子宮內(nèi)膜癌組織中ER、PR、p53、Ki-67的表達(dá)及其與臨床病理特征的相關(guān)性分析

趙 琦

(柳州市婦幼保健院 婦科，廣西 柳州545001)

子宮內(nèi)膜癌組織中ER、PR、p53、Ki-67的表達(dá)及其與臨床病理特征的相關(guān)性分析

趙 琦

(柳州市婦幼保健院 婦科，廣西 柳州545001)

子宮內(nèi)膜癌(endometrial carcinoma)是女性最常見的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一，其發(fā)病率逐年增高，且有年輕化趨勢(shì)。子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，但臨床大量研究已經(jīng)證實(shí)性激素水平異常可能是導(dǎo)致子宮內(nèi)膜癌發(fā)病的主要原因之一，同時(shí)抑癌基因的抑制、原癌基因的激活等也參與了子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展過程[1-4]。本研究主要對(duì)子宮內(nèi)膜癌組織中雌激素受體(estrogen receptor,ER)、孕激素受體(progestin reseptor,PR)、53抑癌基因(p53)、抗原Ki-67(Ki-67)的表達(dá)及其與臨床病理特征的相關(guān)性進(jìn)行分析，旨在探討其在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)及發(fā)展中的作用，以期為子宮內(nèi)膜癌的臨床診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院2009年1月-2015年12月期間收治的100例子宮內(nèi)膜癌患者組織標(biāo)本，納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)均病理確診為子宮內(nèi)膜癌；(2)子宮內(nèi)膜癌組織標(biāo)本均為患者未行放療、化療和激素治療狀態(tài)下取得；(3)未合并其他惡性腫瘤；(4)臨床資料完整。入選患者年齡36-87歲，平均(54.74±8.50)歲，初潮年齡11-18(14.33±1.31)歲，孕次0-8(3.20±0.42)次，產(chǎn)次0-6次，平均(2.02±0.24)次，其中絕經(jīng)患者76例，未絕經(jīng)者24例；合并高血壓14例，糖尿病8例，冠心病7例；病理類型：子宮內(nèi)膜樣腺癌86例，其他14例；依據(jù)2009年FIGO頒布的病理分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期70例，Ⅱ期12例，Ⅲ期-Ⅳ期18例；組織分化程度：G1 25例，G2 57例，G3 18例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者12例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移88例。選取同期患子宮肌瘤、子宮脫垂、子宮腺肌癥等疾病的50例患者行手術(shù)切除子宮取得的正常子宮內(nèi)膜組織為對(duì)照，入選患者組織標(biāo)本均病理確診，1年內(nèi)無激素治療史，未合并其他惡性腫痛，年齡38-84歲，平均(55.18±9.26)歲，初潮年齡12-18歲，平均(14.51±1.33)歲，孕次0-7次，平均(3.22±0.40)次，產(chǎn)次0-6次，平均(1.98±0.21)次，其中絕經(jīng)患者32例，未絕經(jīng)者18例；合并高血壓6例，糖尿病3例，冠心病3例。子宮內(nèi)膜癌患者與對(duì)照患者在年齡、初潮年齡、孕次、產(chǎn)次、絕經(jīng)狀態(tài)、合并癥等方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

采用免疫組化SP法觀察標(biāo)本組織中ER、PR、p53、Ki-67的表達(dá)情況。具體步驟如下：將福爾馬林固定的組織標(biāo)本以石蠟包埋后連續(xù)切片，厚度4 μm，行脫蠟處理，在3%的過氧化氫室溫下孵育10 min，蒸餾水沖洗，EDTA抗原修復(fù)液進(jìn)行組織抗原修復(fù)，內(nèi)源性氧化物酶封閉，磷酸鹽緩沖液(PBS)進(jìn)行沖洗，滴加一抗，在4℃下進(jìn)行過夜處理后再次PBS緩沖液沖洗后滴加二抗，在37℃溫度下孵育30 min，PBS緩沖液沖洗，DAB顯色，自來水沖洗后進(jìn)行復(fù)染后進(jìn)行脫水、透明及樹脂封片，按照檢測(cè)試劑盒操作說明進(jìn)行。檢測(cè)中以PBS代替一抗(作為陰性對(duì)照)，以已知的陽(yáng)性切片為陽(yáng)性對(duì)照。檢測(cè)所用ER、PR、p53、Ki-67試劑盒均為美國(guó)Zymed公司生產(chǎn)。

1.3 結(jié)果判定

ER、PR、p53、Ki-67陽(yáng)性時(shí)均表現(xiàn)為細(xì)胞核內(nèi)棕黃色。計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比：陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比≤10%時(shí)評(píng)定1分，>10%-50%之間評(píng)定2分，>50%-75%評(píng)定為3分，>75%評(píng)定為4分；評(píng)定細(xì)胞著色強(qiáng)度：無色評(píng)定0分、淺黃色評(píng)定1分、棕黃色評(píng)定2分、棕褐色評(píng)定3分；將陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比得分與染色強(qiáng)度得分相乘，最后得分在3分及以下為(-)，>3-6分為(+)，>6-8分為(++)，>8-12分為(+++)，>3分者均為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ER、PR、p53、Ki-67在子宮內(nèi)膜癌與正常子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)狀況

