潮州地區糖尿病與葡萄糖—6—磷酸脫氫酶缺乏癥的相關性研究

朱鈺鈺　林芬　吳教仁　黃澤偉　陳偉立

【摘要】 目的 研究潮州地區糖尿病與葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺乏癥的相關性。方法 在

全自動生化分析儀上應用速率法定量檢測潮州地區1166例糖尿病患者的G6PD活性， 應用膜反向斑點雜交法檢測常見的6個G6PD基因突變位點， 應用DNA測序技術分析未知突變樣本。另取潮州地區4221例健康體檢者作為研究對象， 記錄G6PD缺乏癥發生情況。結果 在1166例糖尿病患者中檢出G6PD缺乏癥41例， 男15例， 女26例。G6PD缺乏癥在潮州地區糖尿病人群的發生率為3.52%， 其中男性發生率為2.53%， 女性發生率為4.53%。在41例G6PD缺乏癥患者中檢出9種基因突變的類型， 分別是c.1376G>T、c.1388G>A 、c.1024C>T 、c.392G>T 、c.95A>G、c.871G>A、 c.517T>C、c.1376G

>T/ⅣSX1193T>C/c.1311C>T和c.1311C>T/ⅣSX1193T>C。潮州地區健康體檢人群G6PD缺乏癥的發生率（3.36%）與糖尿病人群（3.52%）比較， 差異無統計學意義（P>0.05）， 而且女性的發生率都高于男性。

結論 潮州地區糖尿病患者G6PD缺乏癥的發生率與本地區健康體檢人群G6PD缺乏癥的發生率很接近， 顯示兩者之間無明顯的相關性。

【關鍵詞】 糖尿病；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥；相關性

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.23.004

Study on correlation between diabetes and glucose - 6 - phosphate dehydrogenase deficiency in Chaozhou area ZHU Yu-yu， LIN Fen， WU Jiao-ren， et al. Department of Clinical Laboratory， Nanfang Medical University Affiliated Chaozhou Central Hospital， Chaozhou 521021， China

【Abstract】 Objective To study the correlation between diabetes and glucose - 6 - phosphate dehydrogenase （G6PD） deficiency in Chaozhou area. Methods Quantitative detection of G6PD activity in 1166 diabetic patients in Chaozhou area was performed on the automatic biochemical analyzer. 6 common G6PD mutation sites were detected by membrane reverse dot blotting. Unknown mutant samples were analyzed by DNA sequencing technology. There were another 4221 healthy physical examination persons in Chaozhou District as study subjects， and the occurrence of G6PD deficiency was recorded. Results Among 1166 diabetic patients， there were 41 G6PD deficiency cases， including 15 male cases and 26 female cases. Incidence of G6PD deficiency was 3.52% in diabetic population of Chaozhou area， with incidence of male as 2.53%， and incidence of female as 4.53%. There were 9 mutations in 41 G6PD deficiency cases， respectively as c.1376G>T， c.1388G>A， c.1024C>T， c.392G>T， c.95A>G， c.871G>A， c.517T>C， c.1376G>T/ⅣSX1193T>C/ c.1311C>T and c.1311C>T/ⅣSX1193T>C. Physical examination population had no statistically significant difference in incidence of G6PD deficiency （3.36%） comparing with diabetic population （3.52%） in Chaozhou area （P>0.05）， and the female had higher incidence than male. Conclusion The incidence of G6PD deficiency in diabetes patients in Chaozhou area is close to the incidence of G6PD deficiency in the local physical examination population， indicating no significant correlation between the two.

【Key words】 Diabetes； Glucose - 6 - phosphate dehydrogenase deficiency； Correlation

糖尿病是以高血糖為特征的慢性代謝性疾病， 近年來在廣東省的患病率成倍增長， 是危害嚴重的疾病之一。G6PD缺乏癥是一種最常見的遺傳性溶血性紅細胞酶缺陷病， 在我國呈南高北低的分布特點， 廣東省是G6PD缺乏癥的高發區。國外研究認為G6PD缺乏癥是糖尿病發病的危險因素[1]， 國內對兩者的相關性研究較少， 在廣東省粵東地區則尚未見報道。因此， 作者通過生化及分子生物學的手段研究廣東省潮州地區糖尿病患者G6PD缺乏癥的發生率及基因突變類型， 探討糖尿病與G6PD缺乏癥之間的相關性。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取經本院確診， 符合世界衛生組織（WHO）診斷標準的潮州地區糖尿病患者1166例， 其中男592例， 女574例， 年齡20～85歲， 經戶籍調查98%為講潮州方言的潮籍人， 相互之間無血緣關系。另取潮州地區4211例健康體檢者， 將其G6PD缺乏癥發生情況作為對照[2]。

