青蛤苗種繁育技術及不同鹽度對青蛤發育各階段的影響

梁健+李永仁+郭永軍+高山+董洪寶+邢克智+閆喜武

摘 要：于2015年7月在天津大港地區開展青蛤的工廠化人工育苗生產性試驗，以探索青蛤最適的孵化密度和培育密度；并通過設置10個鹽度階梯（5‰～50‰），研究了不同鹽度對青蛤發育各階段的影響。試驗結果表明：青蛤受精卵孵化密度為8～12個/mL，其孵化率能達較高水平，幼蟲培育密度為8～12個/mL時幼蟲生長速度和存活率可達較高水平；浮游期幼蟲、變態期幼蟲及稚貝的最適鹽度范圍均是20‰～25‰，最利于青蛤浮游幼蟲的生長，其變態率高，畸形率低，D形幼蟲游動迅速，攝食積極。此鹽度也最利于稚貝的生長。

關鍵詞：青蛤；鹽度；孵化；成活率

青蛤（Cyclina sinensis）屬簾蛤科，棲息在沿海灘涂泥灘地帶，為廣溫、廣鹽性貝類。其營養豐富，味道鮮美，深受人們喜愛，曾廣泛分布于沿海大部分海水池塘，但由于缺乏保護意識，長期過度采捕，導致自然資源大幅減少，天津地區現僅存于塘沽與大港的個別海水池塘[1-3]。因此對青蛤的人工養殖正逐步開展起來，并取得良好的收益。養殖青蛤投資少、見效快，但是由于苗種缺乏，限制了青蛤養殖業的發展[4-6]。

目前來說天津地區養殖貝類的苗種主要來自南方的一些沿海地區，但這樣的苗種并不能完全適應本地的養殖環境，造成越冬養殖時大量死亡，限制天津地區的青蛤產業發展。利用本地貝類種群，進行工廠化人工繁育土著苗種，是在天津發展貝類養殖產業的重要前提[7-8]。而發展青蛤的人工育苗技術，為青蛤的養殖提供本地苗種，可以更快地實現農民增收、企業增效、產業發展。

關于青蛤方面的研究起步時間較晚，我國學者對青蛤的生態結構、繁殖生物學、生活習性等都進行了研究，在工廠化和土池育苗試驗成功后，又對青蛤幼蟲的餌料，孵化和培育時的溫度、鹽度，附著基的選擇和其他方面都做了深入的研究，大規模青蛤育苗技術和水平都比之前更進一步。但這些研究的對象主要為南方當地品種，而我國海岸線很長，地理環境存在著巨大差異。閆喜武[9]等報道過菲律賓蛤仔大連群體和莆田群體在卵徑、D形幼蟲大小、浮游期長短及平均日增長量上均存在差異。鹽度是影響雙殼類存活、生長發育的重要因素之一，當鹽度不適宜時會降低海洋貝類幼蟲對食物的消化吸收效率和不良環境的抵抗能力，嚴重影響貝類幼蟲的存活和生長能力[10]。關于海水鹽度對于貝類生長發育的影響國內外已有不少報導，但因種類和發育階段的不同，適應范圍的差異也比較大[11-12]。在繁殖過程中，貝類幼蟲對鹽度的變化較為敏感，在最適鹽度范圍內進行青蛤苗種繁育工作可以保證幼蟲有較快的生長速度，同時提高苗種的存活率[13-15]。因此，本文研究了鹽度變化對天津土著青蛤浮游期及稚貝期的影響，對青蛤不同時期的存活生長進行了比較，分析了不同時期的青蛤對鹽度的適應策略，對在天津開展青蛤本地苗種繁育具有重要意義。

1 試驗材料

本次人工育苗試驗于2015年4月中旬開始進行，分兩批次在天津市濱海新區海升水產養殖有限公司的沉淀池中采捕二齡的青蛤，選擇殼面無損壞，活力良好，殼長大于30 mm的個體作為種貝，種貝為本地土著品種。

2 試驗設計

2.1 孵化密度、幼蟲培育密度對青蛤幼蟲變態率、生長和存活影響

挑選好的種貝裝入扇貝籠中吊掛在室內水泥池中，經25天左右的升溫催熟達到性成熟，通過陰干流水等方法刺激種貝產卵排精，卵受精4 h后進行洗卵，以免造成受精卵產生畸形。洗卵后將受精卵分布到孵化池中，調整密度為4、8、12、16個/mL，大概20 h后發育到D形幼蟲，測量不同孵化密度下的孵化率。每天半量換水一次，水溫25～28 ℃，青蛤培育期間鹽度18‰～22‰，pH值8.4～8.6。

