淋巴結病理組織免疫組化技術與標準化操作方法探討①

王雅萍

(洛陽市第三人民醫院，河南 洛陽 471000)

淋巴結病理組織免疫組化技術與標準化操作方法探討①

王雅萍

(洛陽市第三人民醫院，河南 洛陽 471000)

目的：探析淋巴結病理組織免疫組化技術與標準化操作方法。方法：對2014-10～2016-05我院收治的83例淋巴結患者的臨床資料予以回顧性分析，根據計算機數表法分為2組，即觀察組(n=42)、對照組(n=41)。觀察組患者給予免疫組化染色與標準化淋巴結組織HE片穿刺，對照組患者未給予標準化淋巴結組織HE片穿刺，觀察比較2組患者免疫組化染色切片的情況。結果：觀察組患者免疫組化染色切片的優良率是95.2%，明顯高于對照組患者的56.1%，組間對比差異明顯(P<0.05)。結論：通過病理組織免疫組化技術的應用，可明顯提高染色切片的優良率，為診斷患者病情提供了可靠參考，值得臨床廣泛應用與普及。

淋巴結；病理組織；免疫組化技術；標準化操作方法

免疫組化技術指的就是利用免疫學及組織化學原理，對組織切片或者細胞標本中某些化學成分予以原位定位、定性或定量研究的技術[1]，其主要包括免疫細胞化學與免疫組織化學[2]。為了探討淋巴結病理組織免疫組化技術與標準化操作方法的應用效果，本文主要對我院收治的83例淋巴結患者的臨床資料予以研究，現總結報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

對2014-10～2016-05我院收治的83例淋巴結患者的臨床資料予以回顧性分析，根據計算機數表法分為2組，即觀察組(n=42)、對照組(n=41)。83例患者中，女39例，男44例；年齡19～79歲，平均為(47.2±6.7)歲；淋巴結部位：頸部淋巴結33例，鎖骨下淋巴結28例，腹膜后淋巴結22例。統計分析2組患者的一般資料可知，對比差異不明顯(P>0.05)，可進行比較。2組患者均知曉本次研究目的，且自愿簽署知情同意書，符合倫理學要求。

1.2 方法

觀察組患者給予免疫組化染色與標準化淋巴結組織HE片穿刺，對照組患者未給予標準化淋巴結組織HE片穿刺，相關操作如下。

1.2.1 標準化淋巴結組織HE片

根據有關標準要求，取材時應嚴格控制組織厚度，最好約為0.18cm。在淋巴結組織離體之后，置于4%的中性甲醛中，并予以固定，如果在1例標本中發現較多的穿刺組織，應用過濾紙包好每條組織，并置于脫水盒中，保證包埋程序時組織位于同一平面。切片厚度定為2.5μm，并將每張蠟片切成7片，對其中一張蠟片切片予以染色成HE切片，并涂在載玻片上，為免疫組化做好準備。

1.2.2 免疫組化技術

對切片予以常規脫蠟，置于水中。取3%的甲醇液于室溫條件下作用一段時間，之后用清水與蒸餾水清洗切片。取pH為6.0的檸檬酸1100mL置于高壓鍋中，并蓋好，加熱2min后停止，使其自然冷卻，之后從溫室中取出。用PBS進行沖洗，需沖洗2次，2min/次。添加二抗，在DAB顯色時可停止添加，比較抗體陰陽性。

1.3 觀察指標

免疫組化染色切片優良率評定標準：組織結構未被破壞，準確定位陽性物質，存在清晰、干凈的背景，無特殊著色與脫色情況，具有高度的敏感性與特異性[3]。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 對2組患者的一般資料進行比較

在性別、年齡、淋巴結部位方面，2組患者對比無明顯差異(P>0.05)，見表1。

表1 對2組患者的一般資料進行比較

2.2 對2組患者的染色切片優良率進行對比

觀察組患者免疫組化染色切片的優良率是95.2%，明顯高于對照組患者的56.1%，組間對比差異明顯(P<0.05)，見表2。

表2 對2組患者的染色切片優良率進行對比[n(%)]

3 討論

現階段，免疫組化技術取得了很大的進步，敏感性非常高。在起步階段，免疫組化技術遇到了很多障礙，特別是技術限制特別多，致使其未能充分發揮自身作用[4]。以往抗體稀釋程度較低，最多只能稀釋幾十倍，隨著醫療技術水平的逐步提升，抗體稀釋程度越來越大，可達到上萬倍，并且抗體敏感性也得到了很大的提升[5]。目前，因為實驗室缺乏明確、統一的標準，導致免疫組化技術結果差異較大，由此說明，設定一個明確、統一的標準，有利于進一步完善免疫組化技術，充分發揮其作用[6，7]。此外，免疫組化結果易受多種因素的干擾，其中抗原修復標準化最為重要。在以往操作中，均利用微波加熱法修復抗原，而現在，均利用高壓鍋加熱法予以修復，可更好的控制加熱時間，染色效果更佳[8，9]。本文研究結果顯示：觀察組患者免疫組化染色切片的優良率是95.2%，明顯高于對照組患者的56.1%，組間對比差異明顯(P<0.05)。此研究結果與彭鳳英[10]的文獻報道非常近似，即觀察組患者免疫組化切片的優良率是94.9%，對照組患者免疫組化切片的優良率是53.8%，2組對比差異明顯(P<0.05)。由此可以看出，只有通過標準化操作才可以有效提高免疫組化技術的檢測結果，充分發揮其自身作用，便于進一步了解患者病情，臨床應用價值非常高。總而言之，通過病理組織免疫組化技術的應用，可明顯提高染色切片的優良率，為診斷患者病情提供了可靠參考，值得臨床廣泛應用與普及。

[1]馬喆,王洪巖,袁東輝,等.病理免疫組化質量控制過程中應注意的幾點[J].診斷病理學雜志,2015,22(3):187

[2]張睿,朱正鵬,馬健波,等.淋巴結免疫組化制片技術體會[J].臨床與實驗病理學雜志,2015,4(2):220-221

[3]劉洪博,王文智,邱雷,等.雙重免疫組化技術檢測胃低分化腺癌誤診為淋巴瘤一例[J].天津醫藥,2013,16(8):762

[4]陳世梁,盧志承,陳春吉,等.10%中性緩沖福爾馬林固定組織HE染色的改良方法[J].臨床與實驗病理學雜志,2014,30(8):933-934

[5]陶成云.病理診斷中免疫組化技術的應用研究[J].大家健康(下旬版),2016,10(8):152-153

[6]郭晉.病理組織的免疫組織化學技術分析[J].航空航天醫學雜志,2014,8(4):473-474

[7]郭海燕,郭黎黎,王志生,等.組織病理診斷中應用免疫組化技術的價值分析[J].中國繼續醫學教育,2015,10(5):177

[8]薛衛成,樊祥山,孟剛(整理),等.胃癌相關標志物免疫組化指標選擇專家共識(2014)[J].臨床與實驗病理學雜志,2014,18(9):951-953

[9]管沛璇.免疫組化技術在病理診斷中的應用思考[J].中國醫藥指南,2014,17(34):54-55

[10]彭鳳英.病理組織免疫組化技術的研究[J].吉林醫學,2014,6(12):2615

王雅萍(1975～)女，河南孟津人，主管技師。

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1008-0104(2017)02-0152-02

2016-07-12)