不同檢測方法計數血小板的準確性評價

摘要：目的探討血小板計數不同檢測方法的準確性。方法選取我院檢驗科收集的全血標本66例，采用電阻抗法、CD61 免疫學法與顯微鏡法進行PLT計數，以顯微鏡直接計數法為標準，評價電阻抗法與CD61 免疫學法兩種計數方法的準確性。結果血小板計數在300～350×109/L、100～300×109/L與50～100×109/L三個計數區間中電阻抗法與顯微鏡直接計數法比較差異無統計學意義（p>0.05）；血小板計數在>350×109/L和<50×109/L計數區間內電阻抗法與顯微鏡直接計數法比較差異有統計學意義（p<0.05）；血小板計數在>350×109/L 、300～350×109/L、100～300×109/L、50～100×109/L及<50×109/L計數區間中CD61 免疫學法與顯微鏡直接計數法比較差異無統計學意義（p>0.05）。結論電阻抗法在高值和低值血小板計數中準確性低于CD61免疫學法和顯微鏡直接計數法，在血小板正常范圍內計數三種方法無差異。

關鍵詞：血小板計數；電阻抗法；顯微鏡法；CD61免疫學法；準確性

血小板計數是指單位體積血液中所含的血小板數目，在臨床血栓疾病、血小板減少性疾病及出血性疾病的診斷、鑒別診斷、止血及治療中血小板計數具有極為重要的指導意義[1]。但是在血小板計數檢測中由于血小板體積較小并且容易發生粘附、聚集與變形破壞其檢測結果存在一定的誤差，如何提高血小板計數的準確性是目前臨床研究熱議的話題[2]。為進一步探究不同檢測方法血小板計數的準確性，筆者針對我院檢驗科收集的66例全血標本進行血小板計數準確性研究，現將研究內容報告如下：

1資料與方法

1.1一般資料本研究所納入的66例血樣標本中，男性患者39例，女性患者27例，年齡15～52歲，平均年齡（34.67±4.26）歲，66例血液樣本中包含32例血液疾病患者和34例非血液病患者。并根據檢測結果將血小板計數區間劃分為>350×109/L、300～350×109/L、100～300×109/L、50～100×109/L、<50×109/L。

1.2檢測儀器Sysmex-1000i血液分析儀，Leica 光學顯微鏡（德國），細胞計數板，采血管，EDTA-K2真空抗凝采血管。

1.3檢測方法

1.3.1顯微鏡直接計數法按照世界衛生組織（WHO）推薦血小板計數方法[4，5]，參照《全國臨床檢驗操作規程（第3 版）》血小板顯微鏡直接計數法操作流程，由兩名專業檢驗師進行操作，取抗凝靜脈血20μL加入380μL1%草酸銨血小板稀釋液中，混勻后靜置15分鐘，待紅細胞充分破壞后，充入細胞計數板中，計數中央大方格內4角及中央共計5個中方格內的血小板數，即為每升血液內的血小板數。計數按照雙盲法取2次結果平均數作為血小板計數，并于計數結束后進行照相核對計數。

1.3.2電阻抗法與CD61 免疫學法在血小板計數前由專業人員對檢測儀器指控檢測，即用配套低、中、高值 3 種質控品進行質控檢測，以確保儀器性能的穩定性。而后根據儀器操作規范及試劑盒中相關檢測流程分別使用電阻抗法及CD61免疫學法對血小板進行計數。操作時間均在2h內完成。

1.4觀察指標分別評價電阻抗法、CD61 免疫學法與顯微鏡直接計數法之間的計數差異。

1.5統計學方法應用統計學處理軟件包 SPSS 19.0 對研究數據進行統計分析，計數資料采用百分比表示，用X2進行檢驗；計量資料采用均值加減標準差表示，采用配對獨立樣本T 檢驗，以p<0.05 為表示為差異有統計學意義。

2結果

2.1電阻抗法與顯微鏡直接計數法將檢測結果經統計學分析顯示，血小板計數在300～350×109/L、100～300×109/L與50～100×109/L三個計數區間中電阻抗法與顯微鏡直接計數法比較差異無統計學意義（p>0.05）；血小板計數在>350×109/L和<50×109/L計數區間內電阻抗法與顯微鏡直接計數法比較差異有統計學意義（p<0.05），結果見表1。

2.2 CD61 免疫學法與顯微鏡直接計數法將檢測結果經統計學分析顯示，血小板計數在>350×109/L 、300～350×109/L、100～300×109/L、50～100×109/L及<50×109/L計數區間中CD61 免疫學法與顯微鏡直接計數法比較差異無統計學意義（p>0.05）。結果見表2。

3討論

臨床診斷與治療中，血小板計數是常用的檢測指標之一。隨著檢驗計數的不斷更新與進步，臨床血小板計數檢測儀器多種多樣，但都存在一定的誤差，為進一步探究電阻抗法、CD61 免疫學法與顯微鏡直接計數法之間的計數準確性差異，筆者針對66例血樣樣本進行探討研究。

電阻抗法是將等滲電解溶液稀釋后的細胞懸液倒入特制容器中，接通電源，根據細胞非導電的性質，會引起瞬間電壓的變化，產生一個脈沖信號。細胞體積決定脈沖振幅，細胞數目決定脈沖的數目。血小板與紅細胞同時檢測，根據二者體積差異，按照其提前設定的閾值，高于閾值為紅細胞，低于閾值為血小板，由此得出血小板數目，其計數結果易受影響。CD61 免疫學法在儀器的特殊模式下完成檢測，通過標記的全血血小板和紅細胞比值，并根據標準法測量得出的紅細胞數來計算血小板計數，進樣模式均采用閉合自動進樣模式。

綜上所述，電阻抗法在高值和低值血小板計數中準確性低于CD61免疫學法和顯微鏡直接計數法，在血小板正常范圍內計數三種方法無差異。

參考文獻：

[1] 魏晴，田兆嵩.血小板的臨床應用[J].中國輸血雜志，2008，21（9）：732-734.

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[3] 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京：東南大學出版社，2006：136-137.

[4] 叢玉隆.現代血細胞分析技術與臨床[M].北京：人民軍醫出版社，2005：50-52.

[5] 胡麗華.臨床輸血檢驗[M].北京：中國醫藥科技出版社，2004：271.