腫瘤壞死因子α突變型斑馬魚在海分枝桿菌感染中的應用研究

謝玲玲，王風華，王德成，趙超，彭剛，牛辰

1. 復旦大學基礎醫學院醫學分子病毒學教育部/衛生部重點實驗室，上海 200032； 2. 復旦大學腦科學研究院，上海 200032； 3. 三峽大學醫學院，宜昌 443002

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·論著·

腫瘤壞死因子α突變型斑馬魚在海分枝桿菌感染中的應用研究

謝玲玲1，王風華2，王德成3，趙超1，彭剛2，牛辰1

1. 復旦大學基礎醫學院醫學分子病毒學教育部/衛生部重點實驗室，上海 200032； 2. 復旦大學腦科學研究院，上海 200032； 3. 三峽大學醫學院，宜昌 443002

腫瘤壞死因子α (tumor necrosis factor α，TNF-α)作為重要的炎性細胞因子，在類風濕關節炎、感染性休克等疾病的發病中起重要作用。為探究TNF-α在宿主抵抗海分枝桿菌感染中的作用，本研究采用成簇的規律間隔的短回文重復序列及其相關蛋白9〔clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/CRISPR-associated protein 9 (Cas9)，CRISPR/Cas9〕技術，使野生型斑馬魚TNF-α基因發生突變，成功構建并篩選出含有移碼突變的TNF-α突變型(TNF-α-/-)斑馬魚。利用原位雜交技術，發現TNF-α-/-斑馬魚中TNF-α mRNA表達水平顯著降低。與野生型斑馬魚相比，海分枝桿菌在TNF-α-/-斑馬魚體內擴散和增殖更顯著。結果提示，本研究成功構建TNF-α-/-斑馬魚，有助于深入探究TNF-α在斑馬魚抵抗海分枝桿菌感染中的作用及其免疫調節機制。

成簇的規律間隔的短回文重復序列及其相關蛋白9；腫瘤壞死因子α；突變型斑馬魚；原位雜交；細菌感染

腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)最早由 Carswell等在接種卡介苗(bacillus Calmette-Guérin，BCG)的小鼠中注射脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)后，于血清中發現的一種能殺傷某些腫瘤細胞或使體內腫瘤組織發生出血壞死的因子[1]。由巨噬細胞產生的TNF命名為TNF-α，其在細胞生長調控、細胞分化、炎癥、病毒復制、腫瘤、自身免疫疾病等方面發揮重要作用，可對抗病毒、細菌、真菌引起的感染[2-6]?！?br>