ER、PR在正常子宮內(nèi)膜組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為96.00%、94.00%，高于子宮內(nèi)膜癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率的66.00%、62.00%，p53、Ki-67在正常子宮內(nèi)膜組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為2.00%、16.00%，低于子宮內(nèi)膜癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率的48.00%、72.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 ER、PR、p53、Ki-67在子宮內(nèi)膜癌與正常子宮內(nèi)膜組織中的陽(yáng)性表達(dá)比較(n,%)

2.2 不同臨床病理特征子宮內(nèi)膜癌患者子宮內(nèi)膜癌組織中ER、PR、p53、Ki-67的表達(dá)狀況

ER陽(yáng)性表達(dá)與患者絕經(jīng)狀況、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況無關(guān)(P>0.05)，與病理類型、病理分期和組織分化程度有關(guān)(P<0.05)；PR陽(yáng)性表達(dá)與患者絕經(jīng)狀況、病理分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況無關(guān)(P>0.05)，與病理類型、組織分化程度有關(guān)(P<0.05)；p53陽(yáng)性表達(dá)與患者絕經(jīng)狀況、病理類型、病理分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況無關(guān)(P>0.05)，與組織分化程度有關(guān)(P<0.05)；Ki-67陽(yáng)性表達(dá)與患者絕經(jīng)狀況、病理類型和組織分化程度無關(guān)(P>0.05)，與病理分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況有關(guān)(P<0.05)，見表2。

表2 不同臨床病理特征子宮內(nèi)膜癌患者子宮內(nèi)膜癌組織中ER、PR、p53、Ki-67陽(yáng)性表達(dá)比較(n,%)

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，起源與子宮內(nèi)膜上皮，可根據(jù)臨床特點(diǎn)分為I型雌激素依賴型與II型非雌激素依賴型，其發(fā)生及發(fā)展尚未完全研究清楚，但研究普遍顯示性激素水平異常及抑癌基因的抑制、原癌基因的激活等與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生及發(fā)展有關(guān)。[1-4]。

最早在1983年Bokhman就提出了I型雌激素依賴型子宮內(nèi)膜癌與長(zhǎng)期雌激素刺激有關(guān)，后隨著臨床研究的深入，臨床大量研究顯示ER與PR在子宮內(nèi)膜癌組織中存在一定程度的表達(dá)缺失[5-8]，如表達(dá)率相對(duì)較高時(shí)患者往往在采用性激素治療時(shí)療效較好，同時(shí)有研究也顯示ER與PR表達(dá)與患者預(yù)后關(guān)系密切[9,10]，這可能與對(duì)性激素治療敏感等有關(guān)。本研究對(duì)ER和PR在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示正常子宮內(nèi)膜組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別達(dá)到了96.00%、94.00%，在子宮內(nèi)膜癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率僅為66.00%、62.00%，同時(shí)分析其與臨床病理特征間的相關(guān)性，ER陽(yáng)性表達(dá)與患者絕經(jīng)狀況、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況無關(guān)，與病理類型、病理分期、組織分化程度有關(guān)，PR陽(yáng)性表達(dá)與患者絕經(jīng)狀況、病理分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況無關(guān)，與病理類型、組織分化程度有關(guān)，子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中ER及PR表達(dá)明顯低于其他類型癌，而且隨著組織分化程度的降低陽(yáng)性表達(dá)率明顯降低，表面ER與PR與患者生物學(xué)特征關(guān)系極為密切。

p53為抑癌基因，具有抑制細(xì)胞增長(zhǎng)、調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄及誘導(dǎo)凋亡的作用，p53的點(diǎn)突變被認(rèn)為是導(dǎo)致其失去抑癌作用的主要原因[11,12]，發(fā)生突變后的p53還可促使正常細(xì)胞惡化，本研究中子宮內(nèi)膜癌增長(zhǎng)中p53陽(yáng)性表達(dá)率有所升高，同時(shí)與組織分化程度關(guān)系密切，表明其與子宮內(nèi)膜癌的惡性程度有關(guān)，惡性程度高的低分化子宮內(nèi)膜癌往往預(yù)后較差，因此此指標(biāo)還可間接反映及評(píng)估預(yù)后。Ki-67是與細(xì)胞有絲分裂有關(guān)的一種增殖細(xì)胞抗原，半衰期相對(duì)較短不足1 h，能反映出細(xì)胞增殖狀態(tài)，因此Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率越高往往代表細(xì)胞增殖越活躍[13-15]，本研究中子宮內(nèi)膜癌增殖中Ki-67表達(dá)率也明顯高于子正常子宮內(nèi)膜組織，同時(shí)與患者病理分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況有關(guān)，而淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移往往與癌細(xì)胞的侵襲能力、預(yù)后關(guān)系密切，因此Ki-67的表達(dá)升高提示了患者更容易出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，往往預(yù)后可能更差，值得注意。

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