結核病患者血清細胞因子檢測的臨床意義*

席向宇，王炳花

（1.徐州市傳染病醫院，江蘇徐州221004；2.徐州醫科大學，江蘇徐州221004）

結核病在一定程度上屬于免疫紊亂性疾病，存在多種細胞因子的異常變化。其中，腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）、人白細胞介素 12 （interleukin，IL-12）、人白細胞介素18（interleukin，IL-18）和干擾素-γ （interferon，IFN-γ）等細胞因子在結核病中起一定的作用，調節結核病的免疫反應過程。但是，迄今為止，關于以上細胞因子在肺結核患者及正常對照血清中的表達及其作用國內外甚少報道。因此，本研究利用酶聯免疫法（ELISA）測定肺結核患者及正常對照組血清中TNF-α、IL-12、IL-18和IFN-γ等細胞因子水平的變化情況，并探討這些細胞因子在肺結核發病過程中所起的作用。

1 材料與方法

1.1 材料

TNF-α、IL-12、IL-18和IFN-γ酶聯免疫分析試劑盒購于微科曼得生物工程有限公司。

1.2 血清標本

選擇60例肺結核患者，所有患者的診斷均符合中華醫學會結核病學分會2000年制定的《肺結核診斷和治療指南》，隨機選取60例正常來本院體檢者，性別、年齡等主要因素與病例組相匹配。

1.3 方法

抽取研究對象的靜脈血2 mL，3000 r/m離心15 min，收集上層血清。按照ELISA試劑盒操作步驟檢測血清中細胞因子的水平。

1.4 統計學方法

應用SPSS16.0軟件進行統計分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較選擇t檢驗，以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清TNF-α的比較

與對照組相比，結核組血清中TNF-α的濃度高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 不同研究對象血清 TNF-α、IL-12、IL-18、IFN-γ 的水平 （±s） ng/L

表1 不同研究對象血清 TNF-α、IL-12、IL-18、IFN-γ 的水平 （±s） ng/L

組別結核組（n=60）對照組（n=60）t P TNF-α 71.32±13.91 36.45±8.76 16.45 0.000 IL-12 14.26±10.78 7.28±1.74 3.09 0.005 IL-18（ng/L）17.83±5.48 9.10±2.18 10.22 0.000 IFN-γ（ng/L）59.42±14.92 30.34±7.25 13.58 0.000

2.2 兩組血清IL-12的比較

與對照組相比，結核組血清中IL-12的濃度高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

2.3 兩組血清IL-18的比較

與對照組相比，結核組血清中IL-18的濃度高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

2.4 兩組血清IFN-γ的比較

與對照組相比，結核組血清中IFN-γ的濃度高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

3 討論

TNF-α為前炎細胞因子，由單核巨噬細胞和淋巴細胞所產生，TNF-α可上調黏附分子表達，增加同型和異型細胞間黏附作用；促進巨噬細胞活化，增強其吞噬作用；參與肉芽腫形成，從而在結核分枝桿菌感染中起保護作用。然而，TNF-α也可導致組織壞死、空洞形成。有報道發現，空洞肺結核患者的支氣管沖洗液中TNF-α的水平明顯高于無空洞組[1]。也有研究[2]發現肺結核患者血液中TNF-α的表達明顯高于對照組。有研究者[3]對肺結核患者抗結核治療后發現，治療后血清中TNF-α的含量要低于治療前。本研究發現，結核病患者血清中TNF-α的水平明顯高于對照組，和前面文獻報道結果一致。

IL-12是重要的免疫調節因子，其主要功能就是誘導早期輔助性細胞 (helper T cell，Th)向Thl分化，并促進分泌相應細胞因子。其免疫學特性包括增加IFN-γ的產生和NK細胞、T細胞的細胞毒活性等。大量研究證實，IL-12作為Thl應答增強劑，在控制結核感染中具有不可替代的地位。而關于機體感染結核桿菌后，血清中IL-12水平的高低不同的研究者有各自不同的結論[4-5]。而且由于IL-12的基因多態性與結核之間有很強的易感性，所以目前用于疫苗研制比較多。本研究結果發現，結核患者血清中IL-12的含量也是明顯高于對照組，提示該細胞因子用于結核的免疫療法有一定前景。

