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B7-H4與RRM2在卵巢腫瘤患者中的表達(dá)及臨床意義①

2017-06-05 14:21:38孫盛梅牟媛媛
黑龍江醫(yī)藥科學(xué) 2017年2期

孫盛梅,牟媛媛

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科,黑龍江 佳木斯154003)

B7-H4與RRM2在卵巢腫瘤患者中的表達(dá)及臨床意義①

孫盛梅,牟媛媛

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科,黑龍江 佳木斯154003)

目的:探討B(tài)7-H4與RRM2在卵巢腫瘤組織中的表達(dá)及其臨床指導(dǎo)意義。方法:運(yùn)用免疫組織化學(xué)法測(cè)定B7-H4與RRM2蛋白在10例正常卵巢組織、20例卵巢良性腫瘤組織、8例交界性卵巢腫瘤組織以及30例上皮性卵巢癌組織中的表達(dá),并分析二者的相關(guān)性。結(jié)果:B7-H4與RRM2蛋白在卵巢癌組陽性表達(dá)率顯著高于正常組、良性組、交界組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。B7-H4的表達(dá)與病理分期、組織分化及組織類型相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。RRM2的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、細(xì)胞分化有關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:①B7-H4與RRM2的高表達(dá)與上皮性卵巢癌的發(fā)生有關(guān);②B7-H4與RRM2對(duì)上皮性卵巢癌具有協(xié)同性表達(dá)作用;③上皮性卵巢癌分期越晚、分化越差,B7H4與RRM2表達(dá)越高。

B7-H4;RRM2;卵巢腫瘤;免疫組織化學(xué)

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和國家醫(yī)療政策的完善,人們對(duì)健康意識(shí)的概念越來越強(qiáng),由原來的治病到防患于未然。對(duì)女性來說,健康的最大威脅是生殖系統(tǒng)的腫瘤疾病,其中卵巢的腫瘤最為常見,其致死率最高的要屬上皮性卵巢惡性腫瘤[1],了解卵巢惡性腫瘤的發(fā)病機(jī)制和尋求有效的腫瘤免疫標(biāo)記物,對(duì)于改善卵巢腫瘤患者的預(yù)后具有積極的意義。在抵抗腫瘤細(xì)胞中具有顯著意義的是T系淋巴細(xì)胞,B7家族是T淋巴細(xì)胞的協(xié)同刺激因子,與T細(xì)胞的結(jié)合位點(diǎn)是其細(xì)胞表面的相應(yīng)受體[2],作用機(jī)制是以活化T細(xì)胞和細(xì)胞耐受通過向T細(xì)胞輸送協(xié)同刺激信號(hào)。研究者采用生物信息學(xué)的途徑發(fā)現(xiàn)T淋巴細(xì)胞的協(xié)同刺激因子的新成員—B7-H4。B7-H4可以抑制增殖T細(xì)胞,阻斷細(xì)胞生長周期,還能弱化甚至抑制某些細(xì)胞因子的釋放以減少細(xì)胞的凋亡,研究還表明B7-H4在腫瘤上皮細(xì)胞內(nèi)的高表達(dá)還可促進(jìn)細(xì)胞上皮的惡性轉(zhuǎn)歸。卵巢癌的發(fā)生發(fā)展決定于多基因,其組織類型和臨床分期與治療手段和預(yù)后緊密相關(guān)[3]。在基因中DNA的合成過程中核糖核苷酸還原酶(ribonucleotidereductase,RR)是關(guān)鍵酶,該酶對(duì)細(xì)胞分裂、增殖及分化具有至關(guān)重要的意義,更有助于細(xì)胞的生存。RRM2不僅具有RR的活性,也是該酶組成的重要部分,與一系列癌基因均有協(xié)同作用,共同促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)化及腫瘤形成。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 對(duì)象及標(biāo)本

選取我院2014-06~2015-12入住婦產(chǎn)科的患者卵巢組織標(biāo)本共68例,其中10例正常卵巢組織,20例卵巢良性腫瘤組織,8例交界性卵巢腫瘤組織以及30例上皮性卵巢癌組織?;颊咝g(shù)前未做任何治療并排除其他系統(tǒng)腫瘤疾病。所有患者的臨床資料均詳細(xì)完整,年齡16~68歲。 病理診斷均經(jīng)病理科醫(yī)師證實(shí),所有標(biāo)本取下后常規(guī)固定等程序后備用。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)用品

兔抗人B7-H4抗體及兔抗人RRM2抗體,超凈工作臺(tái),恒溫箱,顯色劑,抗體稀釋液。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法1.2.1 免疫組化步驟

通過病歷號(hào)選取病理科存檔的蠟塊切片脫蠟、封閉、滴加兔抗人B7-H4、RRM2,然后加二抗,顯色,復(fù)染,最后脫水、封片。陽性參照物為已知的卵巢癌切片,PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.2.2 結(jié)果判定

B7-H4蛋白在卵巢組織中主要有細(xì)胞漿及細(xì)胞膜陽性表達(dá),B7-H4染色分析計(jì)數(shù):全面觀察每張切片,以細(xì)胞漿內(nèi)、細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色顆粒為評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)陽性細(xì)胞所占比例判定,陽性細(xì)胞<10%者為(-),10%~25%者為(+),26%~50%者為(),>50%為()。RRM2主要有胞漿陽性表達(dá),最終判定:染色陽性細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞比例<25%者為(-),26%~50%者為(+),51%~75%者為(),>75%為 ()。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,B7-H4與RRM2表達(dá)情況采用方差分析,各相關(guān)因素比較用秩相關(guān),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1B7-H4在卵巢腫瘤和正常卵巢組織中的表達(dá)

