膿毒血癥患者血清IL-6以及IL-10的表達及對免疫功能的影響

趙雪峰,魏秀華

(天津市第五中心醫院 重癥醫學科,天津300450)

膿毒血癥患者血清IL-6以及IL-10的表達及對免疫功能的影響

趙雪峰,魏秀華

(天津市第五中心醫院 重癥醫學科,天津300450)

目的 探討膿毒血癥患者血清IL-6以及IL-10的表達及對免疫功能的影響。方法 選擇2013年6月-2015年6月在我院重癥醫學科(ICU)收治的50例膿毒血癥患者為實驗組，2015年1月-2015年6月來我院體檢的健康人群50例為對照組，檢測兩組血清IL-6、IL-10以及T細胞亞群水平；分析IL-6、IL-10水平與CD4+/CD8+比值的相關性。結果 實驗組患者血清IL-6以及IL-10水平均明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。與對照組比較，實驗組CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+均有不同程度降低，差異有統計學意義(P<0.05)。相關分析結果顯示，IL-6、IL-10水平與CD4+/CD8+比值均呈顯著負相關 (r分別為-0.328,-0.452；P均<0.05)。結論 膿毒血癥患者血清中IL-6和IL-10水平呈高表達、T細胞亞群呈低表達，且三者間具有協同作用，可以共同促進病變的進展。因此，在早期階段檢測IL-6、IL-10及T淋巴細胞亞群可以作為早期診斷膿毒血癥的指標，對于疾病的預后判斷也有一定的指導意義。

膿毒血癥；IL-6；IL-10；免疫功能

(ChinJLabDiagn,2017,21:0279)

膿毒血癥是一種常見的感染性、多器官損傷的疾病，是由于患者繼發感染后，由多種炎癥介質參與的一種全身性綜合性疾病，可以引起休克、多臟器功能障礙綜合征(MODS)，是導致危重患者死亡的主要原因之一[1]。早期診斷膿毒血癥，可以及早的治療患者，降低病死率。因此，尋找一種可以早期診斷膿毒血癥，并預測MODS發生的監測指標，是急救醫學學者們研究的熱點問題。研究表明[2,3]，在膿毒血癥發生、發展是過程中，患者不僅僅處于免疫細胞過度激活的狀態，它經歷了多個環節，包括免疫激活、免疫抑制以及免疫類型轉化等。發生膿毒血癥后，患者體內的免疫細胞可以分泌大量的細胞因子，在這些細胞因子中，促炎因子IL-6和抑炎因子IL-10在免疫調節反應中具有十分重要的臨床意義[4,5]。2013年6月-2015年6月，我們檢測了膿毒血癥患者血清IL-6、IL-10的表達，旨在探討上述指標在膿毒血癥中的變化及其對免疫功能的影響，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

實驗組為2013年6月至2015年6月在我院重癥醫學科(ICU)收治的膿毒血癥患者50例。所有患者均符合《2001年國際膿毒血癥定義會議關于膿毒血癥診斷的新標準》[6]。排除各類自身免疫性疾病、HIV感染、急性心腦血管疾病、病毒性感染以及6個月內使用過影響免疫功能的藥物等的患者。其中男27例，女23例；年齡34-76歲，平均年齡(60.4±10.5)歲；發病原因：肺部感染24例，腹腔感染10例，胰腺炎8例，術后5例，其它3例。對照組為2015年1月-2015年6月來我院體檢的健康體檢者50例。其中男26例，女24例；年齡32-73歲，平均年齡(60.3±9.4)歲。兩組年齡、性別等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 檢測方法

在體檢者體檢當日以及膿毒血癥患者確診后，抽取所有研究對象空腹靜脈血5 ml，置于無抗凝劑的真空采血管內，充分搖勻，在4℃、3 000 r/min條件下離心10 min，取上層血清，采用酶聯免疫吸附實驗(ELISA)檢測IL-6及IL-10的含量。試劑盒均購自武漢博士德生物技術有限公司，雷杜RT-6000酶標儀購自深圳市雷杜電子有限公司。EPIC-SXL-MCL流式細胞儀測定T細胞亞群，試劑盒采用美國Becton Dickinson公司生產的CD3-PE-CY5、CD4PE、CD8PE試劑盒。

1.3 質量控制

為了保證研究資料以及數據的準確性、可靠性，在研究過程中，我們采取了一系列的質量控制措施，具體包括：(1)由我院ICU具有豐富臨床經驗的醫師嚴格根據膿毒血癥的診斷以及排除標準確定入選病例；(2)所有參與研究的人員均經經過統一的技術培訓；(3)選用準確的測量儀器，并在進行檢測進行質控；(4)檢測指標均分別采用雙份血清進行檢測；(5)實驗過程由專業的技術人員進行指導，嚴格按照操作規范以及試劑說明書進行，安排專人監督加樣、配樣過程；(6)所有數據資料均由雙人獨立錄入數據庫中，安排專人核對所錄入的數據。

1.4 觀察指標

比較兩組血清IL-6及IL-10水平；外周血CD3+、CD4+、CD8+水平及CD4+/CD8+比值；分析IL-6、IL-10水平與CD4+/CD8+比值的相關性。

1.5 統計學處理

2 結果

2.1 兩組血清IL-6及IL-10水平比較

如表1所示，實驗組患者血清IL-6及IL-10水平均明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。