IL-18最早是在1995年Okamurals等[6]從熱滅活的丙酸桿菌致敏后再注射脂多糖 (LPs)的裸鼠肝細胞中分離并克隆出來，由于這種細胞因子能誘導Th1等細胞產生INF-γ，故命名為IFN-γ誘導因子 (IGIF)。后根據其蛋白結構和功能，改稱為IL-18。IL-8是一個多效型細胞因子，主要介導Th1型細胞免疫反應，它能誘導T細胞增殖，誘導其產生IFN F-γ，具有抗炎及抗腫瘤的作用，其與IL-12一樣也是Th1反應出現的早期信號。外周血單一核細胞所產生的IL-18和IFN-γ的產生密切相關，兩者均有助于增強對抗結核的免疫反應，提示IL-18可以強化結核病患者的Th1類反應[7]。有研究發現[8]，不管是初治組、復治組，Ⅲ型還是Ⅳ型患者，IL-18血清中含量與胸水中含量都沒有顯著性差異。也有研究發現[9]，結核性、惡性胸水患者胸水IL-18濃度顯著高于血清IL-18濃度，與惡性胸水相比較，結核性胸水所檢測到的IL-18水平顯著增高。本研究發現，與對照組相比，結核患者血清中IL-18的水平依然是顯著升高的，故動態監測血清IL-18水平，可作為評估肺結核病變活動性及抗結核藥物治療效果的敏感指標。

IFN-γ是由Th1細胞分泌的免疫調節因子，激活單核細胞，使單核細胞在病灶周圍積聚，控制感染擴散，有助于結核肉芽腫形成，同時增強巨噬細胞的殺菌作用，在抗結核免疫中起著重要作用。有文獻報道[10]，血清IFN-γ水平在抗結核治療前后無顯著變化，也有文獻報道[11]，肺結核病患者血清水平高于肺癌組和健康對照組，而且與病情輕重有關。本研究發現，相對對照組，結核病患者血清中IFN-γ的含量明顯升高，說明機體一旦感染結核后，可刺激巨噬細胞產生更多的IFN-γ來保護機體抵抗結核桿菌的侵襲。

綜上所述，細胞因子的水平一定程度上能反映患者的免疫狀態，其變化趨勢不僅可判斷患者的預后，也可作為判斷藥物療效的依據。因此，在進行抗肺結核治療時動態觀察細胞因子水平，有利于監測肺結核病情的轉歸，利用細胞因子的變化趨勢，可以預知該治療方案有效與否。

[1]KUPELI E,KAMAK D,BEDER S,et al.Diagnostic accuracy of cytokine levels(TNF-α、IL-2 and IFN-γ)in bron-choalvcolar lavage fluid of smcar-negtive pulmanary tube-rculosispatients[J].Respiration，2008,75(1):73-78.

[2]趙英杰.肺結核患者血液中VEGF、TNF-α和IL-6的表達研究[J].中國衛生檢驗雜志，2013,23(17):3388-3393.

[3]夏小學，陳江，盧火 ，等.抗結核治療對肺結核病患者血清TNF-α、IFN-γ、I L-10和 IL-17表達差異的影響[J].中國微生物學雜志，2013,25(3):306-308.

[4]杜娟，鄧冰，桂坤，等.肺結核患者血清白細胞介素IL-12、13D水平的臨床研究[J].臨床內科雜志，2005,22(6):409-410.

[5]奚瑩，王莉.肺結核患者血清白細胞介素12水平檢測及臨床意義[J].中國感染控制雜志，2012,11(2):109-133.

[6]OKAMURA H,TSUTSI H,KOMATSU T,et al.Cloning of a new cytokine that induces IFN-gamma production by T cells.Nature,1995:378:58-91.

[7]VANKAYAPATI R,WIZEL B,WEIS S E,et al.Production of interleukin-18 in human tuberculosis[J].J Infect Dis,2000,182:234-239.

[8]張曼，邵燕麗.結核性胸腔積液病人IL-12、IL-18、TNF-α的水平及變化[J].現代醫藥衛生，2009,25(24):3693-3695.

[9]巫艷彬.胸腔積液白介素-18的水平及意義[D].桂林：廣西醫科大學，2004.

[10]郭淑湘，馬冬梅，劉慧芳，等.肺結核患者血清干擾素-γ、白細胞介素-18和骨橋蛋白水平的動態變化及臨床意義 [J].實用醫學雜志，2013,29(4):562-564.

[11] 李紅，唐神結.肺結核患者外周血 sIL-2R、TNF-α、IFN-γ、IL-6的檢測及意義[J].中國防癆雜志，2011,33(1):57-60.