臍血NF-kB及MBP檢測(cè)對(duì)早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的早期診斷及其與預(yù)后的關(guān)系

王智英 ,霍海花,呂紅艷,栗慶芳

(1.邯鄲市婦幼保健院新生兒科；2.河北省磁縣人民醫(yī)院兒科,河北 邯鄲 056000)

臍血NF-kB及MBP檢測(cè)對(duì)早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的早期診斷及其與預(yù)后的關(guān)系

王智英1,霍?；?,呂紅艷1,栗慶芳2

(1.邯鄲市婦幼保健院新生兒科；2.河北省磁縣人民醫(yī)院兒科,河北 邯鄲 056000)

目的：探討腦白質(zhì)損傷(WMD)早產(chǎn)兒臍血核轉(zhuǎn)錄因子-kB(NF-kB)與髓磷脂堿性蛋白 (MBP)水平的早期變化及其與預(yù)后的關(guān)系。方法：選擇WMD的早產(chǎn)兒，根據(jù)頭顱核磁共振成像(MRI)將WMD組早產(chǎn)兒分為輕度組與中重度組。另選取同期30例正常早產(chǎn)兒作為對(duì)照組。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)檢測(cè)所有早產(chǎn)兒臍血NF-kB 和MBP蛋白表達(dá)水平。隨訪(fǎng)12個(gè)月后，采用Bayley嬰幼兒發(fā)育量表對(duì)WMD早產(chǎn)兒的運(yùn)動(dòng)發(fā)育指數(shù)(PDI)和智能發(fā)育指數(shù)(MDI)進(jìn)行評(píng)估。分析其核轉(zhuǎn)錄因子-kB(NF-kB) 和MBP在不同嚴(yán)重程度WMD早產(chǎn)兒中的水平變化，及其與MDI和PDI評(píng)分的相關(guān)性。結(jié)論：與對(duì)照組比較，WMD組輕度組和中重度組NF-kB和MBP水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。隨著WMD程度的加重，NF-kB和MBP水平逐漸升高(P<0.05)。中重度組WMD早產(chǎn)兒MDI評(píng)分和PDI評(píng)分均顯著低于輕度組(P<0.01)。NF-kB水平與MDI評(píng)分和PDI評(píng)分均呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)(r=0.736，r=0.648，P<0.05)。MBP水平與MDI評(píng)分和PDI評(píng)分均呈負(fù)相關(guān)(r=0.625，r=0.842，P<0.05)。結(jié)論：WMD早產(chǎn)兒NF-kB 和MBP水平顯著升高，且隨著WMD程度的加重，NF-kB和MBP水平越高；與MDI評(píng)分和PDI評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，提示出生后較高的NF-kB和MBP預(yù)示不良的PDI和MDI。

