重組人MG53蛋白對人臍帶間充質干細胞氧化損傷的保護作用

黃團結宋及時馬珊珊程康邢衢李鵬劉騰飛楊波關方霞,

·論著·

重組人MG53蛋白對人臍帶間充質干細胞氧化損傷的保護作用

黃團結1宋及時1馬珊珊1程康1邢衢1李鵬1劉騰飛1楊波2關方霞1,2

目的 建立人臍帶間充質干細胞（hUC-MSCs）的H2O2氧化損傷模型，探討重組人MG53蛋白（rhMG53）對hUC-MSCs氧化損傷的保護作用。方法 使用組織塊培養法從健康人臍帶沃頓膠組織中分離培養hUC-MSCs，流式細胞儀檢測細胞表型；CCK-8法檢測hUC-MSCs的增殖和H2O2損傷程度。實驗分為正常對照組（NC組）、rhMG53組、H2O2組和H2O2+rhMG53組。分別采用CCK-8法、Transwell小室、流式細胞術和β-半乳糖苷酶染色檢測rhMG53蛋白對hUC-MSCs增殖、遷移、周期凋亡和衰老的影響。各組、各個時間點的吸光值采用析因設計的方差分析，組間比較采用單因素方差分析。結果 hUC-MSCs貼壁呈梭型生長，高表達間充質干細胞標志CD44、CD133、HLA-ABC，低表達CD34、CD45；H2O2對hUC-MSCs具有濃度和時間依賴性的損傷作用，確定200 μmol/L的H2O2處理16 h為hUC-MSCs氧化損傷的最適條件。與NC組相比，H2O2組細胞增殖（0.994±0.011 vs 1.331±0.014）、遷移率（8.15﹪±2.47﹪ vs 33.34﹪±3.62﹪）和S期細胞比例（29.67﹪±3.69﹪ vs 34.33﹪±4.25﹪）顯著降低，細胞衰老（44.07﹪±5.26﹪ vs 5.7﹪±1.42﹪）和凋亡比例（52.63﹪±5.76﹪ vs 4.65﹪±1.23﹪）顯著增加，差異具有統計學意義（均P < 0.05）；rhMG53組細胞增殖（1.509±0.086 vs 1.331±0.014）和遷移率（52.13﹪±5.46﹪ vs 33.34﹪±3.62﹪）顯著提高，S期比例（35.27﹪±4.79﹪ vs 34.33﹪±4.25﹪）變化差異無統計學意義（P > 0.05），細胞衰老（3.92﹪±1.31﹪vs 5.7﹪±1.42﹪）和凋亡比例（3.96﹪±1.06﹪ vs 4.65﹪±1.23﹪）顯著降低，差異具有統計學意義（均P < 0.05）。與H2O2組相比，H2O2+ rhMG53組細胞增殖（1.252±0.056 vs 0.994±0.011）、遷移率（18.93﹪±3.12﹪ vs 8.15﹪±2.47﹪）和S期比例（34.84﹪±3.45﹪ vs 29.67﹪±3.69﹪）顯著提高，細胞衰老（17.89﹪±2.64﹪ vs 44.07﹪±5.26﹪）和凋亡比例（4.65﹪±1.23﹪ vs 17.63﹪±2.56﹪）顯著降低，差異具有統計學意義（均P < 0.05）。結論 rhMG53對H2O2造成的hUC-MSCs氧化損傷有保護作用。

磷蛋白類； 臍帶； 間質干細胞； 創傷和損傷； 保護

干細胞具有自我更新和多向分化潛能，在多種疾病的治療中顯示了廣闊的應用前景，受到了廣泛的關注[1-3]。人臍帶間充質干細胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs）具有來源豐富、取材方便、免疫原性低、無倫理爭議等優點，是成體干細胞的理想來源，現已在神經系統疾病、免疫系統疾病和多種組織損傷的治療等方面進行了深入的研究[4-8]。……