不同檢測方法計數(shù)血小板的準確性評價

摘要：目的探討血小板計數(shù)不同檢測方法的準確性。方法選取我院檢驗科收集的全血標本66例，采用電阻抗法、CD61 免疫學法與顯微鏡法進行PLT計數(shù)，以顯微鏡直接計數(shù)法為標準，評價電阻抗法與CD61 免疫學法兩種計數(shù)方法的準確性。結果血小板計數(shù)在300～350×109/L、100～300×109/L與50～100×109/L三個計數(shù)區(qū)間中電阻抗法與顯微鏡直接計數(shù)法比較差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05）；血小板計數(shù)在>350×109/L和<50×109/L計數(shù)區(qū)間內(nèi)電阻抗法與顯微鏡直接計數(shù)法比較差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；血小板計數(shù)在>350×109/L 、300～350×109/L、100～300×109/L、50～100×109/L及<50×109/L計數(shù)區(qū)間中CD61 免疫學法與顯微鏡直接計數(shù)法比較差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05）。結論電阻抗法在高值和低值血小板計數(shù)中準確性低于CD61免疫學法和顯微鏡直接計數(shù)法，在血小板正常范圍內(nèi)計數(shù)三種方法無差異。

關鍵詞：血小板計數(shù)；電阻抗法；顯微鏡法；CD61免疫學法；準確性

血小板計數(shù)是指單位體積血液中所含的血小板數(shù)目，在臨床血栓疾病、血小板減少性疾病及出血性疾病的診斷、鑒別診斷、止血及治療中血小板計數(shù)具有極為重要的指導意義[1]。但是在血小板計數(shù)檢測中由于血小板體積較小并且容易發(fā)生粘附、聚集與變形破壞其檢測結果存在一定的誤差，如何提高血小板計數(shù)的準確性是目前臨床研究熱議的話題[2]。為進一步探究不同檢測方法血小板計數(shù)的準確性，筆者針對我院檢驗科收集的66例全血標本進行血小板計數(shù)準確性研究，現(xiàn)將研究內(nèi)容報告如下：

1資料與方法

1.1一般資料本研究所納入的66例血樣標本中，男性患者39例，女性患者27例，年齡15～52歲，平均年齡（34.67±4.26）歲，66例血液樣本中包含32例血液疾病患者和34例非血液病患者。并根據(jù)檢測結果將血小板計數(shù)區(qū)間劃分為>350×109/L、300～350×109/L、100～300×109/L、50～100×109/L、<50×109/L。

1.2檢測儀器Sysmex-1000i血液分析儀，Leica 光學顯微鏡（德國），細胞計數(shù)板，采血管，EDTA-K2真空抗凝采血管。

1.3檢測方法

1.3.1顯微鏡直接計數(shù)法按照世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦血小板計數(shù)方法[4，5]，參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程（第3 版）》血小板顯微鏡直接計數(shù)法操作流程，由兩名專業(yè)檢驗師進行操作，取抗凝靜脈血20μL加入380μL1%草酸銨血小板稀釋液中，混勻后靜置15分鐘，待紅細胞充分破壞后，充入細胞計數(shù)板中，計數(shù)中央大方格內(nèi)4角及中央共計5個中方格內(nèi)的血小板數(shù)，即為每升血液內(nèi)的血小板數(shù)。計數(shù)按照雙盲法取2次結果平均數(shù)作為血小板計數(shù)，并于計數(shù)結束后進行照相核對計數(shù)。

1.3.2電阻抗法與CD61 免疫學法在血小板計數(shù)前由專業(yè)人員對檢測儀器指控檢測，即用配套低、中、高值 3 種質控品進行質控檢測，以確保儀器性能的穩(wěn)定性。而后根據(jù)儀器操作規(guī)范及試劑盒中相關檢測流程分別使用電阻抗法及CD61免疫學法對血小板進行計數(shù)。操作時間均在2h內(nèi)完成。

1.4觀察指標分別評價電阻抗法、CD61 免疫學法與顯微鏡直接計數(shù)法之間的計數(shù)差異。

1.5統(tǒng)計學方法應用統(tǒng)計學處理軟件包 SPSS 19.0 對研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用百分比表示，用X2進行檢驗；計量資料采用均值加減標準差表示，采用配對獨立樣本T 檢驗，以p<0.05 為表示為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1電阻抗法與顯微鏡直接計數(shù)法將檢測結果經(jīng)統(tǒng)計學分析顯示，血小板計數(shù)在300～350×109/L、100～300×109/L與50～100×109/L三個計數(shù)區(qū)間中電阻抗法與顯微鏡直接計數(shù)法比較差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05）；血小板計數(shù)在>350×109/L和<50×109/L計數(shù)區(qū)間內(nèi)電阻抗法與顯微鏡直接計數(shù)法比較差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05），結果見表1。

2.2 CD61 免疫學法與顯微鏡直接計數(shù)法將檢測結果經(jīng)統(tǒng)計學分析顯示，血小板計數(shù)在>350×109/L 、300～350×109/L、100～300×109/L、50～100×109/L及<50×109/L計數(shù)區(qū)間中CD61 免疫學法與顯微鏡直接計數(shù)法比較差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05）。結果見表2。

3討論

臨床診斷與治療中，血小板計數(shù)是常用的檢測指標之一。隨著檢驗計數(shù)的不斷更新與進步，臨床血小板計數(shù)檢測儀器多種多樣，但都存在一定的誤差，為進一步探究電阻抗法、CD61 免疫學法與顯微鏡直接計數(shù)法之間的計數(shù)準確性差異，筆者針對66例血樣樣本進行探討研究。

電阻抗法是將等滲電解溶液稀釋后的細胞懸液倒入特制容器中，接通電源，根據(jù)細胞非導電的性質，會引起瞬間電壓的變化，產(chǎn)生一個脈沖信號。細胞體積決定脈沖振幅，細胞數(shù)目決定脈沖的數(shù)目。血小板與紅細胞同時檢測，根據(jù)二者體積差異，按照其提前設定的閾值，高于閾值為紅細胞，低于閾值為血小板，由此得出血小板數(shù)目，其計數(shù)結果易受影響。CD61 免疫學法在儀器的特殊模式下完成檢測，通過標記的全血血小板和紅細胞比值，并根據(jù)標準法測量得出的紅細胞數(shù)來計算血小板計數(shù)，進樣模式均采用閉合自動進樣模式。

綜上所述，電阻抗法在高值和低值血小板計數(shù)中準確性低于CD61免疫學法和顯微鏡直接計數(shù)法，在血小板正常范圍內(nèi)計數(shù)三種方法無差異。

參考文獻：

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[2] 安秀英.邁瑞 BC-5500血細胞分析儀檢測紅細胞平均體積與血小板計數(shù)關系的分析[J].重慶醫(yī)學，2010，39（22）：3108-3109.

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[5] 胡麗華.臨床輸血檢驗[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2004：271.