早產(chǎn)兒;腦白質(zhì)損傷;早期診斷;核轉(zhuǎn)錄因子-kB;髓磷脂堿性蛋白

早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷(WMD)包括局灶性和彌漫性，是一種由宮內(nèi)感染和缺血缺氧因素引起的腦白質(zhì)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞損傷。有文獻(xiàn)[1-2]報(bào)道，歐美國(guó)家早產(chǎn)兒腦損傷發(fā)生率為10%～50%，我國(guó)早產(chǎn)兒的發(fā)生率為9%，而25%的患兒可出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)發(fā)育延遲、協(xié)調(diào)能力差等情況，腦癱的發(fā)生率達(dá)10%。早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早干預(yù)、最大限度地降低早產(chǎn)兒腦損傷的致殘率是當(dāng)前新生兒領(lǐng)域里備受青睞的話(huà)題[3]。但早期腦損傷的臨床表現(xiàn)不明顯，僅憑臨床表現(xiàn)很難準(zhǔn)確評(píng)估WMD的病情。影像學(xué)檢查雖然有價(jià)值，但具有局限性，如患兒生命體征不穩(wěn)定或病情危重時(shí)不能及時(shí)進(jìn)行相關(guān)檢查，以致影響WMD的早期診斷和治療[4]。而腦損傷的特異性生化指標(biāo)物在疾病早期就有明顯的變化[5]。因此，本研究對(duì)本院收治的96例WMD早產(chǎn)兒進(jìn)行治療和隨訪(fǎng)，觀察其臍血核轉(zhuǎn)錄因子-kB(NF-kB)和髓磷脂堿性蛋白(MBP)水平及其與預(yù)后的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇邯鄲市婦幼保健院和河北磁縣人民醫(yī)院新生兒科2012年8月至2015年8月的住院治療并確診為WMD早產(chǎn)兒作為研究對(duì)象。胎齡25～36周；均符合早產(chǎn)兒腦損傷診斷與防治專(zhuān)家共識(shí)的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)出生時(shí)發(fā)育畸形的胎兒；(2)伴感染性疾?。簧窠?jīng)系統(tǒng)發(fā)育異常、壞死性小腸結(jié)腸炎、膽紅素腦病等嚴(yán)重合并癥者；(3)產(chǎn)前母親伴有影響妊娠結(jié)局的嚴(yán)重復(fù)雜疾病。根據(jù)頭顱核磁共振成像(MRI)將WMD組早產(chǎn)兒分為輕度組和中重度組。另選取同期30例正常早產(chǎn)兒作為對(duì)照組，胎齡25～36周。

1.2 方法

1.2.1 NF-kB和MBP水平的測(cè)定 所有早產(chǎn)兒均于娩出后取臍動(dòng)脈血2 mL，肝素抗凝，3 000 r/min離心10 min，離心半徑為7.5 cm。取上清液置于離心管中，-80℃冷藏保存待檢。

采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)檢測(cè)所有早產(chǎn)兒臍血NF-kB 和MBP蛋白表達(dá)水平。由一位專(zhuān)業(yè)醫(yī)師嚴(yán)格按照試劑盒使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.2.2 頭顱MRI檢查 所有早產(chǎn)兒均在出院前或矯正胎齡40周時(shí)行頭部MRI檢查。采用GE Signa 1.5T核磁共振儀，掃描參數(shù)設(shè)置：常規(guī)行橫斷面T2WI、T1WI、DWI，矢狀面T1WI掃描。

1.2.3 評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) WMD 診斷標(biāo)準(zhǔn)與分級(jí)：根據(jù)MRI的表現(xiàn)，將WMD分為3級(jí)：(1)輕度為T(mén)1 信號(hào)異常區(qū)域直徑<2 mm的數(shù)量≤3個(gè)；(2)中度為T(mén)1 信號(hào)異常區(qū)域直徑<2 mm的數(shù)量>3處；(3)重度為>5%腦半球受損。

隨訪(fǎng)至12個(gè)月齡時(shí)，采用Bayley嬰幼兒發(fā)育量表評(píng)估早產(chǎn)兒的運(yùn)動(dòng)發(fā)育指數(shù)(PDI)和智能發(fā)育指數(shù)(MDI)。MDI及PDI評(píng)分范圍為0～114分，85～114分之間為正常，70～84 分為可疑，<70分為異常。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 基本資料

入選WMD組早產(chǎn)兒100例，其中有4例在住院期間死亡，3例在隨訪(fǎng)中失訪(fǎng)，故最終93例納入統(tǒng)計(jì)分析。其中男性49例、女性44例；胎齡25～36周，平均胎齡(31.12±1.62)周；出生體質(zhì)量為1 289～3 040g，平均(1 801±356)g。輕度WMD組30例，中重度組63例。

入選對(duì)照組早產(chǎn)兒30例，其中男性19例、女性11例；胎27～36周，平均(31.66±1.43)周；出生體質(zhì)量為1 341～3 062g，平均(1 865±378)g，平均1分鐘Apgar評(píng)分為(8.0±0.6)分。

WMD組和對(duì)照組在性別方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。而胎齡、出生體質(zhì)量、1分鐘Apgar評(píng)分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 各組早產(chǎn)兒一般情況及NF-kB、MBP水平Bayley評(píng)估結(jié)果比較