B7-H4蛋白主要有細(xì)胞漿及細(xì)胞膜陽性反應(yīng)。B7-H4在正常卵巢組織、卵巢良性腫瘤組織、卵巢交界性腫瘤組織及卵巢癌組織中比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=35.818,P<0.01)見表1。

表1 卵巢腫瘤組織和正常卵巢組織中B7-H4的表達(dá)情況(例)

2.2RRM2在卵巢腫瘤和正常卵巢組織中的表達(dá)

RRM2主要有胞漿陽性反應(yīng)。RRM2在正常卵巢組織、卵巢良性腫瘤組織、卵巢交界性腫瘤組織及卵巢癌組織中比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=31.719,P<0.01)見表2。

2.3B7-H4及RRM2在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)情況

根據(jù)免疫組化結(jié)果及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,B7-H4表達(dá)的高低與臨床分期(χ2=5.963,P<0.05)、組織分化(χ2=4.802,P<0.05)、組織類型(χ2=5.487,P<0.05)有關(guān),而與年齡(χ2=1.06,P>0.05)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(χ2=0.215,P>0.05)無關(guān)。RRM2表達(dá)與臨床分期(χ2=5.834,P<0.05)、組織分化(χ2=6.429,P<0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(χ2=4.537,P<0.05)有關(guān),而與年齡(χ2=0.023,P>0.05)及組織類型(χ2=0.085,P>0.05)無關(guān),見表3。

表2 卵巢腫瘤組織和正常卵巢組織中RRM2的表達(dá)情況(例)

表3 B7-H4及RRM2在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)情況

2.4 上皮性卵巢癌組織中B7-H4與RRM2之間的關(guān)系

經(jīng)分析B7-H4與RRM2表達(dá)正相關(guān)(r=0.558,P<0.01)。見表4。

表4 皮性卵巢癌組織中B7-H4和RRM2表達(dá)的關(guān)系

3 討論

在女性生殖系統(tǒng)腫瘤中,致死率最高的是卵巢惡性腫瘤,組織類型最常見的是上皮性卵巢癌。盡管常規(guī)健康普查日趨完善,以外科手術(shù)為主以及化學(xué)治療等輔助治療技術(shù)的實(shí)施,但患者的死亡的主要原因是病變的復(fù)發(fā)以及轉(zhuǎn)移,使其病死率一直居高不下。最主要的原因就是缺乏早期臨床診斷標(biāo)志物,75%患者被診斷為卵巢癌時(shí),腫瘤已浸潤至卵巢外[4],為發(fā)展至臨床分期的Ⅲ期或Ⅳ期,5年存活率僅為5%~20%。假如卵巢腫瘤惡性病變僅局限于卵巢,通過手術(shù)等治療,5年存活率可高至85%~95%,所以探索為之有效的卵巢癌臨床診斷標(biāo)志物已成為熱點(diǎn)。

B7-H4負(fù)反饋于T細(xì)胞主要是經(jīng)過對(duì)T細(xì)胞的增殖受到抑制、影響細(xì)胞因子(如IL-2等)的生長和調(diào)節(jié)細(xì)胞生長周期來實(shí)現(xiàn)。加強(qiáng)B7-H4蛋白表達(dá)可能導(dǎo)致腫瘤免疫因子逃逸從而與卵巢癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[5],B7-H4有可能是促癌基因。卵巢癌的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,可能由多基因的行為改變和遺傳學(xué)的異常決定,與組織細(xì)胞的分裂、增殖及分化密切相關(guān)[6],脫氧核糖核酸參與了這一系列的生物行為,RRM2是脫氧核糖核酸的關(guān)鍵酶核糖核苷酸還原酶的重要組成成分,其作用是促使其細(xì)胞轉(zhuǎn)化和形成腫瘤細(xì)胞。

目前,卵巢癌的發(fā)病率呈逐年遞增趨勢(shì),但臨床診斷率卻仍較低,研究其發(fā)病機(jī)制及探索其有效的診斷免疫標(biāo)志物刻不容緩。根據(jù)p53信號(hào)通路的參考途徑,RRM2的位點(diǎn)位于p53信號(hào)通路中下游分支,研究表明B7H4和p53的聯(lián)合檢測(cè)更有助于胃癌等腫瘤的診斷,通過實(shí)驗(yàn)證明RRM2在卵巢腫瘤的表達(dá),以及RRM2和B7H4對(duì)卵巢腫瘤的診斷的相關(guān)性可大大提高卵巢惡性腫瘤的檢出率。這不僅僅可以提高患者的生存率,更對(duì)該病的臨床診療及其預(yù)后提供新的思路,更有益于女性的生命健康。

[1]謝幸,茍文麗.婦產(chǎn)科學(xué)[M].第8版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:321-333

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孫盛梅(1966~)女,黑龍江佳木斯人,碩士,主任醫(yī)師,碩士研究生導(dǎo)師。

牟媛媛(1989~)女,黑龍江蘿北人,在讀碩士研究生。E-mail:1015661755@qq.com。

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1008-0104(2017)02-0100-02

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