mTOR活化對抗β2GPI抗體/β2GPI復(fù)合物誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞組織因子表達(dá)的影響*

夏龍飛，巨紅妹，周紅，王婷

(1.江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江 212013；2.河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院檢驗(yàn)科，石家莊 050000)

·研究生園地·

mTOR活化對抗β2GPI抗體/β2GPI復(fù)合物誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞組織因子表達(dá)的影響*

夏龍飛1,2，巨紅妹2，周紅1，王婷1

(1.江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江 212013；2.河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院檢驗(yàn)科，石家莊 050000)

目的 探討雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在抗β2糖蛋白I(β2GPI)/β2GPI復(fù)合物誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞組織因子(TF)表達(dá)中的作用。方法 用抗β2GPI抗體/β2GPI和β2GPI/IgG-APS處理THP-1細(xì)胞，mTOR抑制劑雷帕霉素(100 nmol/L)進(jìn)行干預(yù)實(shí)驗(yàn)；收集細(xì)胞總RNA和蛋白質(zhì)，實(shí)時(shí)定量PCR(RT-qPCR)和TF活性試劑盒分別檢測THP-1細(xì)胞中TFmRNA表達(dá)水平及其活性，western blot檢測THP-1細(xì)胞中mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)、p38、p-p38、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK、NF-κB p65和p-NF-κB p65的表達(dá)情況。結(jié)果 抗β2GPI抗體/β2GPI和β2GPI/IgG-APS復(fù)合物均能明顯增加THP-1細(xì)胞TFmRNA和TF活性以及mTOR磷酸化水平(P均<0.05)；雷帕霉素能明顯降低抗β2GPI抗體/β2GPI和β2GPI/IgG-APS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞TF的表達(dá)水平以及mTOR磷酸化的效應(yīng)(P均<0.05)，也能明顯地削弱p38、ERK1/2和NF-κB p65的磷酸化水平(P均<0.05)，而對JNK的磷酸化水平無抑制效應(yīng)(P>0.05)。結(jié)論 抗β2GPI抗體/β2GPI復(fù)合物能夠刺激THP-1細(xì)胞mTOR的活化，并能影響TF的表達(dá)。

抗磷脂綜合征；雷帕霉素靶蛋白；抗β2GPI抗體/β2GPI復(fù)合物；組織因子；雷帕霉素

抗磷脂綜合征(antiphospholipid syndrome，APS)是一種非器官特異性自身免疫性疾病，血栓形成是最重要的病理基礎(chǔ)和臨床表現(xiàn)[1]。研究表明，血清中高滴度的抗磷脂抗體(尤其是抗β2GPI抗體)可與β2GPI結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞和單核細(xì)胞表達(dá)組織因子(tissue factor，TF)，增加血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)[2-3]。研究表明，哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白復(fù)合物(the mammalian target of rapamycin complex，mTORC)通路在APS內(nèi)皮血管壁炎癥激活導(dǎo)致血管損傷的過程中起著關(guān)鍵作用[4]。可通過西羅莫司或雷帕霉素抑制mTOR來預(yù)防或縮小血管損傷后新內(nèi)膜的形成[5]。mTORC通路的激活在aPL/抗β2GPI抗體誘導(dǎo)血栓形成和激活內(nèi)皮細(xì)胞的過程中發(fā)揮重要作用[6]。然而，抗β2GPI抗體/β2GPI復(fù)合物能否在體外引起單核細(xì)胞內(nèi)mTOR的活化目前尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。……