吡格列酮對AD模型大鼠學習記憶障礙的保護作用研究

摘要：目的 臨床分析吡格列酮對AD模型大鼠學習記憶障礙的保護作用。方法 在雙側海馬CA1區注射AB25-35，構建AD大鼠模型，選擇吡格列酮進行灌胃，待4w后，給予空間探索、Morris水迷宮實驗，監測吡格列酮對AD模型大鼠學習記憶障礙的保護作用。結果 經過分析后得知，對于大鼠的海馬CA1區，選擇AB25-35進行注射，模型大叔組的逃避潛伏期顯著性延長，且穿越平臺次數逐漸減少，平臺滯留時間顯著縮短。另外，吡格列酮組逃避潛伏期比模型大鼠組明顯要短，穿越平臺次數顯著增多，平臺滯留時間顯著性延長。同時，吡格列酮組和正常組對比，均無顯著性差異（P<0.05）。結論 針對AD大鼠模型，選擇AB25-35進行CA1區注射，會嚴重阻礙大鼠學習記憶能力，吡格列酮對大鼠的學習記憶障礙，具有良好改善、保護作用。

關鍵詞：吡格列酮；AD模型；大鼠；學習記憶障礙

近些年來，隨著人口老齡化逐漸發展，AD患病率呈逐漸增長趨勢，危害性也隨之增加。想要減少AD病發率，加強老年疾病的預防、治療十分重要。AD病理改變主要為神經元丟失、神經原纖維纏結和老年斑。同時，B淀粉樣蛋白作為老年斑重要成分，因過量沉積、生成，引起一系列反應，使得學習記憶能力減退，出現認知障礙。所以，B淀粉樣蛋白是AD病發的關鍵環節、起始因素。AB可減少淀粉生成，抑制AB異常沉積。吡格列酮作為一種新型胰島素制劑，對胰島素具有較強敏感性，可降低胰島素抵抗。根據一些臨床研究表明，通過吡格列酮，能夠激活過氧化物酶體，為神經變性疾病的治療，提供重要保障[1]。在本組實驗中，主要分析吡格列酮對AD模型大鼠學習記憶障礙的保護作用，現總結如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇雄性大鼠，體重350～375g，選擇B淀粉樣蛋白，采用DMEM溶解，在37℃溫度下，孵育5d，待成為聚集狀態后，選擇吡格列酮進行注射。

1.2方法 選擇44只SD大鼠，按照隨機分配方式，將其分為對照組、低劑量吡格列酮組、模型組與高劑量吡格列酮組，每組11只。選擇4ml/kg水合氯醛進行腹腔麻醉，在腦立體定位儀上固定大鼠頭顱，接著頭皮備皮，再消毒手術區皮膚，處于無菌條件下操作，選擇正中切口，將前鹵暴露。按照大鼠腦立體的定位圖譜，選擇前鹵作為原點，先后2.9mm和旁開1.9mm，將露骨鉆開。從腦表面開始，選擇微量進樣器，進針2.9mm到海馬。

對照組選擇3ul生理鹽水進行注射，其他三組選擇5ul的AB25-35進行注射，然后停針5min，待縫合完畢后，保暖觀察，直到動物蘇醒。由建模開始，從第2d時，低劑量吡格列酮組給予40mg/kg吡格列酮，高劑量組給予80kg吡格列酮，選擇吡格列酮進行灌胃，待4w后，給予空間探索、Morris水迷宮實驗，

選擇Morris水迷宮進行測試，仔細監測大鼠的記憶功能。在實驗結束當日，選擇冷鹽水灌注。選擇4%多聚甲醛磷酸鹽緩沖液固定，采用石蠟包埋。切割石蠟成片后，選擇免疫組織化學，對大鼠海馬區域的B淀粉樣蛋白表達進行觀測。