表1 兩組血清IL-6及IL-10水平比較

注：*兩組間比較P<0.05。

2.2 兩組免疫功能比較

如表2所示，與對照組比較，實驗組CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+均有不同程度降低，差異有統計學意義(P<0.05)。

表2 兩組免疫功能比較

注：T淋巴細胞CD3+、CD4+、CD8+單位為：個/μl；*兩組間比較P<0.05。

2.3 IL-6、IL-10水平與CD4+/CD8+比值的相關性分析

相關分析結果顯示，IL-6、IL-10水平與CD4+/CD8+比值均呈顯著負相關(r分別為-0.328,-0.452；P均<0.05)。

3 討論

膿毒血癥是繼發于各種嚴重疾病后常見的并發癥，比如燒傷、嚴重創傷、感染、休克、以及各種大手術后等，患者并發膿毒血癥后的預后差、住院時間長、病死率較高。目前，有關膿毒血癥的發病機制尚未明確，研究認為[7,8]，在膿毒血癥的發生和發展過程中，炎癥反應和免疫功能紊亂發揮著至關重要的作用。一般認為，各種炎性反應介質的釋放、轉運和堆積是膿毒血癥和(或)向MODS惡化的關鍵的原因之一。此外，機體的免疫狀態也在膿毒血癥的發生、發展以及轉歸中起著重要的作用，在抗感染免疫中輔助性T細胞釋放的細胞因子和T淋巴細胞分化、增殖、合成以及分泌的細胞因子起著重要的作用[9]。

IL-6是重要的炎性因子，主要由表皮細胞和單核巨噬細胞表達，在抑制機體炎癥反應、引發炎癥發生等方面均可起到重要的作用，在嚴重損傷以及組織修復的過程中也起著十分重要的作用[10,11]。IL-10是由B細胞刺激激活的一種內源性抑炎因子，由T細胞、B細胞和巨噬細胞產生，可以抑制免疫應答[12]。IL-6、IL-10等炎癥因子的過量釋放表達，可能是引起ALI/ARDS，甚至發生難以控制的MODS的重要機制之一。本次研究結果顯示，實驗組患者血清IL-6及IL-10水平均明顯高于對照組，提示IL-6及IL-10參與了膿毒血癥的發生發展過程。膿毒血癥的病理過程中炎癥激活與免疫抑制共同存在，而免疫抑制則表現為淋巴細胞增殖能力的降低，以輔助性淋巴細胞型反應為主的中性粒細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞以及大量淋巴細胞的凋亡為主。目前，大量研究表明[13,14]，由于凋亡誘導的淋巴細胞丟失，導致膿毒血癥患者淋巴細胞數量明顯的減少，機體免疫力也大大的降低。本研究發現，膿毒血癥患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均較正常對照組明顯的降低，也提示膿毒血癥患者存在T淋巴細胞的缺失。

研究表明，膿毒血癥時機體不僅處于促炎過程，同時還伴有免疫功能紊亂[15]。由于皮膚和脾內的樹突狀細胞的大量喪失，抗原遞呈功能也隨之減弱；另外，加上廣泛性的淋巴細胞凋亡，抗體的產生明顯的減少，淋巴細胞激活出現障礙，使得機體免疫功能顯著的減弱或是受到抑制，導致免疫功能失調或紊亂。研究認為[16]，膿毒血癥患者淋巴細胞凋亡與血漿的IL-6和IL-10水平有著十分密切的關系。IL-6可以調節多種細胞的生長與分化，具有調節免疫應答、急性期反應以及造血功能，在機體的抗感染免疫反應中也起到重要的作用。IL-10是一種多功能負性調節因子。本研究結果顯示，IL-6、IL-10水平與CD4+/CD8+比值均呈顯著負相關，提示兩者生理作用表現為相互協同或相互制約，共同促進了膿毒血癥的發生和發展。

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Expression of serum IL-6 and IL-10 in sepsis patients and influence on immune system

ZHAOXue-feng,WEIXiu-hua.

(IntensiveCareUnit,TheFifthCenterHospitalofTianjin,Tianjin300450,China)

Objective To investigate the expression of serum IL-6 and IL-10 in sepsis patients and influence on immune system.Methods 50 cases of sepsis patients in ICU in our hospital from June 2013-June 2015 were selected as the experimental group,50 healthy people to examination in our hospital from January 2015 -June 2015 were selected as control group.The serum IL-6,IL-10 and T cell subsets of the two groups were detected.The correlation between serum IL-6,IL-10 and the ratio of CD4+/CD8+were analysed.Results The serum IL-6 and IL-10 levels of the experimental group were significantly higher than that of the control group,the differences were statistically significant (P<0.05).Compared with the control group,CD3+,CD4+,CD8+and CD4+/CD8+in the experimental group were reduced to varying degrees,the difference was statistically significant (P<0.05).The results of correlation analysis showed that IL-6,IL-10 and the ratio of CD4+/CD8+was negatively correlated (r=-0.328,-0.452;P<0.05).Conclusion There were higher expression of IL-10 and IL-6,and lower expression of T cell subsets in serum of patients with sepsis;The effect is congenerousbetween the three common,which promote lesions progress.Therefore,the detection of IL-6,IL-10 and T lymphocyte subsets in the early stages can be an indicator in the diagnosis of sepsis,and help to estimate the prognosis.

sepsis;IL-6;IL-10;immune function

1007-4287(2017)02-0279-03

R446.6

A

2016-02-14)