鵝混合感染腸道沙門菌與葡萄球菌的診治

路振香 ， 武夢茹 ， 郭偉娜 ， 劉 暢

(安徽科技學院動物科學學院 ， 安徽 鳳陽 233100)

鵝混合感染腸道沙門菌與葡萄球菌的診治

路振香 ， 武夢茹 ， 郭偉娜 ， 劉 暢

(安徽科技學院動物科學學院 ， 安徽 鳳陽 233100)

沙門菌感染禽類可導致下痢、傷寒、副傷寒等癥狀，該菌還可導致人獸共患疾病，引起禽類發病之后，再通過污染食物而使人中毒，對人類的身體健康構成威脅。鵝葡萄球菌病主要感染雛鵝，鵝感染后出現關節炎、敗血病和臍炎等癥狀。隨著養鵝業集約化快速發展，鵝感染葡萄球菌病例越來越多。

1 病例介紹

安徽明光某養鵝戶飼喂5 000只肉仔鵝，于25日齡時突然出現死亡病例，3、4 d死亡超過200只，病鵝精神不振，離群，臥地不起，羽毛松亂，無光澤，排出黃白色、綠色稀糊狀糞便。病死鵝的主要病理變化有肝周炎、心包炎、氣囊炎，腸道廣泛性出血。為了查明病因，并指導養殖戶用藥，特對病死鵝進行病原菌分離鑒定與藥敏試驗。

2 實驗室診斷及結果

用病死鵝的肝臟組織，分別在血瓊脂平板和麥康凱瓊脂平板上劃線進行病原菌的分離培養，純化、革蘭染色及鏡檢和生化試驗:包括糖發酵試驗、吲哚形成試驗、甲基紅試驗及V-P試驗和藥敏試驗，并對分離菌的16S rRNA序列進行PCR擴增、序列測定、同源性分析，試驗結果如下。

從送檢病死鵝的肝臟中分離到兩株細菌，即菌株1和菌株2。菌株1命名為ptqj，該菌株在麥康凱瓊脂平板上不生長；在雞鮮血瓊脂平板上呈灰色、濕潤、圓形、不透明、低隆起、中等大小、光滑的菌落；在營養瓊脂平板上呈灰白色、圓形隆起濕潤光滑中等大小菌落。該菌為革蘭陽性球菌。菌株2命名為sms，該菌在麥康凱瓊脂平板上呈淡橘紅色圓形濕潤光滑隆起半透明中等大小菌落；在血瓊脂平板上為銀灰色圓形濕潤光滑隆起半透明中等大小菌落；在營養瓊脂平板上為灰白色圓形光滑濕潤隆起半透明中等大小菌落。該菌為革蘭陰性單桿菌。菌株1能發酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇只產酸。菌株2能發酵甘露醇、麥芽糖只產酸，利用葡萄糖既產酸又產氣，不能利用乳糖。菌株1吲哚形成試驗、甲基紅試驗、V-P試驗均呈陰性。菌株2吲哚形成試驗和V-P試驗呈陰性，甲基紅試驗呈陽性。

體外藥敏試驗結果顯示，兩株分離菌耐藥都很嚴重，對新生霉素、阿米卡星、頭孢唑肟、氧哌嗪青霉素、妥布霉素、頭孢西丁、拉氧頭孢、頭孢他啶等多種抗菌藥物均產生耐藥性，對米諾環素、舒巴坦頭孢哌酮敏感，讓養殖戶使用藥敏試驗中篩選出的敏感藥物舒巴坦頭孢哌酮進行治療，用藥后第3天發病鵝明顯減少，死亡下降，第3天死亡停止，病鵝逐漸康復，大群鵝采食量上升，疫情得到了控制。