1. 2 方法

1. 2. 1 標本采集 清晨空腹采集靜脈血2 ml置EDTA-K2抗凝的真空管， 保存于4℃ 冰箱。

1. 2. 2 G6PD活性定量檢測 應用速率法在日立全自動生化分析儀上檢測G6PD活性， 應用HiCN法檢測血液中血紅蛋白濃度， 以G6PD<6.3 U/gHb判斷為G6PD缺乏。

1. 2. 3 基因組DNA提取 采用深圳亞能生物科技有限公司的試劑盒提取DNA。

1. 2. 4 G6PD基因突變檢測 采用膜反向斑點雜交法進行基因檢測， 檢測常見的6個G6PD基因突變位點：c.1376G>T、c.1388G>A 、c.1024C>T 、c.1004C>T 、c.871G>A、 c.95A>G。

1. 2. 5 DNA測序 部分膜反向斑點雜交法未能檢測出基因突變類型的標本， 設計10對引物用于第2～13號外顯子的擴增及基因測序。

1. 2. 6 鑒定基因突變類型 將測序序列用BLAST進行比對， 同時對測序圖譜應用Chromas軟件直接分析， 從而鑒定基因突變類型。

2 結果

2. 1 在1166例糖尿病患者中檢出G6PD缺乏癥41例， 男15例， 女26例。G6PD缺乏癥在潮州地區糖尿病人群的發生率為3.52%， 其中男性發生率為2.53%（15/592）， 女性發生率為4.53%（26/574）。

2. 2 在41例G6PD缺乏癥患者中檢出9種基因突變的類型， 分別是c.1376G>T、c.1388G>A、c.1024C>T、c.392G>T、c.95A>G、c.871G>A、c.517T>C、c.1376G>T/ⅣSX1193T>C/ c.1311C>T和c.1311C>T/ⅣSX1193T>C。見表1。

2. 3 作者調查了近年來潮州地區健康體檢人群G6PD缺乏癥的發生情況， 與潮州籍糖尿病人群進行比較。潮州地區健康體檢人群G6PD缺乏癥的發生率（3.36%）與糖尿病人群（3.52%）比較， 差異無統計學意義（P>0.05）， 而且女性的發生率都高于男性。見表2。

3 討論

國外研究認為糖尿病患者G6PD缺乏癥的發生率高于正常人群[3]， 國內的報道卻有爭議， 韓家蓮等[4]研究顯示糖尿病與G6PD缺乏癥無遺傳關聯性， 而闞麗娟等[5]的研究跟國外一致， 也顯示糖尿病患者的G6PD缺乏發生率高于健康人群， 因此探索糖尿病與G6PD缺乏癥之間的相關性具有重要的意義。作者從1166例潮州籍糖尿病患者中檢出G6PD缺乏癥41例， 發生率為3.52%， 與本地區體檢人群G6PD缺乏癥的發生率（3.36%）很接近， 顯示兩者之間無相關性。作者認為與國外文獻的報道不一致[3， 6]， 可能是種族的差異導致的結果不一致。而國內的研究對象無種族差異， 但研究人群所在地域不同， G6PD缺乏癥的發生率也相差甚遠[7]， 地域的差異性也可能是導致結果不一致的因素。

通過檢測， 糖尿病患者G6PD缺乏癥中最常見的基因突變類型分別是c.1376G>T、c.1388G>A 、c.1024C>T和c.392G>T

（并列）， 也與潮州地區健康人群的基因突變類型基本一致[2]。

國內多數文獻報道認為G6PD缺乏癥的發生率男性高于女性， 而作者無論是在潮州地區調查的健康人群還是糖尿病人群， 均檢測出女性明顯高于男性。作者認為可能與檢測方法有關， 以往部分女性雜合子用常規生化檢測無法確認。本研究能通過定量檢測G6PD活性， 較好確定截斷值， 并通過分子生物學的手段檢測基因突變的類型。作者檢測出c.1376G>T/ⅣSX1193T>C/ c.1311C>T和c.1311C>T/ⅣSX1193T>C，

為女性雜合子復合突變類型。

臨床研究表明糖尿病患者合并G6PD缺乏癥時， 應用磺脲類等降糖藥容易誘發急性溶血的發生[8-10]。因此， 對于已明確診斷的糖尿病患者， 有必要篩查是否合并G6PD缺乏癥， 謹慎用藥， 避免使用抗氧化藥物， 警惕并發癥的發生。

參考文獻

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[7] 林芬， 楊輝， 楊立業. 我國葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥的分布特征和基因突變.分子診斷與治療雜志， 2016， 8（2）：73-77.

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[10] 李健. 高齡2型糖尿病患者合并葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥急性溶血一例報道. 中國糖尿病雜志， 2015， 23（10）：944-945.

[收稿日期：2017-06-20]