2.2 鹽度對青蛤各時期生長發育和存活的影響

青蛤幼蟲及稚貝的培育容器為2L的燒杯，在5‰～50‰之間設計10個梯度，分別為5‰、10‰、15‰、20‰、25‰、30‰、35‰、40‰、45‰、50‰，并設一個平行試驗組。試驗所用的海水都是經過沙濾的海水，用海水晶或淡水調節至所需的鹽度，使用日本ATAGO手持光學鹽度計測定鹽度，水溫在25～28 ℃。受精卵孵化密度為15個/mL，浮游期幼蟲培育密度為8個/mL，每天半量換水一次，測定不同鹽度下青蛤受精卵孵化率、浮游期幼蟲和稚貝的生長、存活及變態率。

孵化期試驗：凡出現殼面扭曲，左右殼不對稱，直鏈絞合部彎曲，殼緣有缺刻，面盤異常的D形幼蟲計為畸形幼蟲。

浮游期試驗：在不同鹽度的10個燒杯中布置相同密度（8個/mL）的青蛤D形幼蟲，平均殼長在111±6.41 μm，共培育5 d（青蛤浮游期相對較短）。

稚貝期試驗：在育苗生產的水泥池中取大小規格基本一致的匍匐幼蟲用于稚貝變態試驗，平均殼長在180±9.18 μm，培養20 d左右（雙水管稚貝出現為止）。

3 結果

3.1 孵化率

如表1所示，青蛤受精卵孵化密度為8～12個/mL時，其孵化率能達到80%以上，而過低或過高的培育密度均會影響受精卵的孵化率。

由表2和表3可知，4個/mL的培育密度下生長速度最快，但存活率較低，16個/mL的培育密度生長速度最慢，且存活率也最低。在8～12個/mL的條件下生長速度和存活率均處于較高水平。

3.2 鹽度對青蛤孵化情況的影響

由圖1可知，在25～28 ℃的水溫下，青蛤受精卵可在10‰～40‰的鹽度范圍內發育到D形幼蟲，但在10‰和40‰的鹽度中變態非常低，分別為11.5%和22.6%，絕大多數受精卵在發育到擔輪幼蟲前后就不再發育，不久沉底死亡；在鹽度5‰、45‰和50‰的孵化條件下，受精卵不能正常分裂發育；適合受精卵孵化鹽度范圍是15‰～30‰，而最適孵化的鹽度范圍為20‰～25‰，其變態率在82.3%～84.6%，且畸形率低，D形幼蟲游動迅速，攝食積極。

3.3 鹽度對浮游幼蟲生長、存活及變態的影響

D形幼蟲剛放入5‰的鹽度環境中后，全部緊閉雙殼，沉入杯底，顯微鏡下觀察殼內的面盤和胃內纖毛仍在運動，48 h后全部死亡；在10‰鹽度環境下，D形幼蟲在24 h內游動正常，未表現出不適狀態，但隨時間的延長死亡量逐漸增多，3 d后達到45%以上，且存活下來的幼蟲生長速度偏慢，試驗結束時的平均生長率僅為4.76 μm/d；D形幼蟲對高鹽度反應明顯，在鹽度40‰下5d后的存活率為36.2%，而存活下來的幼蟲大多處于殼頂中期，并無法變態成匍匐幼蟲。鹽度45‰組中，5 d后的幼蟲存活僅為12.5%，幾乎沒有生長，平均生長率2.64 μm/d，試驗結束時仍處于D形幼蟲階段。而在鹽度50‰環境下的幼蟲游動異常，在24 h內便全部死亡，無法存活；青蛤浮游幼蟲在15‰～30‰的鹽度范圍下適合生長，20‰～25‰是最適宜青蛤浮游幼蟲的鹽度范圍（表4）。

