阿奇霉素不同劑型的溶出度方法學研究

李嬌娜+顧先志

摘 要：建立反相高效液相色譜法測定阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的含量并考察溶出度。方法：采用安捷倫C18色譜柱（218mm×4.6mm，5μm），磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%的磷酸溶液調節pH至8.2）-乙腈（45∶55），檢測波長為210nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。阿奇霉素在6～72μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。結論：本法簡便、準確，可用于阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的溶出度方法學研究。

關鍵詞：阿奇霉素；含量；測定

阿奇霉素為半合成的十五元環大環內酯類抗生素。白色或類白色結晶性粉末；無臭，味苦；微有引濕性。阿奇霉素適應沙眼衣原體及非多種耐藥淋病奈瑟菌所致的尿道炎和宮頸炎；化膿性鏈球菌引起的急性咽炎、急性扁桃體炎；肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌以及肺炎支原體所致的肺炎；敏感細菌引起的鼻竇炎、中耳炎、急性支氣管炎、慢性支氣管炎急性發作；敏感細菌引起的皮膚軟組織感染等。溶出度是指藥物從片劑等固體制劑在規定溶劑中溶出的速度和程度。本實驗采用高效液相色譜法對阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片中的阿奇霉素的進行了含量測定并考察溶出度。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：756PC紫外可見分光光度計（四川匯巨儀器設備有限公司）；KQ5200B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；實驗室高純水機（上海技舟化工科技有限公司）；LC-4000單泵液相色譜儀（山東金普分析儀器有限公司）；FA1204CFAC型全自動內校電子分析天平（北京同德創業科技有限公司）；HH-601超級恒溫水浴（北京富瑞恒創科技有限公司）；RCZ-8智能溶出試驗儀（北京新諾立華儀器有限公司）。

1.2 色譜柱：安捷倫 C18 色譜柱（218 mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：阿奇霉素 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4 試劑：磷酸氫二鉀（北京亞太龍興化工有限公司）、磷酸（北京亞太龍興化工有限公司）、乙腈（北京亞太龍興化工有限公司）、三乙胺（南京大唐化工有限公司）、甲醇（北京亞太龍興化工有限公司）。水為純化水。

1.5 試藥：阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片

2 測定方法確定

2.1 色譜條件

分別考察甲醇-水（80∶20），磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%的磷酸溶液調節pH至8.2）-乙腈（45∶55），甲醇-0.1moloL-1磷酸二氫鉀-三乙胺（50∶50：0.01），甲醇-水（92∶18）不同比例的流動相，結果以磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%的磷酸溶液調節pH至8.2）-乙腈（45∶55）為流動相為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%的磷酸溶液調節pH至8.2）-乙腈（45∶55）為流動相為流動相。依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[1-5]。流動相：磷酸鹽緩沖液（取0.05mol/L磷酸氫二鉀溶液，用20%的磷酸溶液調節pH至8.2）-乙腈（45∶55），檢測波長：210nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數按阿奇霉素峰計算應不得低于2000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取阿奇霉素對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含10μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取裝量差異項下的供試品精密稱定，精密稱取，置具塞錐形瓶中，精密加入流動相10mL，密塞，精密稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，精密稱定，用流動相補足重量，搖勻，濾過。取續濾液，即得。

2.4 精密度試驗

精密稱取阿奇霉素對照品適量，加流動相使溶解，制成濃度為10μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.63%，表明本方法精密度良好。

2.5 對照品的線性考察

精密稱取阿奇霉素對照品15mg，置25ml容量瓶中，加入流動相溶液使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取0.1、0.2、0.4、0.6、1.2mL，置于10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。結果表明，阿奇霉素在6～72μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

2.6 重現性試驗

稱取同一批的阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.93%、0.67%、0.96%，結果表明此方法的重現性良好。

2.7 準確度試驗

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的阿奇霉素對照品，上述方法進行測定，計算回收率，平均回收率為99.1%、99.2%、99.5%，RSD=0.56%、RSD=0.63%、RSD=0.81%。結果表明此方法的回收率良好。

2.8 樣品穩定性試驗

取同一批阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片樣品，按2.3項下的供試品制備方法制備供試品，將供試品置室溫下放置，分別于第0、2、4、6、8、10小時，精密吸取供試品溶液10？l注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。測定阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的RSD=0.73%、RSD=0.71%、RSD=0.69%。結果表明供試品10小時內穩定。

2.9 溶出度測定

照溶出度測定法（中國藥典2015版二部附錄ⅩC第二法）[1]及《中國藥品檢驗標準操作規程》對奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片溶出度進行測定。

3 討論

本實驗表明此方法可用于阿奇霉素片、阿奇霉素膠囊、阿奇霉素分散片中阿奇霉素的含量測定。溶出度實驗結果表明，三種劑型體外溶出度均符合有關規定，三種劑型之間有一定差異。

參考文獻

[1]劉紅梅，李欣，方光娟.反相高效液相色譜法測定乳糖酸阿齊霉素注射劑的含量[J].哈爾濱醫科大學學報，2000（03）.

[2]紀標，王東凱，薛梅妍，李志強，徐颯.HPLC法測定注射用門冬氨酸阿奇霉素的含量和有關物質[J].中國抗生素雜志，2005（06）.

[3]黃蓓琳，吳涓，王國平.高效液相色譜法測定阿奇霉素普通片和分散片含量[J].中國醫院藥學雜志，2005（03）.

[4]紀標，王東凱，薛梅妍，李志強，徐颯.HPLC法測定注射用門冬氨酸阿奇霉素的含量和有關物質[J].中國抗生素雜志，2005（06）.

[5]易秋艷，范時根，楊梁.HPLC法測定注射用阿奇霉素的有關物質[J].西南國防醫藥，2008（05）.