卵巢去細胞生物支架的制備及鑒定

蘭莉，王嚴(yán)，付養(yǎng)華，劉帥良，黎婷，王志斌，習(xí)海濤，楊運俊，梅勁

（1.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 超聲科，浙江 溫州 325015；2.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 放射科，浙江 溫州 325015；3.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 生殖中心，浙江 溫州 325015；4.溫州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 生物支架移植與免疫研究所，浙江 溫州 325035；5.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院 生殖中心，浙江 溫州 325027）

卵巢去細胞生物支架的制備及鑒定

蘭莉1，王嚴(yán)2，付養(yǎng)華3，劉帥良2，黎婷4，王志斌4，習(xí)海濤5，楊運俊2，梅勁4

（1.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 超聲科，浙江 溫州 325015；2.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 放射科，浙江 溫州 325015；3.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 生殖中心，浙江 溫州 325015；4.溫州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 生物支架移植與免疫研究所，浙江 溫州 325035；5.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院 生殖中心，浙江 溫州 325027）

目的:通過浸泡加震蕩法制備豬部分卵巢組織去細胞生物支架，并對其進行鑒定。方法:健康未成年豬卵巢30個，橫切成厚為6 mm的切片，室溫條件下，1% SDS溶液浸泡，同時平板震蕩器震蕩，最后用去離子水清洗其內(nèi)殘留SDS及DNA碎片。獲得去細胞卵巢生物支架后，對其進行組織化學(xué)染色、DNA殘留量定量測定、掃描電鏡檢查及免疫熒光染色，觀察細胞去除情況、支架的三維結(jié)構(gòu)以及細胞外基質(zhì)中膠原與蛋白質(zhì)的保留情況。結(jié)果:DNA定量分析得出僅15.4%的DNA殘留；HE染色、掃描電鏡及免疫熒光染色提示支架內(nèi)未見細胞核殘留，并且支架的結(jié)構(gòu)、膠原成分保留較完整。結(jié)論:運用浸泡加震蕩法能夠有效地去除卵巢組織中的細胞成分，并且較完整地保持細胞外基質(zhì)的支架結(jié)構(gòu)，不同程度地保留一些膠原成分及蛋白質(zhì)。……