三陰性乳腺癌中Lin28B的表達和臨床意義

施華球++謝瑞蓮

[摘要]目的 探討三陰性乳腺癌中Lin28B的表達情況及其臨床意義。方法 選取2008年1月～2013年12月我院收治的三陰性乳腺癌96例患者為觀察對象，采用免疫組織化學方法檢測癌組織和癌旁組織中Lin28B蛋白的表達，分析Lin28B蛋白表達與三陰性乳腺癌患者病理特征的相關性。結果 癌組織Lin28B的陽性率為70.8%，在癌旁組織Lin28B的陽性率為29.2%，兩者的陽性率差異有統計學意義（P<0.05）；Lin28B蛋白表達與三陰性乳腺癌患者的年齡、腫瘤分期和月經狀態無關（P>0.05），但與患者的腫瘤分化程度、遠處轉移、淋巴結轉移、Ki67表達成正相關（P<0.05）。結論 Lin28B的表達與三陰性乳腺癌的發生、發展有關，可能影響病情的發展和患者的預后。

[關鍵詞]三陰性乳腺癌；Lin28B；臨床意義

[中圖分類號] R737.9 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）07（c）-0036-03

Expression and clinical significance of Lin28B in triple-negative breast cancer

SHI Hua-qiu XIE Rui-lian

Department of Oncology，the First Affiliated Hospital of Gannan Medical College in Jiangxi Province，Ganzhou 341000，China

[Abstract]Objective To study the expression of Lin28B in triple-negative breast cancer （TNBC） and its clinical significance.Methods From January 2008 to December 2013，96 patients with TNBC treated in our hospital were selected as observation objects.The expression of Lin28B protein in cancer tissue and para-carcinoma tissue was detected by immunohistochemical method in order to analyze the correlation between Lin28B protein expression and pathological characteristics in patients with TNBC.Results The positivity rate of Lin28B from cancer tissue was 70.8% and in para-carcinoma tissue，its positivity rate was 29.2%，which was displayed statistical difference （P<0.05）.There was no relationship between Lin28B protein expression and age，the stage of tumor，and the condition of menstruation of patients （P>0.05）.The expression of Lin28B protein was positively correlated with tumor differentiation degree，distal metastasis，lymph node metastasis，Ki67 expression （P<0.05）.Conclusion The expression of Lin28B is related to the occurrence and development of TNBC，and may affect the development of disease and prognosis of patients.

[Key words]Triple negative breast cancer；Lin28B；Clinical significance

三陰性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）是指雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progestrone receptor，PR）[1]和原癌基因Her-2均表現為陰性的乳腺癌，占乳腺癌患者總數的12%～17%[2]。TNBC主要病理表現為組織學分級高、組織分化程度低，故其預后差、臨床復發率高、轉移率高、死亡率高；另外，由于TNBC患者體內缺少ER、PR、Her-2靶點，因此其對靶向治療不敏感，效果并不好[3-4]。本文重點研究Lin28B在三陰性乳腺癌中的表達，并探討其臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2008年1月～2013年12月我院收治并診斷為三陰性乳腺癌的96例患者作為觀察對象，均為女性，年齡31～56歲，平均（48.1±7.95）歲。TNBC的評價標準：ER（-）、PR（-）和Her-2（-）。ER和PR進行細胞核染色，免疫組織化學染色陽性細胞在10%以上者為陽性。Her-2免疫組織化學染色“-”或“+”為陰性，“+++”為陽性，“++”用色素原位雜交法（chromogen in situ hybridization，CISH）驗證。ER、PR和Her-2均陰性即定義為三陰乳腺癌，有任何一個陽性者即定義為非三陰乳腺癌。術前均未經放療、化療和免疫療法。

1.2 癌組織中Lin28B蛋白檢測

采用免疫組織化學方法檢測癌組織和癌旁組織中Lin28B蛋白的表達[5]。鼠抗人Lin28B單克隆一抗從Abcam公司（ab71415）購買，工作濃度1∶50，磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffer solution，PBS）代替一抗稀釋液作為陰性對照，具體染色實驗步驟依據試劑盒進行[6]。癌組織和癌旁組織每組4張切片，每張切片采用高倍顯微鏡選取5個視野進行計數，每個視野分別對100個腫瘤細胞進行計數。以陽性細胞染色深度作為評定標準，并計算陽性染色率。細胞膜或者細胞漿中出現棕黃色或者黃色的顆粒為陽性染色，當陽性染色細胞數/總細胞數≤10%時，為陰性表達（-），陽性細胞數/總細胞數>10%。