兩株分離菌耐藥都很嚴重，可能與當前的養鵝業的現狀有很大關系，目前，鵝的養殖已經集約化由先前一戶飼養幾十只到目前飼養1 000只到18 000只甚至30 000只，已經是常態化，鵝是草食動物，但目前，由于養殖量大，養鵝戶急于讓鵝快速生長，多數養殖戶采用高蛋白的肉小雞飼料、肉小鴨飼料進行飼喂，使得鵝群中經常出現痛風病例，鵝的盲腸退化等現象，導致鵝的抵抗力下降，使得本來就潛伏在鵝群中的致病菌趁虛而入，導致鵝群中暴發相應的細菌性傳染病，鑒于此，養殖戶不得不經常超大劑量地使用抗菌藥物進行預防，從而誘發致病菌產生耐藥性，甚至多重耐藥性。

對2株分離菌16S rRNA序列PCR擴增結果顯示，擴增出了目的片段(圖1)。

將2株分離菌的16S rRNA的序列在GenBank上進行比對，菌株1(ptqj)與登錄號為KX525724.1的葡萄球菌同源性達到100%，故菌株1為葡萄球菌。菌株2(sms)與登錄號為JF951183.1的腸道沙門菌同源性達到99%，故菌株2為腸道沙門菌。

圖1 分離菌16S rRNA序列PCR擴增產物的瓊脂糖凝膠電泳結果

圖2 菌株1(ptqj)與6株葡萄球菌16S rRNA基因的進化樹

圖3 菌株2(sms)與3株腸道沙門菌16S rRNA基因的進化樹

3 討論

沙門菌在全世界范圍內常常引起重大的公共健康事件[1]。在與食物有關的疾病的范圍內，沙門菌扮演著重要角色。在養殖業中，畜禽類發生沙門菌病對養殖戶來說會增加養殖成本，該病在成年家禽中常常表現為隱性感染，帶菌動物可通過多種途徑感染人類。近年來，由于細菌耐藥性的問題日趨嚴重，因此，該病的防治愈加困難，在抗菌藥物剛出現的時候，該病的防治對于人類和動物來說都不是一個很嚴峻的問題[2]。但是隨著抗菌藥物的廣泛使用，尤其是濫用，細菌耐藥性更加嚴重，有些疾病已經到了無藥可用的境地。在過去的20年里，很多國家都報道出了沙門菌具有多重耐藥性[3]。沙門菌病的防治已經陷入困境[4]。

葡萄球菌在自然界分布廣泛，如動物體表、汗腺、毛發、呼吸道、消化道，當有外傷時，常常引起動物發病。因此，要加強飼養管理，并且做好一定的預防工作，如鵝的運動場地，放牧初的地面要松軟，不能是砂石地面，鵝床要光滑，避免鵝掌及腿部有外傷，可降低該病的發生率，同時，一旦發生該病要及時診斷治療，以便控制疾病的蔓延，減少損失。

安徽明光某養殖戶送檢的病死鵝是由于葡萄球菌與腸道沙門菌的混合感染而引起的，采用藥敏試驗中篩選出敏感藥物頭孢哌酮進行治療，3 d后疫情便得到了控制。

[1] Su Lin-Hui, Wu Tsu-Lan, Chia Ju-Hsin. Increasing ceftriaxone resistance in Salmonella isolates from a university hospital in Taiwan[J]. Journal of Antimicrobial Chemotherapy,2005(6):60-75.

[2] 倪宏波, 何宏軒, 喬軍. 預防獸醫學檢驗技術[M]. 長春: 吉林人民出版社,2002:259-263.

[3] Davis M, Hancock A. Changes in antimicrobial resistance among Salmonella enterica serovar Typhimurium isolates from humans and cattle in the northwestern United States[J]. Emerging Infectious Diseases,1999，678-802.

[4] Hardy A. Salmonella: a continuing problem[J]. Postgraduate Medical Journal,2004，17-21.

S852.61+2

B

0529-6005(2017)08-0036-02

2017-06-18

安徽科技學院獸醫學重點學科建設項目資助(AKZDXK2015A04)

路振香(1964-)女，副教授，碩士，主要從事動物傳染病病原學的教學和科研工作，E-mail:Luzhenxiang2002@126.com