化瘀祛濁復方對糖尿病大鼠大血管病變炎性因子的影響

王飛+李敬林

[摘要] 目的 觀察化瘀祛濁復方對糖尿病大鼠大血管病變炎性因子的影響。 方法 應用鏈尿佐菌素復制糖尿病大鼠大血管病的病理模型，大鼠的血糖值>11.2 mmol/L為造模成功列入觀察對象，然后共分為6組，實驗期間，每組予以不同的飼養。實驗期間大鼠尾尖采血，實驗8周后腹主動脈采血，待放射免疫法檢測血清中腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor-a，TNF-a），且觀察其變化。結果 模型組大鼠與正常組比較TNF-a明顯升高，差異有統計學意義（P<0.01）；AS組、治療組比較TNF-a升高其次（P<0.05），陽性藥組與預防組差異無統計學意義。應用化瘀祛濁中藥復方影響炎癥水平。結論 應用化瘀祛濁復方可以抑制腫瘤壞死因子的表達，使糖尿病大血管病的炎性因子處于炎癥狀態，從而能夠延緩糖尿病合并癥的進展。

[關鍵詞] 化瘀祛濁；糖尿病大血管病；大鼠；腫瘤壞死因子

[中圖分類號] R587.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-4062（2016）12（b）-0005-02

[Abstract] Objective To observe the effect of the compound prescription of removing blood stasis and removing turbid on the inflammatory factors of the large blood vessel pathological changes in diabetic rats. Methods The pathological model by streptozotocin to copy large vessel disease in diabetic rats， rats blood glucose greater than 11.2 mmol/L for the successful modeling included in the observation objects， and were divided into 6 groups， each group during the experiment， give the different feeding. During the experiment， blood samples were collected at the end of the experiment， blood samples were collected from abdominal aorta 8 weeks later， and necrosis factor-A tumor（TNF-a） was detected by radioimmunoassay， and the changes were observed. Results Compared with the normal group， the TNF-a in model group was significantly increased， and the difference was significant（P<0.01）； AS group， treatment group compared to TNF-a increased second（P< 0.05）， positive drug group and prevention group were not significantly different. Effect of TCM compound prescription of removing blood stasis and removing turbid to influence the level of inflammation. Conclusion The application of removing blood stasis and removing turbid compound can inhibit the expression of tumor necrosis factor， so that the inflammatory factor of diabetic vascular disease in the inflammatory state， so as to delay the progress of diabetic complications.

[Key words] Removing stasis and removing turbidity； Diabetic vascular disease； Rat； Tumor necrosis factor

糖尿病（diabetes mellitus，DM）是一種常見的內分泌代謝疾病，是一組由遺傳和環境因素相互作用而引起的臨床綜合征。由于胰島素分泌絕對或相對不足，以及靶組織細胞和胰島素敏感性降低，引起糖、蛋白質、脂肪、水和電解質等一系列代謝紊亂，而以高血糖為主要共同標志的疾病。相當于中醫學的“消渴病”。 糖尿病大血管病變是DM常見的并發癥之一，指中等以上動脈的粥樣硬化，主要有高血壓、冠心病、腦血管病變和下肢血管病變，是糖尿病致殘和致死的主要原因，約占糖尿病患者死亡原因的60%～70%[1]。DM的炎癥發病學說認為：糖尿病是一種自然免疫和低度炎癥性疾病[2]。炎癥因子引起的血管炎癥反應在糖尿病尤其是大血管病變的發生發展中有重要作用[3]。炎性因子是一組化學結構和生物學各異的物質，TNF-a由單核細胞、巨噬細胞、激活的淋巴細胞、血管內皮細胞等多種細胞，它具有參與介導炎癥、免疫調節等作用[4-5]。TNF-a參與炎性反應和免疫應答，影響糖脂肪代謝，通過對胰島素β細胞造成損傷后經多種途徑影響著DM的發生。該實驗研究以化瘀祛濁中藥復方預防糖尿病大鼠大血管病，并觀察血清中TNF-a在病程進展中的變化。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

健康雄性Wistar大鼠清潔級75只，體重大約160～200 g。購于遼寧省本溪市動物基地。

1.2 飼養環境與飼料

飼養于遼寧中醫藥大學動物實驗中心，通過高糖、高脂、膽固醇等膳食方法飼養1個月，實驗期間自由飲水。

1.3 實驗用藥品

化瘀祛濁中藥復方由黃芪、黨參、川芎、白芍、山萸肉、生地、水蛭、澤瀉、半夏、山梔中藥顆粒劑開水配制，購于沈陽市中醫院藥房。福辛普利10 mg/片，藥物溶于生理鹽水中，購于沈陽市中醫院。根據人體劑量與大鼠的等效計量6.3倍計算。鏈尿佐菌素，Sigma：S0130，SIZE：1 g，購于遼寧中醫藥大學動物實驗室。

