藥用鹵化丁基膠塞中兩種抗氧劑的測定

趙曼陜西能源職業技術學院

藥用鹵化丁基膠塞中兩種抗氧劑的測定

趙曼
陜西能源職業技術學院

目的建立高效液相色譜法同時測定藥用鹵化丁基膠塞中的抗氧劑1010和抗氧劑330。方法Agilent C18（250×4.6mm, 5μm）柱為色譜柱，以乙腈：四氫呋喃：水（55∶35∶10）作為流動相，流速為1.0ml/min，檢測波長為275nm。結果抗氧劑1010在0.003286～0.2103mg/ml范圍內線性關系良好，抗氧劑330在0.003138～0.2008mg/ml范圍內線性關系良好，兩種抗氧劑的回收率均大于85%，RSD均小于5.0%。結論本研究建立的高效液相色譜方法可滿足對抗氧劑1010和抗氧劑330的檢測需要，目前藥用鹵化丁基膠塞生產工藝中使用的抗氧劑種類較多，對于各種類型的抗氧劑的控制十分必要。

藥品包裝；鹵化丁基膠塞；抗氧劑；HPLC；檢測

藥品包裝影響藥品質量安全，與藥品直接接觸的包裝材料和藥品質量關系更為密切[1-2]。其中藥用鹵化丁基膠塞作為直接接觸藥品的包裝材料，因其具有耐化學腐蝕性好、耐酸堿和極性溶劑等諸多優越性能在臨床上得到廣泛使用。目前臨床上注射液及注射劑品種眾多，很大部分藥品包裝使用的是鹵化丁基膠塞[3-6]。鹵化丁基膠塞是一種高分子材料，其在許多方面因素的影響下會發生老化，因此在鹵化丁基膠塞的工藝生產過程中會加入抗氧劑改善其性能，抑制延緩其老化進程[7-9]。抗氧劑按結構可分為酚類、亞磷酸酯類、硫酯類、金屬離子類、天然抗氧劑等，由于其結構，可與藥物產生相互作用，影響藥物穩定性，另外抗氧劑還可能從包裝材料遷移到藥液中，影響患者用藥安全[10]。因此本研究建立了抗氧劑330、抗氧劑1010的檢測方法，考察藥用鹵化丁基膠塞中抗氧劑的添加情況，為藥用鹵化丁基膠塞的質量控制提供依據。

1.儀器與試劑

圖1 混合對照溶液圖譜

1.1 儀器液相色譜儀（LC-20A型，日本島津）紫外檢測器（SPD-20A型，日本島津）；紫外分光光度計（UV-1700型，日本島津）Agilent C18色譜柱（250×4.6mm,5μm）；柱溫箱（AT-330型，日本島津）；電子天平（AUY220型，日本島津）。

1.2 試劑四[β-（3，5-二叔丁基-4-羥基苯基）丙酸]季戊四醇酯，簡稱為抗氧劑1010；1,3,5-三甲基-2,4,6-三（3,5-二叔丁基-4-羥基芐基）苯，簡稱為抗氧劑330；兩種抗氧劑均購于EKEAR公司；本研究收集了6批藥用鹵化丁基橡膠塞包裝（購自某醫藥公司，兩種輸液瓶：0.9%氯化鈉輸液瓶，批號分別為20170101、20170102、20170103，葡萄糖輸液瓶，批號分別為20161228、20161229、20161230，各三批）；其余試劑均為分析純或者色譜純。

2.方法

2.1 檢測波長的選擇分別稱取兩種抗氧劑適量，加溶劑配制成對照品溶液，使用紫外分光光度計進行全波長掃面，選擇275nm作為檢測波長。

2.2 色譜條件的選擇經過多次調試，對流動相進行篩選，選擇流動相為乙腈：四氫呋喃：水=55∶35∶10，檢測波長為275nm，柱溫為35℃，流速為1.0ml/min，進樣量為20μl。

2.3 溶液制備

2.3.1 對照品溶液的制備

精密稱定抗氧劑1010、330適量，加流動相溶解稀釋，制備含抗氧劑1010、330含量分別約為1.0mg/ml的對照品溶液，作為對照品儲備溶液。

2.3.2 供試品溶液的制備

輸液包裝上藥用鹵化丁基橡膠塞取下，洗凈，常溫晾干，剪碎成顆粒。精密稱取膠塞顆粒1.0g,的包裝放入燒瓶中，加甲苯40ml，搖勻，加熱回流2小時，冷卻至50～60℃，攪拌加入甲醇40ml，過濾，用甲苯和甲醇的等比例混合液10ml清洗燒瓶和濾渣，合并后再加等比例混合液稀釋至100ml。取上述溶液50ml，水浴蒸干，用流動相溶解并定容至10ml，即為供試品溶液。同時，按照方法制備空白溶液。

圖2 空白溶液圖譜

3.結果

3.1 專屬性取對照品溶液和空白溶液，分別注入液相色譜儀中，記錄液相色譜圖，溶劑對三種抗氧劑的主峰沒有干擾，抗氧劑1010的出峰時間為10.900，抗氧劑330的出峰時間為13.700，見圖1-2。