1.3病理特征分析方法

組織分化程度分為Ⅰ級（高分化，G1）、Ⅱ級（中分化，G2）、Ⅲ級（低分化，G3），分級愈高，惡性程度愈高。腫瘤分期基于原發腫瘤的大小，T1：<2 cm；T2：2～5 cm；T3：>5 cm；T4：腫瘤存在浸潤，如侵犯皮膚、胸腔。Ki67用免疫組織化學染色法檢測，檢測過程和結果判定按照Ki67檢測抗體（購自ABCA公司）說明書進行。陽性標準為細胞核內棕黃色顆粒，陽性細胞數<5%為陰性，>5%為陽性。

1.4統計學處理

數據采用SPSS 19.0軟件進行統計學分析，計量資料用x±s表示，采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，Lin28B蛋白表達與三陰性乳腺癌患者病理特征相關性采用Spearman相關性分析方法，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1 Lin28B蛋白的表達

在癌組織中Lin28B的陽性例數為68例（70.8%），陰性例數為28例（29.2%）；癌旁組織中Lin28B的陽性例數為17例（17.7%），陰性例數為79例（82.3%）。癌組織和癌旁組織中Lin28B表達的陽性率差異有統計學意義（P<0.05）。

2.2 Lin28B蛋白表達與三陰性乳腺癌患者病理特征的相關性分析

Lin28B蛋白表達與三陰性乳腺癌患者的年齡、腫瘤分期和月經狀態之間無關（P>0.05）；Lin28B蛋白表達與三陰性乳腺癌患者的腫瘤分化程度、遠處轉移、淋巴結轉移、Ki67表達均成正相關（P<0.05）（表1）。

3討論

近年來研究發現，Lin28B與癌癥的發生緊密相關，其在發育中的組織以及胚胎干細胞中的表達較高，伴隨著體內細胞的生長分化成熟，其表達量逐漸降低，最后直至消失。研究表明，在人類的腫瘤中Lin28B蛋白過表達情況比較多見，其表達異常較常見于腸癌、肝癌以及乳腺癌等疾病[8-9]。

目前的研究認為，Lin28B蛋白通過抑制let-7 microRNA來發揮促進腫瘤增殖的功能。let-7 家族通過作用于Lin28B、c-myc、K-RAS等原癌基因和cyclinD1/2等細胞周期蛋白抑制腫瘤增殖，促進腫瘤細胞凋亡。161例食管癌患者中關于let-7和Lin28B的研究表明，食管癌細胞中Lin28B的表達明顯高于非癌性細胞，對于腫瘤浸潤生長的區域其表達量更高[10-12]；食管癌患者生存預后差、淋巴結轉移等與Lin28B高表達具有相關性，let-7低表達也與Lin28B有關；多因素研究表明在食管癌中Lin28B是一種獨立預后因子；體內試驗表明，Lin28B特異性敲除后能夠降低癌細胞的侵襲以及轉移能力[13]。Lin28B蛋白能夠加速食管癌的進展，導致不良預后，而通過抑制Lin28B蛋白表達能夠降低食管癌細胞的侵襲和增殖能力，抑制癌細胞的生長。

本研究結果顯示，癌組織中Lin28B的表達高于癌旁組織（P<0.05），且Lin28B蛋白表達與患者的腫瘤分化程度、遠處轉移、淋巴結轉移、Ki67表達均呈正相關（P<0.05），因此，Lin28B的高表達可能與三陰性乳腺癌的發生、發展有關。Sakurai等的研究發現檢測26例患者的癌旁乳腺腺體，其中檢測到均有Lin28B蛋白，其中的16例患者的癌組織也有Lin28B蛋白表達，并且表達含量明顯高于癌旁組織[14]。另外，也有研究表明，在三陰性乳腺癌中Lin28B表達明顯上調，且Lin28B的高表達是促進炎癥通路的一部分，作用于NF-κB促進其表達，故Lin28B的高表達可能促進細胞由炎癥向惡性腫瘤的轉變[15]。

綜上所述，Lin28B的高表達可能與三陰性乳腺癌的發生、發展緊密相關，有可能會成為三陰性乳腺癌治療中新的治療靶點，但是由于研究臨床樣本太少，還需要大量的臨床研究進一步驗證。

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（收稿日期：2017-04-21 本文編輯：許俊琴）