松樹皮中原花青素的提取及抗氧化作用研究

孔德冰

【摘 要】松樹皮中的提取物質作為天然抗氧化劑已成為當前研究的主要課題之一。本試驗以松樹皮為原料，采用超聲波輔助鹽酸-乙醇浸取法對原花青素進行提取，以原花青素的提取量為評價指標，研究超聲波作用時間、料液比、提取溫度和提取時間對原花青素提取量的影響。以花生油的過氧化值（POV）為評價指標，探索原花青素花生油的抗氧化作用。試驗結果表明，原花青素花生油均有一定的抗氧化作用。

【關鍵詞】松樹皮；原花青素；提取；抗氧化

松樹皮，分布極廣種類多，多數生長于我國的東北及華北地區，含有40種有效成分，其中以水溶性極高的原花青素居多。近年來隨著人們對黃酮類活性物質的研究加深，松樹皮的研究也愈來愈多，其高含量的抗氧化活性物質使松樹皮提取物具有得天獨厚的優勢，其中抗氧化活性物質可應用于諸如化妝品、食品等多個領域。松樹皮藥用價值高，具有散熱解暑，溫中止血，回陽通脈，燥濕消痰的功效。

一、材料與方法

（一）原材料

松樹皮，購于淘寶，產地吉林長白山，無蟲害、無糜爛；

豬油，購于澤航家農產品，正常肥豬肉煎制，不含任何添加劑；

胡姬花牌花生油，購于康樂購超市，產地山東青島。

（二）試驗方法

1.工藝流程

新鮮樹皮→預處理→超聲波乙醇浸提→過濾→2次浸提→合并濾液→減壓濃縮→色素濃縮液→測定吸光度→計算提取量

2.原花青素的提取

取一定量的松樹皮，切成小塊，在55℃下烘干過夜后將干松樹皮片磨成粉末，粉末用60目篩過篩備用。

稱取2g粉末，置于250mL錐形瓶中，按一定量的料液比加入提取劑（鹽酸：乙醇（V：V）=1：9，鹽酸為2M），超聲波作用一定時間后，在一定水浴溫度下提取一定的時間，之后按提取流程進行吸光度測定。

原花青素提取量（mg/g）=1000AV/abm。其中：A為吸光度；V為濃縮液的體積；a為原花青素的吸光系數（0.0775L/（g.cm））；b為液層厚度（1cm）；m為樣品質量。

3.豬油和花生油過氧化值的檢測

在50g豬油和花生油中分別加入1%的松樹皮原花青素濃縮液，充分搖勻，對照組不加濃縮液，置于室溫下，分別于第0d，第3d，第6d，第9d，第12d測量豬油和花生油的過氧化值，并進行空白檢測。過氧化值檢測方法如下：精密稱取油脂2-3g并注入250mL錐形瓶中，水浴中加熱溶解，加入氯仿-冰乙酸混合物30mL，立即震蕩并溶解。加入飽和碘化鉀1mL，在暗處放置3min，取出后加水5mL，搖勻后立即用0.005M硫代硫酸鈉進行滴定至淡黃色，加淀粉指示劑1mL，繼續滴定至藍色消失為止，記錄使用的硫代硫酸鈉的體積為V1，同時做不加油脂的空白試驗記錄使用的硫代硫酸鈉體積為V2，平行三次試驗。

過氧化值的計算： POV=（V1-V2）×0.005×0.1269/m×100

式中：V1-三次試驗中消耗硫代硫酸鈉的平均值；V2-三次試驗中空白對照消耗硫代硫酸鈉的平均值；0.005-硫代硫酸鈉的濃度；0.1269-消耗1mL硫代硫酸鈉相當、于碘的量；m-試樣質量。

（三）單因素試驗

通過對乙醇提取原花青素工藝的研究，以原花青素提取量為評價標準，進行單因素試驗，對超聲波作用時間、料液比、提取溫度和提取時間四個因素對原花青素提取量的影響進行研究。

1.超聲波作用時間對提取量的影響

采用超聲波作用時間為5min、10 min、15 min、20 min、25 min共5個時間。按1：15加入提取劑，55℃水浴中提取2h，抽濾后濾渣進行2次浸提濾渣，合并濾液，減壓濃縮得到較為純凈的原花青素。以提取量為評價指標進行評定。

2.料液比對提取量的影響

分別按照料液比為1：10、1：15、1：20、1：25、1：30的比例加入提取劑，選用最佳超聲波作用時間，55℃水浴中提取2h，抽濾后濾渣進行2次浸提，合并濾液，減壓濃縮得到較為純凈的原花青素。以提取量為評價指標進行評定。

3.提取溫度對提取量的影響

采用提取溫度（水浴溫度）45℃、50℃、55℃、60℃和65℃，最佳超聲波作用時間和最佳料液比進行試驗，水浴中提取2h，抽濾后濾渣進行2次浸提濾渣，合并濾液，減壓濃縮得到較為純凈的原花青素。以提取量為評價指標進行評定。

4.提取時間對提取量的影響

采用提取時間為1.0h、1.5h、2.0h、2.5h和3.0h 共5個配比，按照上述三個單因素的最佳條件進行提取，抽濾后濾渣進行2次浸提濾渣，合并濾液，減壓濃縮得到較為純凈的原花青素。以提取量為評價指標進行評定。

二、花生油過氧化值的檢測結果

圖1反映的是未添加原花青素的空白組和添加1%原花青素的對照組在時間作用下POV值的變化。由該圖可知，隨著時間的增長，添加原花青素的花生油明顯比未添加原花青素的花生油的POV值更低，說明其被氧化的程度更低；并且隨著時間的延長，原花青素的抗氧化作用越來越明顯。因此，原花青素對花生油有著一定的抗氧化作用。

三、結論

本試驗是以松樹皮為原料，采用鹽酸-乙醇作為提取劑，以原花青素的提取量為評價指標，探索原花青素的最佳提取工藝。通過試驗，得到最佳的提取工藝條件為：超聲波作用時間為20min，料液比為1：25，提取溫度為55℃，提取時間為3h，在該工藝條件下原花青素的提取量可以達到3.0mg/g。將原花青素用于花生油的抗氧化試驗中發現，添加原花青素的油脂比起未添加的油脂明顯被氧化的程度更低，說明原花青素對油脂有一定的抗氧化作用。

參考文獻：

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