項(xiàng)目WMD組輕度(n=30)中重度組(n=63)對(duì)照組(n=30)性別(男/女)17/1334/2919/11胎齡(周)33．22±1．32?30．45±1．68?31．66±1．43出生體質(zhì)量(g)2211±333?1790±363#1865±3781分鐘Apgar評(píng)分(分)7．05±0．656．21±0．848．0±0．6

*P<0.01，與對(duì)照組比較； #P<0.01，與輕度組比較。

2.2 WMD早產(chǎn)兒輕度組和中重度組NF-kB和MBP水平及12月齡發(fā)育情況比較

與對(duì)照組比較，WMD組輕度組和中重度組NF-kB和MBP水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。隨著WMD程度的加重，NF-kB和MBP水平逐漸升高。中重度組WMD早產(chǎn)兒MDI評(píng)分和PDI評(píng)分均顯著低于輕度組(P<0.01)；輕度組及中重度組患兒MDI異常的比例差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.3 WMD早產(chǎn)兒NF-kB和MBP與MDI和PDI評(píng)分的相關(guān)性分析

NF-kB水平與MDI評(píng)分和PDI評(píng)分均呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)(r=0.736，P<0.05；r=0.648，P<0.05)。見(jiàn)圖1、圖2。MBP水平與MDI評(píng)分和PDI評(píng)分均呈負(fù)相關(guān)(r=0.625，P<0.05；r=0.842，P<0.05)。見(jiàn)圖3、圖4。

表2 WMD早產(chǎn)兒輕度組和中重度組NF-kB和MBP水平及12月齡發(fā)育情況比較

項(xiàng)目WMD組輕度(n=30)中重度組(n=63)對(duì)照組(n=30)NF?kB(μg/mL)0．177±0．018?0．308±0．180?#0．110±0．022MBP(μg/mL)0．943±0．157?1．206±0．215?#0．634±0．114PDI83．59±7．36 65．95±6．23# -PDI異常[n(%)]8(26．67)36(57．14)#-PDI可疑[n(%)]15(50．00)11(17．46)#-MDI88．96±10．3268．86±6．23#-MDI異常[n(%)]6(20．00)39(61．90)#-MDI可疑[n(%)]11(36．67)12(19．05) -

*P<0.01，與對(duì)照組比較； #P<0.01，與輕度組比較。

3 討論

早產(chǎn)兒WMD 主要是由缺氧缺血和宮內(nèi)感染兩大因素所致，主要發(fā)生于胎齡在24～35周發(fā)育未成熟的早產(chǎn)兒，是目前早產(chǎn)兒腦損傷的最常見(jiàn)形式，可直接影響患兒的預(yù)后[7]。近年來(lái)雖然早產(chǎn)兒的存活率有了明顯改善，但早產(chǎn)兒腦損傷的發(fā)生率卻逐年增加。王樂(lè)等[8-9]對(duì)早產(chǎn)兒(404例)行B超檢查，發(fā)現(xiàn)腦損傷率37.1%，其中輕度腦損傷發(fā)生率23.5%，PVL發(fā)生率3.5%，且胎齡越小，體重越低，腦損傷發(fā)生率就越高。所以早期預(yù)測(cè)早產(chǎn)兒WMD的發(fā)生、早期進(jìn)行干預(yù)對(duì)提高其生活質(zhì)量意義重大[10]。

NF-kB是一類(lèi)核蛋白因子，普遍存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，具有多向轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用，也是引發(fā)氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，參與腦缺血再灌注等腦損傷的病理過(guò)程[11-12]。腦損傷后NF-kB的過(guò)度激活與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，而NF-kB轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的連接位點(diǎn)位于許多促炎因子和免疫調(diào)節(jié)因子的啟動(dòng)區(qū)，在細(xì)胞因子表達(dá)上調(diào)中起著重要作用[13]。本研究中WMD早產(chǎn)兒NF-kB水平較對(duì)照組明顯增強(qiáng)，且隨著腦損傷程度越嚴(yán)重，NF-kB水平增高，提示NF-kB在早產(chǎn)兒WMD過(guò)程中起著非常重要的作用。這一點(diǎn)與曹靜等[14]研究結(jié)果一致。

