Notch1 通路與膠質(zhì)瘤細(xì)胞管道形成能力相關(guān)性研究☆

張清平梅鑫柯超陳銀生陳芙蓉陳建良陳忠平

·論 著·

Notch1 通路與膠質(zhì)瘤細(xì)胞管道形成能力相關(guān)性研究☆

張清平*梅鑫△柯超△陳銀生△陳芙蓉△陳建良※陳忠平△

目的 探索膠質(zhì)瘤細(xì)胞來(lái)源的管道（glioma clls derived vessels,GCDV）的形成機(jī)制。方法 將膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U87、U251、U373、SF295、T98G、SKMG-4和C6進(jìn)行體外三維培養(yǎng)，觀察其管道形成能力。Western blot檢測(cè)各個(gè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株Notch1、Dll4蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果 三維培養(yǎng)C6細(xì)胞單個(gè)視野下（100×）的平均管道數(shù)(25.2±5.0)個(gè)，U373為(36.4±3.20)個(gè)，U87為(19.0±2.2)個(gè)，T98G為(12.6±2.4)個(gè)，SF295為(4.0±2.)個(gè)，U251為(0.2± 0.4)個(gè)，SKMG-4為0。Notch1在U87、U251、T98G、SF295、SKMG-4、C6、U373表達(dá)相關(guān)密度分別為0.34、0.21、0.79、0.04、0.28、1.75、1.19，與管道形成能力顯著相關(guān)(r=0.778,P=0.019)；Dll4表達(dá)相關(guān)密度與管道形成能力不相關(guān)(r=0.635,P=0.062)。結(jié)論 Notch1蛋白表達(dá)與細(xì)胞株管道形成能力密切相關(guān)，而Dll4蛋白的表達(dá)與細(xì)胞株管道形成能力有待進(jìn)一步探索。

Notch1 膠質(zhì)瘤 三維培養(yǎng) 管道形成

血管擬態(tài)（vasculogenic mimicry,VM）是靶向血管新生治療的重要靶點(diǎn)[1]，腫瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)管道形成能力是其體內(nèi)發(fā)生血管擬態(tài)能力的反映。目前對(duì)于管道形成能力的機(jī)制研究提示血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）[2]、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體（VEGFR）[3]、CD31[4]、VE鈣粘蛋白[5]、基質(zhì)金屬蛋白2（MMP-2）[6]、層粘連蛋白（laminin）[7]是重要影響因素。我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)瘤標(biāo)本中有明顯的血管擬態(tài)現(xiàn)象發(fā)生，并在膠質(zhì)瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)證實(shí)了其管道形成能力[8]，但影響管道形成能力的因素尚不明了。經(jīng)典的Notch1通路在調(diào)控血管新生上有重要作用[11]，而關(guān)于其在擬態(tài)管道形成的作用尚未有報(bào)道。本研究檢測(cè)不同膠質(zhì)瘤細(xì)胞株管道形成能力的不同，以及Notch1、以及Notch1的配體Dll4的表達(dá)水平之間的差異，并分析膠質(zhì)瘤細(xì)胞株管道形成能力與Notch1、Dll4的表達(dá)相關(guān)性。……