劉文娟,鞏萌,崔寧軒,王穎,趙霄,余春紅,易宗春
(北京航空航天大學生物與醫學工程學院,北京 100191)
·調查研究·
不同孔徑微孔濾膜對腫瘤細胞濾過的影響*
劉文娟,鞏萌,崔寧軒,王穎,趙霄,余春紅,易宗春
(北京航空航天大學生物與醫學工程學院,北京 100191)
目的 探討不同孔徑微孔濾膜對不同直徑大小的腫瘤細胞的濾過作用及其對過濾后細胞活性的影響。方法 選擇不同孔徑(1、3、5、8、10 μm)的聚碳酸酯微孔濾膜分別過濾濃度相同但細胞直徑不同的Jurkat、K562和A549細胞,測定細胞通過濾膜的濾過率;光學顯微鏡測量3種細胞(包括甲醛固定后的K562)的直徑及其經不同孔徑的濾膜過濾后的細胞直徑;臺盼藍染色法檢測經濾膜過濾后的K562細胞活性,對細胞進行再培養,并用生長曲線分析其細胞增殖能力。結果 Jurkat、K562和A549細胞均不能通過1 μm孔徑的濾膜,通過3、5、8、10 μm孔徑濾膜的濾過率均依次升高。經3 μm孔徑濾膜濾過的K562細胞存活率為92.0%,且濾過后的細胞再培養后的細胞增殖能力仍較強。經甲醛固定的K562細胞的濾過率明顯降低,且細胞平均直徑無明顯變化。結論 活細胞能穿過孔徑小于其直徑的濾膜;穿過濾膜的細胞仍保持活性增殖,但甲醛固定可明顯減少細胞通過濾膜。
聚碳酸酯微孔濾膜;濾膜孔徑;細胞直徑;濾過率
腫瘤細胞從原發組織部位脫落,穿過血管壁進入血液循環形成循環腫瘤細胞(circulating tumor cells, CTCs)[1],但實體腫瘤患者外周血中CTCs含量極少,而從血細胞中富集和分離CTCs是檢測外周血CTCs的前提。目前,CTC富集和檢測新方法不斷涌現,已經文獻證實的可達數十種[2],但由于CTCs含量非常少以及缺乏有效的特異性標志物,現有的富集方法主要基于CTCs物理性質或免疫磁性。……