MBP是組成中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘的主要蛋白質(zhì)，具有神經(jīng)組織特異性，與髓鞘脂質(zhì)緊密結(jié)合，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘結(jié)構(gòu)和功能穩(wěn)定的維持方面起著重要作用[15]。 正常狀態(tài)下，腦組織中的MBP含量較低，不容易被檢測(cè)出，但當(dāng)腦損傷病變累及髓鞘時(shí)，MBP可被釋放到腦脊液和血液中去，從而導(dǎo)致其含量升高[16]。測(cè)定血清MBP水平可反映出腦損傷的嚴(yán)重程度及預(yù)后[17]。本研究隨著腦損傷程度越嚴(yán)重，MBP 水平越高，提示MBP在早產(chǎn)兒WMD過(guò)程中起著非常重要的作用。

本研究采用Bayley嬰幼兒發(fā)育量表對(duì)嬰兒的運(yùn)動(dòng)發(fā)育指數(shù)和智能發(fā)育指數(shù)進(jìn)行評(píng)估，并分析及NF-kB和MBP水平與MDI和PDI評(píng)分之間的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)中重度組WMD早產(chǎn)兒MDI評(píng)分和PDI評(píng)分均顯著低于輕度組，說(shuō)明隨著WMD加重，MDI及PDI評(píng)分逐漸遞減。NF-kB和MBP水平均與MDI評(píng)分和PDI評(píng)分均呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，則說(shuō)明NF-kB和MBP水平與早產(chǎn)兒的發(fā)育水平相關(guān)，出生后NF-kB和MBP水平高則預(yù)示運(yùn)動(dòng)發(fā)育和智能發(fā)育不良。

綜上所述，WMD早產(chǎn)兒NF-kB 和MBP水平顯著升高，且隨著WMD程度的加重，NF-kB和MBP水平越高，與MDI評(píng)分和PDI評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，提示出生后較高的NF-kB和MBP預(yù)示不良的PDI和MDI。

[1] Husseini N,Laskowitz DT.Clinical application of blood biomarkers in cerebrovascular disease[J].Expert Rev Neurother,2010,10(2):189-203.

[2] 楊芹,王少華.早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的發(fā)病機(jī)制及早期診斷方法的新進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2014,20(2):228-231.

[3] 葛書(shū)霞,陳新.早期中醫(yī)干預(yù)對(duì)新生兒腦損傷預(yù)后的改善作用[J].中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志,2015,18(4):28-29.

[4] 王智英.血清中NSE及MBP的檢測(cè)對(duì)早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的早期診斷與預(yù)后評(píng)估的意義[D].河北：河北醫(yī)科大學(xué),2013.

[5] 金越,施曉紅,王奮,等.不同腦白質(zhì)損傷早產(chǎn)兒S100B蛋白變化的動(dòng)態(tài)研究[J].中國(guó)新生兒科雜志,2015,30(2):124-126.

[6] 中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)新生兒專(zhuān)業(yè)委員會(huì).早產(chǎn)兒腦損傷診斷與防治專(zhuān)家共識(shí)[J].中國(guó)當(dāng)代兒科雜志,2012,14(12):883-884.

[7] 岑麗婷,劉振寰.早產(chǎn)兒腦損傷及干預(yù)的文獻(xiàn)綜述[C].中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)兒科分會(huì)第三十次學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編.2013.

[8] 王樂(lè),李明霞.早產(chǎn)兒腦損傷發(fā)生率調(diào)查及臨床分析[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,29(6):499-501.

[9] 鐘斌,余加林,孫群英,等.新生兒缺氧缺血性腦損傷早期的B超、CT和MRI表現(xiàn)比較[J].川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2008,23(1):50-54.

[10]張育賓,何建峰,陳章海.實(shí)施早期干預(yù)對(duì)早產(chǎn)兒腦損傷預(yù)后的療效觀察[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2014,12(16):103-104.

[11]Gordon JW,Shaw JA,Kirshenbaum LA.Multiple facets of NF-kB in the heart:To be or not to NF-kB[J].Circ Res,2011,108(9):1122-1132.

