2例犬傳染性性病腫瘤的病理學診斷

蔡雙雙 ， 鄭國紅 ， 劉發志

(湖北三峽職業技術學院農學院 ， 湖北 宜昌 443000)

2例犬傳染性性病腫瘤的病理學診斷

蔡雙雙 ， 鄭國紅 ， 劉發志

(湖北三峽職業技術學院農學院 ， 湖北 宜昌 443000)

犬傳染性性病腫瘤(CTVT)，也被稱為犬傳染性交媾性腫瘤和Sticker′s肉瘤，是一種能夠在犬之間主要通過性傳播的一種傳染性生殖道腫瘤疾病，本病是自然發生的同種移植性腫瘤，其形成原因目前尚不清楚[1]。一般發生于性成熟的有交配經歷的年青犬，多發年齡在 2～ 5 歲，沒有交配經歷的幼犬或青年犬等還未發現過有該病的報道[2-3]。CTVT 轉移不常見，但有報道可轉移入局部淋巴結、腦、眼睛、鼻丸以及胸腹部的內臟器官[1，4]，多見于幼犬和免疫缺陷的犬。本試驗將2例疑似犬傳染性性病腫瘤組織進行病理組織學觀察，并對Vimentin、CK、Lysomes和AAT四個指標進行了免疫組織化學染色，結合臨床癥狀對該腫瘤進行病理學診斷，從而豐富犬傳染性性病腫瘤的臨床資料。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗材料 本試驗中雌性犬病例由主人送往深圳市福華寵物醫院就診的金毛犬。另一例雄性犬由主人送往武漢市明星寵物醫院就診的日本秋田犬，切除的疑似腫瘤組織送往華中農業大學動物醫學院病理實驗室制作蠟塊并保存。

1.2 試驗試劑 鼠抗CK抗體(1∶200)，鼠抗Vimentin抗體(1∶200)，DAB顯色液(固體)，SABC試劑盒，5%BSA封閉液，均購自武漢博士德生物工程有限公司；兔抗Lysomes抗體(1∶200)，兔抗AAT(1∶200)抗體，購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 臨床診斷 通過對病犬的臨床檢查，了解發病過程，了解疑似腫瘤的位置，初步診斷后，經主人同意切除腫瘤。并對切除腫瘤觀察病理特征。

1.3.2 腫瘤組織的病理學檢查 將切除的腫塊放在10%福爾馬林溶液中固定3 d后取材、脫水、浸蠟、包埋。并將組織切成3微米厚度的切片。一部分進行H.E.染色，觀察病理變化；另一部分進行免疫組織化學法(SABC法)染色，染色指標包括Vimentin、CK、Lysomes和AAT。H.E.染色采用常規的染色方法，免疫組織化學SABC染色方法參考武漢博士德生物工程有限公司的即用型SABC免疫組化試劑盒內說明書。

1.3.3 采圖與觀察 將H.E.染色切片和免疫組化切片在顯微鏡下觀察，并通過NIS-Elements高清晰度彩色圖文分析系統配合Nikon80i生物光學顯微鏡對典型病變進行顯微采圖。

2 結果

2.1 雌性金毛犬的臨床癥狀和病理學檢查結果 本病例為兩歲雌性金毛犬，患犬在就診前2個月分娩，分娩后開始陰道流血不止，雖經治療，但是沒有明顯療效。對陰道部進行檢查發現有疑似腫瘤腫塊，對腫塊進行切除。

對疑似腫瘤組織的病理組織學檢查可見瘤組織位于陰道黏膜(見中插彩版圖1A)，瘤組織內血管豐富，瘤細胞多呈圓形或卵圓形，細胞體積大小不一，細胞核大且多為圓形或卵圓形，細胞質較豐富(見中插彩版圖1B)。

免疫組織化學染色結果顯示，瘤組織內瘤細胞的Vimentin表達陽性(見中插彩版圖1C)，CK表達呈陰性(見中插彩版圖1D)，Lysomes表達呈強陽性(見中插彩版圖1E)，AAT呈部分表達陽性(見中插彩版圖1F)。

A：瘤組織位于陰道黏膜下(H.E.染色)； B：瘤細胞排列密集，多為圓形(H.E.染色)； C：瘤細胞的Vimentin表達陽性(DAB-IHC)； D：瘤細胞CK表達呈陰性(DAB-IHC)； E：瘤細胞Lysomes表達呈強陽性(DAB-IHC)； F：瘤細胞AAT呈部分表達陽性(DAB-IHC)。

