或棕褐色，而在癌旁組織的細胞中呈現不表達或弱表達狀態(tài)。ADAM8基因在癌細胞組織的陽性表達率達到63.9%，而在癌旁組織中陽性表達率為22.2%，與癌旁組織相比，癌組織明顯高于癌旁正常組織中的表達，差異具有顯著性（P＜0.05）。

2.2 ADAM8表達與胃癌患者臨床病理特征的關系：在篩選出的36例胃癌細胞組織表達情況分別與臨床病理特征不同腫瘤直徑大小、不同臨床分期、不同浸潤度及有無轉移等具有相關性，組間差異顯著（P＜0.05）。細胞癌組織不同臨床體征間的分析結果見表1。

2.3 RT-PCR檢測胃癌組織及正常胃黏膜組織中ADAM8的表達：經實時定量PCR檢測胃癌組織及癌旁組織中ADAM8mRNA的表達結果顯示在胃癌中ADAM8mRNA表達水平為（0.796±0.113），在癌旁組織中的表達水平是（0.221±0.105），二者間差異顯著（P＜0.05）。

3 結 論

胃癌在臨床中惡性程度高，目前我國發(fā)病率居世界之首發(fā)展較迅速且發(fā)病較隱匿，胃癌的主要臨床表現在早期多不顯著，患者就診不及時已到癌癥的中晚期階段，病死率較高。若能夠進行早期發(fā)現、診斷及早期治療，有利于顯著性的延長胃癌患者的生存期[5]。探尋有效的診斷和治療方法，ADAM8基因作為解聚素和金屬蛋白酶家族的一員，可參與多種膜結合受體、細胞因子等蛋白的水解過程。有關研究表明，在多種惡性腫瘤組織中ADAM8基因被檢測出呈現異常高表達狀態(tài)，其在乳腺癌、胃癌等多種腫瘤組織中具有高表達趨勢，最終將致腫瘤的產生[6]。

表1 ADAM8mRNA表達結果

在本研究中結果顯示，胃癌與正常癌旁組織的ADAM8基因表達水平比較發(fā)現，癌患者的ADAM8基因表達水平明顯高于正常組織患者（P＜0.05）；且均與患者年齡、性別、轉移成都無明顯相關（P＞0.05），采用免疫組織化學方法檢測胃癌組織和胃正常黏膜組織中ADAM8的表達顯示胃癌組織的表達陽性率明顯高于胃正常黏膜組織。提示ADAM8基因表達增高與胃癌的發(fā)生發(fā)展有關。ADAM8蛋白表達、腫瘤大小、病理類型和腫瘤分期是影響患者預后的危險因素。

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