[12]于凌志,左艷麗,賈孟輝,等.核轉(zhuǎn)錄因子NF-KB對(duì)腦缺血再灌注干預(yù)機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志,2015,21(7):42-44.

[13]王慧卿,劉忠強(qiáng),肖東瓊,等.腦白質(zhì)損傷新生大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)的變化[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志,2012,27(2):87-90.

[14]曹靜,吳文新,尹建英,等.核因子-κB活性變化在早產(chǎn)兒腦室周?chē)踪|(zhì)軟化中的作用[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2009,24(11):865-866.

[15]雷宏濤,王小娟,趙智.血漿髓鞘堿性蛋白及S100B蛋白與新生兒腦損傷的關(guān)系[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2015,12(16):2442-2443.

[16]卓娜,蘭海霞.血清EPOR,IGF-1,MBP在新生兒腦損傷中的研究進(jìn)展[J].疾病監(jiān)測(cè)與控制雜志,2015,9(6):394-395.

[17]陳俊,何國(guó)厚,曾少波,等.急性腦梗死患者S100B、MBP動(dòng)態(tài)檢測(cè)的臨床意義[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2005,23(2):145-146.

(學(xué)術(shù)編輯：皮光環(huán))

本刊網(wǎng)址：http：//www.nsmc.edu.cn

作者投稿系統(tǒng)：http：//noth.cbpt.cnki.net

郵箱：xuebao@nsmc.edu.cn

Detection of umbilical cord blood NF-kB and MBP in early diagnosis of white matter damage in premature infants and its relationship with infants’ prognosis

WANG Zhi-ying1,HUO Hai-hua1,LV Hong-yan1,LI Qing-fang2

(1.DepartmentofNeonatology,HandanMaternityandChildCareCenter;2.DepartmentofPediatrics,CixianPeople’sHospital,Handan056000,Hebei,China)

Objective：To explore the early change of levels of umbilical cord blood nuclear factor-kB (NF-kB) and myelin basic protein (MBP) in premature infants with white matter damage (WMD) and its relationship with infants’ prognosis.Methods：The premature infants who were admitted and diagnosed with WMD were selected and divided into mild group and moderate-severe group according to cranial magnetic resonance imaging (MRI).Another 30 normal premature infants served as control group.Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the expression levels of NF-kB and MBP in the umbilical cord blood of premature infants.All infants were followed up for 12 months,and Bayley Scales of Infant and Toddler Development was applied to evaluate the psychomotive development index (PDI) and mental development index (MDI) of premature infants with WMD.The changes of the levels of NF-kB and MBP in premature infants with different-degree WMD as well as their correlation with MDI and PDI scores were analyzed.Results:Compared with control group,there were significant differences between mild group and moderate-severe group in the levels of NF-kB and MBP (P<0.05).The levels of NF-kB and MBP increased along with the aggravation of WMD (P<0.05).Moderate-severe group was evidently lower than mild group in MDI and PDI scores (P<0.01).NF-kB level was in negative association with MDI and PDI scores (r=0.736,r=0.648,P<0.05).Moreover,MBP level was also negatively associated with MDI and PDI scores (r=0.625,r=0.842,P<0.05).Conclusion:The levels of NF-kB and MBP increase notably in premature infants with WMD.The severer the WMD is,the higher the levels are.Both NF-kB and MBP are in negative association with MDI and PDI scores,indicating that higher levels of NF-kB and MBP may suggest poor PDI and MDI after infants’ delivery.

Premature infants;White matter damage;Early diagnosis;Nuclear factor-kB;Myelin basic protein

10.3969/j.issn.1005-3697.2017.04.011

河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題計(jì)劃(20150445)

2017-03-10

王智英，女(1975-)，副主任醫(yī)師。E-mail:wzywyw666@163.com

呂紅艷，E-mail:hdfylhy@126.com

時(shí)間：2017-8-15 11∶26 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20170815.1126.022.html

1005-3697(2017)-04-0518-04

R722.6

A