促紅細胞生成素對大鼠腎臟缺血-再灌注損傷的保護作用研究

張炯 王佳 王芳 李貴森

·實驗研究·

促紅細胞生成素對大鼠腎臟缺血-再灌注損傷的保護作用研究

張炯 王佳 王芳 李貴森

目的探討促紅細胞生成素(erythropoietin,EPO)對大鼠腎臟缺血-再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury, IRI)的保護作用及機制。方法將30只雄性SD大鼠隨機均分成假手術組、模型組和EPO組，每組10只。EPO組在術前1 h給予腹腔注射促紅細胞生成素(1 000 U/kg)，假手術組和模型組則給予等體積生理鹽水腹腔注射。EPO組和模型組夾閉左側腎蒂45 min，去除右腎，再灌注24 h構建大鼠腎臟IRI模型；假手術組操作同上，但不夾閉左側腎蒂。恢復腎臟血流灌注24 h后收集大鼠腎臟和血清。采用酶聯接免疫吸附劑檢測血肌酐(SCr)，尿素氮(BUN)、白細胞介素6(interleukin-6，IL-6)、干擾素(inteferon gamma，IFN-γ)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factors-α，TNF-α)以及抗炎細胞因子白介素10(IL-10)和轉化細胞生長因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)的表達；逆轉錄聚合酶鏈反應檢測腎臟IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-10和TGF-β的mRNA水平；免疫蛋白印記法檢測促紅細胞生成素受體(erythropoietin receptor，EPOR)、磷酸化促紅細胞生成素受體(p-EPOR)、酪氨酸激酶-2(JAK2)、信號轉導及轉錄激活子3(STAT3)、磷酸化酪氨酸激酶-2(p- JAK2)、磷酸化信號轉導及轉錄激活子3(p-STAT3)表達水平；過雪夫染色檢測腎組織病理形態。結果與假手術組相比，模型組p-EPOR、p-JAK2、p-STAT3、SCr、BUN、IL-6、TNF-α、IFN-γ表達水平以及腎組織病理改變均明顯增加，而IL-10和TGF-β表達明顯減少以及EPOR、JAK2和 STAT3表達無差異；與模型組相比，EPO組p-EPOR、p-JAK2、p-STAT3、IL-10和TGF-β表達增加，而SCr、BUN、IL-6、TNF-α、IFN-γ表達水平以及腎組織病理改變明顯減少，而EPOR、JAK2和STAT3表達依然無差異。結論EPO預處理可通過抑制炎癥減輕腎臟IRI，其作用機制與進一步促進EPOR/JAK2/STAT3信號途徑活化相關。

促紅細胞生成素；缺血-再灌注損傷；炎癥；腎臟；大鼠

腎臟缺血-再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury, IRI)是繼發于休克，腎移植和心肺體外大循環手術等的臨床危重情況,其發病率高，可嚴重影響患者腎臟功能及長期預后[1-4]。……