2.2 雄性秋田犬的臨床癥狀和病理學檢查結果 本病例為3歲雄性日本秋田犬。患犬就診時精神尚可，食欲正常，行動亦未見異常，但見病犬包皮口的皮毛上有血跡，并且龜頭部有滴血現象。經檢查發現該犬陰莖根部有直徑約3 cm的腫物，懷疑為腫瘤。經與主人溝通同意手術切除陰莖。手術切除陰莖后可清楚地看到腫瘤，瘤體基本呈粉紅色，與包皮及陰莖的顏色一致。表面呈菜花樣，分葉明顯，質地脆而易脫落，局部有出血和壞死(見中插彩版圖2A)。

對疑似腫瘤組織的病理組織學檢查可見瘤組織位于皮膚表皮下，瘤細胞多呈圓形或卵圓形，細胞體積大小不一，細胞核為圓形或卵圓形，細胞質較豐富(見中插彩版圖2B)。

免疫組織化學染色結果顯示，瘤組織內瘤細胞的Vimentin表達陽性(見中插彩版圖2C)，CK表達陰性(見中插彩版圖2D)，部分瘤細胞Lysomes表達陽性(見中插彩版圖2E)，AAT呈強陽性表達(見中插彩版圖2F)。

A：瘤組織位于皮膚表皮下(H.E.染色)； B：瘤細胞排列密集，多為圓形(H.E.染色)； C：瘤細胞的Vimentin表達陽性(DAB-IHC)； D：瘤細胞CK表達呈陰性(DAB-IHC)； E：部分瘤細胞Lysomes表達呈陽性(DAB-IHC)； F：瘤細胞AAT呈強陽性表達(DAB-IHC)

3 討論

犬的傳染性性病腫瘤組織呈大小不一的結節狀，有些結節融合后形成菜花樣結構。其主要生長在母犬的陰蒂窩、陰道內壁和外陰表面，或生長在公犬的包皮內側面和陰莖上。母犬表現為陰道長時間持續性滴血，十分容易與發情相混淆，但其不愿意交配。公犬主要表現為包皮口有淡紅色血性分泌物，在其包皮內側或陰莖上會出現與母犬一樣形態的增生物。本文中兩例病犬的臨床表現和眼觀病變與文獻報道一致[5-7]，可以診斷為傳染性性病腫瘤。

通過對大量的CTVT對溶菌酶和AAT的表達情況分析，證實了這兩個標記可以應用在CTVT，它們用于鑒別診斷是有用的，因為他們的表達可以排除淋巴瘤、無色素性黑色素瘤、低分化癌、低分化的肥大細胞瘤(Mozosetal,1996；Perezetal,1998)。

實驗中CTVT對波形蛋白的表達呈陽性，對角蛋白的表達呈陰性。這些結果與以前的研究結果是一致的。因為9/10的淋巴瘤不表達波形蛋白，所以這種抗體可以用來鑒別生殖器外的CTVT和某些類型的淋巴瘤。角蛋白和波形蛋白的聯合應用可以用來鑒別外陰CTVT和低分化癌[4，8]。

據實驗結果可知，該腫瘤對溶菌酶，AAT，波形蛋白特異性免疫染色的反應為陽性，對角蛋白的免疫染色為陰性，表明該腫瘤細胞來源于組織細胞。通過對該病例中病犬的臨床癥狀，血常規檢查，生化檢驗以及病理學診斷，可以確診該腫瘤為傳染性性病腫瘤。

本實驗立足于寵物臨床實際病例的診斷，運用實驗室免疫組化診斷的方法對其進行確診，大大提高了臨床腫瘤病例診斷的科學性，具有較大的臨床價值和意義。

志謝：深圳市福華寵物醫院和武漢市明星寵物醫院提供腫瘤病例資料。

[1] Perez Jose, Day Michael J, Mozos Elena.Immunohistochemical study of the local inflammatory infiltrate in spontaneous canine transmissible venereal tumor at different stages of growth[J].Veterinary Immunology and Immunopathology, 1998，164:133-147.

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[5] 張信軍，陳靜，徐劍蓉.犬傳染性性病腫瘤的診治[J].畜牧與獸醫，2014，46(4):98-100.

[6] 李培德，侯鳳香，胡霖，等.診治犬傳染性性病腫瘤[J].中國獸醫雜志，2015，51(6)：86-87.

[7] 董悅農，袁占奎，楊萬蓮.犬轉移性性腫瘤的治療[J].中國獸醫雜志，2005，41(5):34-35.

[8] Mozos E, Mendez A, Gomez-Villamandos J C,etal. Immunohistochemical Characterization of Canine Transmissible Venereal Tumor[J].Veterinary Pathology,1996,33:257-263.

S858.292

B

0529-6005(2017)08-0076-02

2017-03-20

蔡雙雙(1967-)，女，教授，本科，主要從事動物藥理、動物疫病防治的教學和技術推廣工作，E-mail：541311891@qq.com