3.2 線性精密量取“2.3.1”項下制備的對照品儲備溶液，依次加流動相稀釋并定容至刻度，得到線性系列對照溶液①-⑦，抗氧劑1010的濃度分別為0.2103、0.1052、0.05258、0.02629、0.013144、0.006572、0.003286mg/ml，抗氧劑330的濃度分別為0.2008、0.1004、0.0502、0.0251、0.01255、0.006275、0.003138 mg/ml。注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線，計算線性回歸方程。抗氧劑1010的線性回歸方程為y= 5E+06x+25379，r=0.9995；抗氧劑330的線性回歸方程為y=6E+ 06x+34570，r=0.9996；兩種抗氧劑的相關系數均大于0.999，表明抗氧劑1010在0.003286～0.2103mg/ml范圍內線性關系良好，抗氧劑330在0.003138～0.2008mg/ml范圍內線性關系良好。

3.3 檢出限與定量限

取“3.2”項下制備的系列線性溶液⑦，使用流動相進行逐步稀釋測定，檢出限信噪比S/N=3，定量限信噪比S/N=10，抗氧劑1010的檢出限為0.548ng，定量限為1.096ng，抗氧劑330的檢出限為0.552ng，定量限為1.095ng。

3.4 精密度

取“3.2”線性試驗項下對照溶液③對照品溶液，連續進樣6次，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。連續進樣6次，抗氧劑1010的峰面積RSD為1.5%，抗氧劑1010的峰面積RSD為0.8%，均小于2.0%，表明在該條件下兩種抗氧劑精密度良好。

3.5 穩定性試驗

取“3.2”線性試驗項下對照溶液③對照品溶液，分別在室溫放置0h和24h后，注入色譜儀。抗氧劑1010的峰面積RSD為1.7%，抗氧劑330的峰面積RSD為1.3%，均小于2.0%，表明在本實驗條件下，兩種抗氧劑在24h內穩定。

3.6 回收率試驗

取“2.3.1”項下制備的對照品儲備溶液，0.1、0.5、2.0ml分別加入樣品中，按照“2.3.2”項下供試品溶液的制備方法操作，每個濃度平行制備3份。注入色譜儀，記錄色譜圖。抗氧劑1010和抗氧劑330的平均回收率均大于85%，RSD小于5.0%，表明在本實驗條件下，兩種抗氧劑的提取回收率良好。結果見表1。

表1 兩種抗氧劑的回收率試驗結果

3.7 樣品測定

按照“2.3.2”項下供試品溶液的制備方法對6批藥用鹵化丁基膠塞進行處理，制備樣品供試液，按照上述色譜條件進樣，記錄色譜圖，樣品中兩種抗氧劑的含量測定結果見下表2。6批藥用鹵化丁基膠塞中兩種抗氧劑的含量均未檢出（小于檢出限）。

表2 藥用鹵化丁基膠塞中兩種抗氧劑的含量測定結果

4.討論

目前藥用鹵化丁基膠塞生產工藝中使用的抗氧劑種類較多，本實驗對抗氧劑1010和抗氧劑330進行初步研究，實驗中購買的市售0.9%氯化鈉注射液和葡萄糖注射液包裝所用的藥用鹵化丁基膠塞中抗氧劑1010和抗氧劑330的含量低于實驗方法的檢出限。另外，研究中也發現提取出其他未知物質，需要進行下一步的確證。市場上生產藥用輸液包裝的廠家眾多，并且質量參差不齊，對于各種類型的抗氧劑的控制十分必要。

[1]孫會敏,楊銳,張朝陽,等.2015年版《中國藥典》提升藥用輔料科學標準體系強化我國藥品質量[J].中國藥學雜志,2015,50（15）∶1353-1358.

[2]武瑞平.淺析藥品包裝[J].疾病監測與控制雜志,2016（9）∶772-772.

[3]李立根,張毅蘭.藥用膠塞及其與藥品的相容性簡述[J].中國醫藥工業雜志,2015,46（12）∶1366-1371.

[4]張宇.藥用丁基膠塞與藥物相容性研究現狀和展望[J].天津藥學,2010,22（1）∶72-74.

[5]郭志鑫,姜典財,黃志祿,等.藥用鹵化丁基膠塞質量狀況分析[J].藥物分析雜志,2011,31（2）∶399-401.

[6]鄭芳如,黃瑜,周蘭貞,等.丁基膠塞在注射劑領域中的選用策略[J].中國藥事,2016（2）∶137-140.

[7]浦雨偉,崔萍,吳娟,等.藥用丁基膠塞中抗氧劑264、1010、5057遷移研究[J].藥物分析雜志,2016,36（12）∶2231-2240.

[8]張蘆燕,王曼澤,王翔宇,等.聚丙烯瓶裝氯化鈉注射液中抗氧劑遷移量的測定[J].西北藥學雜志,2013,28（6）∶583-587.

[9]陳健,張桂云,梁進杰.聚丙烯中抗氧劑168含量的定量分析[J].塑料科技,2014,42（3）∶103-106.

[10]張磊,黃葆華.5%葡萄糖注射液中外源性抗氧劑的測定[J].安徽醫藥,2010（12）∶1400-1402.

趙曼（1989-），女，陜西西安人，本科，助教，研究方向為生物技術及應用。