3.4 鹽度對稚貝生長、存活及變態的影響

表5所示，匍匐幼蟲在鹽度5‰的低鹽環境和45‰的高鹽環境中，在24 h時死亡率即超過50%，經過一段時間的培養僅有極少量個體發育至單水管稚貝，但無法發育至雙水管稚貝；在50‰的超高鹽度環境中72 h內匍匐幼蟲便全部死亡；在鹽度40‰組中經過22 d的發育有12.5%的個體發育至雙水管稚貝，但次鹽度下的稚貝生長速度較慢，平均日生長率僅為4.82 μm/d，且大小參差不齊，活力較差，殼表面粘有大量污物；鹽度在10‰～35‰的各試驗組中，雙水管稚貝的存活率均超多50%，即超50%的個體發育變態成雙水管稚貝，且在匍匐幼蟲時期運動能力強，足強勁有力，攝食良好，生長速度較快。其中鹽度20‰～25‰中，單水管期稚貝的存活率均超過85%，日生長率也超過了10 μm/d，發育到雙水管稚貝時的存活率仍然在80%以上，且日生長率達到12 μm/d左右，稚貝不僅大小整齊、活力良好，而且所需的變態時間也為最短，僅需14 d左右。10‰～35‰為稚貝生長的適宜鹽度范圍，在20‰～25‰之間最為合適。

4 討論

4.1 孵化密度、培育密度對生長、存活的影響

本研究結果顯示青蛤受精卵孵化密度為8～12個/mL時，其孵化率能達到80%以上；生長速度最快是在4個/mL的培育密度下，但存活率較低，生長速度最慢是在16個/mL的培育密度，且存活率也最低。在8～12個/mL的條件下生長速度和存活率均處于較高水平，綜合考慮，青蛤的最適培育密度為8～12個/mL。

4.2 青蛤發育情況

灘涂貝類是我市主要的水產產業之一，但貝類苗種來自外地，在本地適應性差。建立本地土著青蛤群體的育苗技術，有助于降低養殖風險。天津青蛤群體主要生活于海水池塘中，鹽度差異顯著，青蛤的幼蟲發育與常見的文蛤、菲律賓蛤仔等灘涂雙殼類相比較有許多不同，其卵徑和D形幼蟲均要大于其他種類，但浮游期最短、附著變態時幼蟲規格最小，20 d后變態成雙水管稚貝僅320～340 μm，比其他種類相同天數的稚貝殼長要小，說明青蛤稚貝的生長速度并不快。本研究中青蛤的最快生長速度為12.48 μm/d（鹽度20‰時），較其他種類要慢一些，符合上述結論。青蛤浮游期短，說明從外界獲取食物的時間短，外源性能量積累相對較少，這可能是導致其變態規格相對較小的原因。

4.3 適宜青蛤生長的鹽度

生活在海洋中的貝類，必然受到鹽度的影響。由于不同種類對海水環境的要求不同，造成了對不同鹽度的適應性[16]。海水鹽度與貝類滲透壓的調節緊密相關，一旦海水鹽度的變化范圍超過了海洋生物的調節能力，就可能造成生物體的死亡[17]。本試驗得出孵化期和浮游期幼蟲的適宜鹽度范圍為15‰～30‰，變態期的適宜鹽度范圍10‰～35‰，最適鹽度范圍均為20‰～25‰。結果表明，幼蟲對低鹽環境的適應能力要強于高鹽環境，并且在低鹽環境中生長速度快于高鹽。隨著幼蟲的發育和相應器官的形成，對鹽度的耐受能力逐漸增加，適宜鹽度范圍也逐漸變廣。這種現象廣泛出現在廣鹽性貝類中，如泥蚶、文蛤等。而對于狹鹽性貝類正好相反，如菲律賓蛤仔等[18-20]。這種適應性可能是由于青蛤自然分布于河口附近灘涂的中高潮帶處，經常性的淡水匯入加之長期的自然進化造成青蛤對鹽度的廣泛適應性，并表現出對低鹽環境的適應能力高于高鹽環境。

5 結論

以上試驗結果對青蛤人工育苗生產有重要的指導作用：

土池育苗或工廠化育苗前期海水鹽度變化幅度應控制在20%～25%為宜；室內人工育苗生產中，青蛤受精卵孵化密度為8～12個/mL時，能夠保證有較高的孵化率；青蛤的最適培育密度為8～12個/mL。

進入變態期后，幼蟲要經歷足、鰓、次生殼、進出水管的形成及面盤的退化等一系列的生理機能和生活習性的重大改變，才能變態發育成稚貝，育苗生產往往在這段時期出現較高死亡率，所以幼蟲下潛附著后的半個月時間里技術管理工作顯得尤為重要，應保證餌料的充足、營養的全面及水質的良好。

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（收稿日期：2016-11-18）