同時，開展空間探索實驗，待試驗第6d時，將平臺拆除，大鼠面向池壁，由四個不同象限放入水池，待2min測試后，記錄大鼠跨越平臺次數。

1.3統計學分析 本次研究患者的臨床資料與數據全部采用SPSS18.0統計學軟件進行處理分析，計量資料采用t檢驗，治療前后采用χ2檢驗，P<0.05為差異有明顯性，有統計學意義。

2 結果

經過Morris的水迷宮實驗：對照組潛伏期（12.37±1.65），模型組的潛伏期（37.24±3.62）s。對照組平臺跨越次數（7.13±3.48），模型組平臺跨越次數（3.55±1.23），對照組滯留平臺時間（2.4±1.23）s，模型組滯留平臺時間（1.02±0.59）s，模型組、對照組比較，存在明顯差異（P<0.05）。

吡格列酮組和模型組對比：低劑量組潛伏期（19.74±2.47）s，高劑量組潛伏期（21.84±2.14）s，與模型組潛伏期相比，顯著性縮短（P<0.05）。低劑量組平臺跨越次數（5.02±1.87），高劑量平臺跨越次數（4.47±1.16），與模型組相比，顯著性增多（P<0.05），高劑量組平臺滯留時間（1.52±0.66）s和低劑量組（1.71±0.73）s，比模型組顯著性延長（P<0.05）。同時，吡格列酮組和正常組對比，均無顯著性差異（P<0.05）。

3 討論

對于大多數老年癡呆而言，其實智力都是正常。然而，也有一些老年患者會出現持久性、暫時性認知損害。根據相關研究報道，國外發生率30%～68%，我國發生率31%～39%。近些年來，老年癡呆患病例數正逐年增長，老年癡呆患者治療，是國內外神經外科的重點研究課題。目前，AD對老人認知障礙影響是十分嚴重[2]。

在臨床上，對于AD的治療，尚無明顯治療藥物。總而言之，B淀粉樣蛋白，作為AD病發機制的關鍵環節、起始因素。對于B淀粉樣蛋白沉積的抑制，是AD治療靶向用藥。在本組實驗中，大鼠AD建模后，通過水迷宮實驗，仔細監測癡呆大鼠變化，根據結果顯示，模型組比對照組潛伏期明顯延長，滯留平臺時間有所縮短，平臺跨越次數有所減少。在額活命，AB25-35建模成功。

同時， 吡格列酮組和模型組相比，潛伏期明顯縮短，平臺跨越次數有所增加，滯留平臺時間有所延長。這說明， 吡格列酮對癡呆大鼠而言，可有效改善學習記憶能力。根據相關學者研究，PPARY激動劑，對轉基因動物AB含量，具有良好抑制作用，可保護海馬椎體神經元，以免于AB神經損傷。

然而，吡格列酮在藥物研究中，作用機制尚不明確，根據相關研究表明，BDNF、AB神經營養因子，對于神經元細胞存活、功能維護，呈相反生物學作用。在BDNF作用下，淀粉樣前提蛋白的APP分裂，產生了AB，可導致神經元軸突損傷，引起微管結構異常，導致BDNF的運輸障礙，進而減少海馬區的BDNF含量，使得神經元死亡，進而產生AD[3]。所以，對于AD模型的研究十分重要，對老年癡呆具有良好預防、治療依據。針對AD大鼠模型，選擇AB25-35進行CA1區注射，會嚴重阻礙大鼠學習記憶能力，吡格列酮對大鼠的學習記憶障礙，具有良好改善、保護作用。

參考文獻：

[1]陳麗，劉玥，高甜，等.吡格列酮對AD模型大鼠學習記憶障礙的保護作用研究[J].醫學信息，2014，（22）：64-64.

[2]符鵬程.吡格列酮對AD大鼠記憶障礙的作用及其機制的研究[D].中南大學，2009.

[3]袁樹華.胰島素抵抗大鼠認知功能及其腦組織APP代謝及吡格列酮干預效果的研究[D].山東大學，2010.編輯/蔡睿琳