1.4 DM大鼠大血管病模型的復制

健康雄性Wistar鼠清潔級75只，適應性喂養兩周，實驗開始。隨意選取10只作為正常組，予普通飼料；選取15只作為預防組，予高脂高糖飼料，同時予中藥灌胃；選取10只作為AS組，予高脂飼料；其余40只喂高脂高糖飼料，1個月后造模。STZ腹腔一次性注射45 mg/kg。72 h后尾尖采血，血糖值>11.2 mmol/L列為觀察對象。其中血糖未達標8只，死亡8只，造模成功率為78.86%。

1.5 分組及給藥方法

根據血糖值隨機分為6組，分別為正常組、預防組、AS組、模型組、陽性藥組、治療組。預防組予高脂高糖飼料飼養的同時給予中藥；治療組在成模成功后給予中藥灌胃；陽性藥組給予福辛普利日1次灌胃，其余3組予等計量的生理鹽水1次/d。以上6組均未使用其他降糖藥。

1.6 標本采集

大鼠尾尖采血，美國強生血糖儀測血糖。大鼠經腹主動脈采集血清標本，應用放射免疫法測定血清TNF-a的含量。

1.7 統計方法

采用SPSS 15.0統計學軟件對生化和放免等實驗數據進行方差分析和Pearson相關分析，組間兩兩比較采取q檢驗，以均值±標準差（x±s）表示，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

模型組大鼠與正常組相比較TNF-a均有明顯升高，差異有統計學意義（P<0.01）；而陽性藥、預防組差異無統計學意義。模型組、AS組體內存在慢性炎性因子；模型組與AS組相比較，高血糖可以增加炎癥因子的表達；陽性藥、預防組有明顯的抗炎性因子的作用，降低TNF-a含量使之接近正常組，見表1。

3 討論

實驗證實，化瘀祛濁中藥復方的干預下，DM大鼠處于炎癥狀態時，TNF-a炎性因子的改變促進糖尿病合并癥的發生與發展。由此可以說明，應用化瘀祛濁中藥復方可以抑制炎性因子的表達，延緩DM的合并癥的發生提供了有力的試驗理論與數據[6]。

綜上所述，化瘀祛濁中藥復方在降低血糖、控制糖尿病癥狀及其大血管病方面具有很大的優勢與潛力。尤其是在DM的病程進展中，血清TNF-a的變化明顯呈逐漸上升與對照組相比，但中藥復方干預后均明顯有下降趨勢，所以結果顯示腫瘤壞死因子的升高水平與DM之間是呈正相關的關系，化瘀祛濁中藥復方對于降糖作用的同時還可以提高免疫、抑制炎性因子TNF-a的表達。而TNF-a是引起胰島素抵抗的主要致病因子[6]參與AS的形成。通過抑制炎性因子的表達減輕胰島素抵抗，同時也抑制了血管的炎性增生。近年來，炎性反應在DM及其并發癥中所起的作用越來越受到關注，同時血糖升高也是在增加炎性因子的表達，因此阻斷TNF-a等炎性因子的表達，也是對DM及其合并癥的一種防治。所以抑制血清中的炎性因子，是防治糖尿病大血管病的重要途徑。最后，中醫藥防治糖尿病大血管病變具有一定的優勢，但化瘀祛濁重要復方對糖尿病大鼠大血管合并癥具體的作用機制還需進一步研究探討。

[參考文獻]

[1] 中華醫學會糖尿病分會糖尿病慢性并發癥調查組.全國住院糖尿病患者慢性并發癥及其相關危險因10年回顧性調查分析[J].中國糖尿病雜志，2003，11（4）：232-238.

[2] 李秀鈞，鄔云紅.糖尿病是一種炎癥性疾病[J].中華內分泌代謝雜志，2003，19（4）：251.

[3] Famier M.Pravastatin and fenofibrate in combination（Pravafenix）for the treatment of high-riskpatients with mixed hypedipidemia[J].Expert Rev Cardiovase Ther，2012，10（5）：565-575.

[4] Aggarwal BB，Natarajan K.Tumor necrosis factors： developm ents during the Last decade[J].Eur CytoKine Net，1996，7（2）：93-124.

[5] Ruan H，Lodis HF. Insulin resistance in adipose tissue：direct and indirect effects of tumor necrosis factor-alpha[J].Cytokine Growth Factor Rev，2003，14（5）：447-455.

[6] 周迎生.腫瘤壞死因子-a在胰島素抵抗中的作用[J].國外醫學內科學分冊，2000 27（3）：115-118.

（收稿日期：2016-09-16）