人胃癌組織Ki—67蛋白的表達與患者預后的關系

摘要：目的 探討Ki-67的表達與胃癌臨床病理特征及預后的關系。方法 采用免疫組織化學技術，檢測326例胃腺癌組織及相應326例正常胃粘膜組織中Ki-67蛋白的表達情況，應用χ2檢驗、Kaplan-Meier生存分析及COX回歸分析分析其與患者臨床病理特征及預后的關系。結果 胃癌組織中Ki-67蛋白明顯高于正常胃粘膜組織（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析顯示Ki-67蛋白表達與胃癌患者的預后密切相關（χ2=8.086，P=0.005），COX回歸分析顯示Ki-67為胃癌患者預后的獨立因素（P=0.002）。結論 Ki-67的表達與胃癌預后密切相關，為胃癌患者預后的獨立因素。

關鍵詞：胃癌；Ki-67；臨床病理特征；預后

胃癌（gastric cancer，GC）為消化道腫瘤中發病率最高的惡性腫瘤。我國每年胃癌新發病例占全世界新發病例數的42%，發病率、死亡率為全球平均水平2倍。Ki-67是較為肯定的與細胞周期相關的核增殖標志物，僅僅存在于增殖細胞的細胞核內[1]，其表達隨細胞周期的進展而增加，為反應細胞增殖活性的重要指標，廣泛用于腫瘤細胞的增殖評估。

1資料與方法

1.1組織標本來源 選取收集2005年3月～2010年3月于安陽市腫瘤醫院接受胃癌根治術治療的326例胃癌患者的手術標本，入組患者術前均排除遠處轉移，均未接受放化療、免疫治療，術后均經過病理確診。標本應用多聚甲醛固定，常規石蠟包埋，連續切片，分別用于HE染色及免疫組織化學染色。正常胃粘膜組織：取自手術標本中距癌組織邊緣5cm以上的手術切緣，均經病理學證實為正常的胃粘膜組織。

1.2免疫組化

1.2.1方法 免疫組織化學方法采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法技術（streptavidin-perosidase，SP技術），染色步驟嚴格按照試劑盒說明書進行；

1.2.2結果判定 采用雙評分半定量積分法，對Ki-67的免疫組化結果進行分析。以出現棕黃色或棕色顆粒的細胞作為陽性細胞，Ki-67抗原陽性表達為細胞核呈棕褐色顆粒，在高倍鏡下（400倍高倍鏡下視野），隨機選取5個視野（每個視野計數的細胞數不少于200個）。

1.3統計學方法 采用SPSS 17.0軟件進行。免疫組化結果相關分析采用χ2檢驗。生存根據Kaplan-Meier方法進行分析，采用log-rank檢驗（Mantel-Cox）。以α=0.05為顯著性水準。

2結果

2.1 Ki-67蛋白在胃癌組織與正常胃粘膜組織中的表達 應用免疫組織化學技術（SP）檢測326例胃癌及相應的正常胃黏膜組織中Ki-67蛋白的表達。結果顯示，Ki-67蛋白主要表達于癌細胞胞核，呈棕黃色顆粒。在326例胃癌組織中，有204例Ki-67表達陽性，陽性表達率為62.57%。顯著高于正常胃黏膜組織（11.96%），胃癌組與正常胃粘膜組Ki-67的陽性表達率有顯著性差異（χ2=178.602，P=0.000）。

2.2 Ki-67與胃癌臨床病理學的關系 應用SPSS17.0統計軟件分別從性別、年齡、TNM分期、組織分化程度和有無淋巴結轉移等方面分析Ki-67蛋白表達與胃癌臨床病理學之間的關系，進一步研究Ki-67蛋白在胃癌發生發展過程中的可能作用。

2.3 Ki-67 蛋白表達與胃癌患者預后之間的關系

2.3.1預后單因素分析 應用Kaplan-Meier生存曲線分析Ki-67蛋白表達與胃癌患者存活時間之間的關系。入組的326例胃癌患者均具有完整的隨訪資料，術后第1年每3個月隨訪1次，以后每半年隨訪1次。隨訪形式以門診復查為主，其次為電話方式。隨訪時間3～87個月，中位隨訪時間為36.5個月。將326例胃癌患者的病理學資料：腫瘤分化、TNM分期、淋巴結轉移及Ki-67蛋白表達情況進行單因素分析，結果顯示，Ki-67蛋白表達與胃癌患者的預后密切相關（χ2=8.086，P=0.005）。同時發現TNM分期、淋巴結轉移、腫瘤分化程度對胃癌患者的預后具有統計學意義（P<0.05）。

2.3.2預后多因素分析 為進一步明確Ki-67蛋白表達的獨立性預后價值，應用COX模型對單因素分析中有顯著意義的4個變量進行多因素分析，COX回歸分析顯示Ki-67、淋巴結轉移及TNM分期為胃癌患者預后的獨立因素（P<0.05），而腫瘤分化程度雖然在單因素分析中與胃癌患者預后相關，但經COX回歸分析，無明顯統計學意義，并非影響胃癌患者預后的獨立因素。

3討論

Ki-67是較為肯定的與細胞周期相關的核增值標志物，僅僅存在于增值細胞的細胞核內[1]，所編碼的基因位于第10號染色體上，其表達隨細胞周期的進展而增加，細胞分裂周期中，G0期不表達，G1后期開始表達，S和G2逐漸升高，M期達到高峰，細胞分裂結束后迅速降解消失，為反應細胞增值活性的重要指標，廣泛用于腫瘤細胞的增殖評估[2]。

進一步分析Ki-67蛋白表達與胃癌患者預后的關系。應用Kaplan-Meier生存曲線分析Ki-67蛋白表達與胃癌患者存活時間之間的關系。將326例胃癌患者的病理學資料：腫瘤分化、TNM分期、淋巴結轉移及Ki-67蛋白表達情況進行單因素分析，結果顯示，Ki-67蛋白表達與胃癌患者的預后密切相關（χ2=8.086，P=0.005）。同時發現TNM分期、淋巴結轉移、腫瘤分化程度對胃癌患者的預后具有統計學意義（P<0.05）。

參考文獻：

[1]Nowieki M，Ostalska，Nowieka D，Miskowiak B，et al.Prognostic significance of Ki-67 negative blaste cell clone in the high risk group of children treated for acute myeloid leukaemi[J].Folia Histochem Cytobiol，2006，44（1）：49-52.

[2]Gerdes J，Lemke H，Baisch H，Wacker HH，Schwab U，Stein H.Cell cycle analysis of a cell proliferation.associated humannuclear antigen defined by the monoclonal antibody Ki-67[J].J Immunol，1984，133：1710-1715.編輯/丁一